Cтраница 2
В целом рибосомный рибонуклеопротеид ведет себя очень похоже на изолированную высокополимерную рибосомную РНК, несмотря на присутствие большого количества белков. Однако компактная структура рибонуклеопротеида всегда оказывается существенно стабильнее как к удалению Mg2, так и к понижению ионной силы, а также к нагреванию. Более того, изолированная РНК не достигает состояния своего максимально компактного сворачивания, свойственного ей в составе рибосомной частицы, или, во всяком случае, оно не стабильно, пока с ней не связан определенный минимальный набор белков ( см. RV. Создается впечатление, что вся специфичность сворачивания рибонуклеопротеида определяется его РНК ( формированием третичной структуры РНК), в то время как белки стабилизируют отдельные ключевые элементы структуры РНК, включая некоторые спирали РНК. [16]
Оказалось, что в эукариотических клетках рибосома с экспонированной сигнальной последовательностью растущего пептида действительно сначала взаимодействует со специальной малой частицей, получившей название сигналузнающей частицы или SRP. Частица представляет собой 11S рибонуклеопротеид, содержащий 7S РНК длиной около 300 нуклеотидов и шесть белков ( полипептидов) с молекулярными массами 72000, 68000, 54000, 19000, 14000 и 9000 дальтон; все эти компоненты находятся в частице в эквимолярных количествах, по одному на частицу. Частицы, по-видимому, универсальны, во всяком случае среди эукариот. Они имеют определенное сродство к мембране эндоплазматиче-ского ретикулума, так что могут находиться с ней в лабильной и обратимой ассоциации, хотя значительная их часть представляет собой растворимый цитоплазматический компонент. Кроме того, они имеют некоторое, относительно небольшое, сродство и к рибосомам. Присутствие на рибосоме сигнального пептида повышает сродство рассматриваемых частиц к рибосоме на несколько порядков. [17]
Физико-химические свойства переносчика могут определяться природой белка, в частности наличием в нем сульфгидрильных групп. Для функционирования в качестве переносчика рибонуклеопротеид образует комплекс с кальцием. Образование этого комплекса способствует избирательному поглощению одновалентных и других катионов благодаря изменению степени сродства переносчика с различными катионами и анионами. В работах Хенсона и сотрудников ( Hanson, 1957; Foote, Hanson, 1964) приводится большой экспериментальный материал, подтверждающий изложенную выше гипотезу. В опытах Кегля ( Kogl, 1956) с корнями овса и в наших предварительных опытах с отрезками мезокотилей кукурузы были получены прямые доказательства активирующего влияния ауксина на поглощение кальция. Если принять, что ауксин каким-то образом способствует связыванию кальция рибонуклео-протеидными переносчиками, то это должно повлиять на поглощение ионов. Рейнхольд ( Reinhold, 1958) обнаружила, что отрезки гипокотилей подсолнечника, обработанные ауксином, экскретируют большое количество аммония. Илан и Рейнхольд ( Пап, 1962; Пап, Reinhold, 1963) отметили специфическое действие ИУК на поглощение моновалентных катионов. [18]
Каждая рибосомная субчастица содержит много различных белков, и большинство из них представлено лишь одной молекулой на рибосому. В этом состоит коренное отличие структурно асимметричного рибосомного рибонуклеопротеида от вирусных нуклеопротеидов, образованных за счет упорядоченной упаковки многих идентичных белковых субъединиц. [19]
На присоединение белка S2 влияет белок S3, а также, по-видимому, локальная структура рибонуклеопротеида. Самый крупный кислый белок S1 также требует правильной укладки рибонуклеопротеида, и оказалось трудным определить, какие конкретные белки ответственны за его включение. [20]
Живые клетки, за исключением сперматозоидов, в норме содержат значительно больше рибонуклеиновой, чем дезоксирибонукле-иновой кислоты. На методы выделения дезоксирибонуклеиновых кислот оказало большое влияние то обстоятельство, что, тогда как рибонуклеопротеиды и рибонуклеиновые кислоты растворимы в разбавленном ( 0 15 М) растворе хлористого натрия, дезоксири-бонуклеопротеидные комплексы фактически в нем нерастворимы. [21]
Метод предполагает получение высокополимерных ДНК и РНК, свободных от белков. Под действием водонасыщенного фенола на ну-клеопротеиды осуществляется их депротеинизация, причем при различных значениях рН для дезокси - и рибонуклеопротеидов. Обработка фенолом инактивирует нуклеазы, что позволяет получать нуклеиновые кислоты в нативном состоянии. [22]
Оно предварительно отделить цитоплазму от ядер и использовать только цитоплазму. Рибонуклеопротеид осаждают затем из экстракта при рН 4 5 и вновь растворяют его в растворе бикарбоната натрия. Продолжительное встряхивание с несколькими последовательно сменяемыми порциями хлороформа, содержащего небольшое количество октилового спирта, приводит к удалению белка; нуклеиновую кислоту, остающуюся в водном растворе, осаждают в виде натриевой соли при добавлении спирта. [23]
Спираль первого порядка толщиной 100 - 150 А образуется с участием аргининовых гистонов. Высшие уровни спирализа-ции возникают под влиянием лизиновых и других гистонов и негистоновых белков. На этих уровнях спирализации вплетаются рибонуклеопротеиды и липиды. [24]
Далеко не все они связаны в ядре с ДНК или с нуклеогистоновой фибриллой. Многие из них входят в состав рибонуклеопротеидов ( РНП), которыми богаты тран-скрипционно активные ядра. [25]
Далеко не все они связаны в ядре с ДНК или с нуклеогистоновой фибриллой. Многие из них входяг в состав рибонуклеопротеидов ( РНП), которыми богаты тран-скрипционно активные ядра. [26]
Далеко не все они связаны в ядре с ДНК или с нуклеогистоновой фибриллой. Многие из них входят в состав рибонуклеопротеидов ( РНП), которыми богаты тран-скрипционно активные ядра. [27]
Для получения рибонуклеопротеидов свежий материал на холоде трехкратно экстрагируют охлажденным 0 14 М раствором NaCl при частом взбалтывании. Каждую экстракцию продолжают 45 - 60 мин. Все три полученные центрифугата соединяют, и осаждают рибонуклеопротеиды при изоэлектрической точке с добавлением 10 % - ного раствора уксусной кислоты. Выпавший осадок перерастворяют в 0 2 % - ном NaOH и вновь осаждают уксусной кислотой. [28]
Крупная клетка в центре - гемоцитобласт; интенсивное поглощение обусловлено рибонуклеопротеидом в цитоплазме. Внизу, справа, - полиморфноядернъш лейкоцит; видно только ядро. [29]
В растущих вегетативных органах растений ИУК главным образом связывается с протеидами - рибо - и дезоксирибонуклеопротеидами. При количественном определении связанной ИУК с нуклеопротеидами в начале необходимо получить препараты рибонуклеопротеидов и дезок-сирибонуклеопротеидов. [30]