Cтраница 3
РИФ ( метод флуоресцирующих антител) применяются для индикации возбудителей заразных заболеваний, изучения антигенной структуры микроорганизмов и других биологических объектов, а также при определении вида антител и их уровня в сыворотках больных людей и иммунизированных животных. Они основаны на свойстве флуоресцирующих антител специфически соединяться с гомологичными антигенами микробов, риккетсий, вирусов и других биологических объектов и вызывать их свечение в фиолетовом и ультрафиолетовом свете люминесцентного микроскопа. Флуоресцирующие антитела являются своеобразными иммунохимическими индикаторами на патогенные микроорганизмы и антигенные структуры животных и растительных организмов. Они представляют собой иммунные сыворотки или их гамма-глобулиновые фракции, химически соединенные с флуорохромами, то есть с веществами, обладающими способностью светиться ( флуоресцировать) в ультрафиолетовых и фиолетово-синих лучах. [31]
Быстрая смерть вызывается, по-видимому, не бурным размножением риккетсий, а токсином. Этот токсин выделить из риккетсий до сих пор не удалось, но существование его доказывается тем фактом, что риккетсий, убитые ультрафиолетовыми лучами, не теряют своей токсичности для мышей. [32]
К антибиотикам-макролидам относятся представители, содержащие лактонное кольцо, связанное с одним или несколькими углеводными остатками; последние обычно представляют собой остатки аминосахаров, сообщающие макролидам слабо основной характер. Все они продуцируются лучистыми грибами рода Streptomyces, выделенными из почв, и отличаются значительной бактериостатической активностью по отношению к большинству грамотрицательных бактерий, риккетсий, крупных вирусов и простейших. Большинство из них активны in vitro и in vivo. Отмечено также, что бактерии, ставшие устойчивыми к пенициллину, стрептомицину, тетра-циклинам или хлорамфениколу, остаются чувствительными к макролидам. Наиболее широко из макролидных антибиотиков применяют эритромицин, обладающий низкой токсичностью и высокой антимикробной активностью. [33]
Мурамовая кислота впервые изолирована в 1956 г. из гидролизатов культур Bacillus megaterium, В. В дальнейшем было показано, что она содержится в препаратах клеточной стенки большинства исследованных грамположительных и грам-отрицательных бактерий, в клеточных стенках сине-зеленых водорослей, а также риккетсий. [34]
Основным переносчиком Rickettsia prowazeki является вошь Pediculus humanus de Geer. При питании этой вши риккетсий попадают в ее кишечный эпителий, первоначально проникая в мускулатуру кишечника, а затем, сосредоточиваясь в цитоплазме клеток эпителия, где риккетсий размножаются. Клетки с инфекцией выпадают в просвет кишечника, а когда масса риккетсий переполняет клетку, клетка разрывается, и ее содержимое вместе с массой риккетсий выводится наружу вместе с экскрементами. Вначале пораженные клетки возмещаются за счет регенерации, но затем организм оказывается неспособным к дальнейшей регенерации погибших клеток, и вошь погибает. Помимо собственно разрушающего действия риккетсий на пораженные клетки, на них влияет также выделяемый паразитом токсин. В этих случаях не происходит сплошного заражения эпителия, но клетки поражаются и погибают под действием токсина. Перед гибелью вши гемоглобин высосанной ею крови растворяется в гемолимфе насекомого, в связи с чем тело таких вшей становится кроваво-красным, и они погибают через 3 - 24 часа. Wolbach et Todd) нормально развивается в эпителии кишечника блох Nosopsyllus fasciatus Bosc, Xenopsylla astia Rotsch. Экспериментально эта риккетсия была перенесена также на Polyptax spinulosa ( Burmeister), на платяную вошь и некоторых других насекомых, на которых она развивается, как и предыдущий возбудитель. [35]
Отсюда возбудитель попадает в кровь и разносится по всему организму. Риккетсиемия и токсемия характеризуют развитие марсельской лихорадки. Риккетсий паразитируют в эндотелии сосудов, в результате чего развивается умеренно выраженный пролиферативно-деструктив-ный панваскулит. Эндотоксин риккетсий вызывает функциональные и морфологические изменения в сердечно-сосудистой, нервной и других системах. Существенное значение в патогенезе болезни имеет аллергический компонент. Переболевшие, как правило, приобретают стойкий пожизненный иммунитет. [36]
Многочисленные работы, проведенные по изучению бактериального спектра террамицина, показывают, что он обладает широкой областью действия как против грамм-положительных, так и против грамм-отрицательных видов микроорганизмов. Особенно ценным свойством террамицина является его антибактериальная активность против риккетсий и вирусов. [37]
Передача грибных, бактериальных болезней и риккетсий таким путем не происходит. У некоторых групп насекомых довольно часто инфекция переносится при уколе яйцекладом паразитических насекомых. Классические примеры такой передачи инфекции известны для простейших, вирусов, бактерий и риккетсий. Паразитические нематоды активно мигрируют и самостоятельно внедряются в тело хозяина. [38]
Среди диких животных теплокровные хозяева пока не выявлены, но установлено временное бессимптомное носительство риккетсий собаками. Естественным резервуаром и переносчиком возбудителя являются собачий клещ и другие виды иксодовых клещей, которые пожизненно сохраняют и передают риккетсий своему потомству трансовари-ально. Заражение человека происходит через слюну клеща во время кровососания. Возможно заражение при раздавливании клещей и втирании риккетсий в поврежденную кожу, слизистую оболочку носа и конъюнктиву. Собачий клещ сравнительно редко нападает на человека, поэтому марсельская лихорадка регистрируется главным образом в виде спорадических случаев в теплое время года. [39]
В ходе культивирования интенсивность метаболизма таких клеток ослабевает, но добавление АТР, органических кислот и аминокислот вновь стимулирует их дыхание. Риккетсий, таким образом, обладают собственным обменом веществ; однако они, вероятно вследствие изменения проницаемости клеточной поверхности, не способны регулировать поглощение и выведение метаболитов. [40]
Выделение риккетсий Провачека из крови больных, вшей, отловленных на больных, путем культивирования в желточном мешке куриного эмбриона в организме вшей или культуре клеток требует определенного навыка и связано с большой опасностью лабораторного заражения. Такие исследования ( довольно редко) проводят в специализированных лабораториях. По методу Романовского - Гимзы они окрашиваются в пурпурно-фиолетовый цвет, по Здродовско-му - в ярко-красный. Обнаружить риккетсий в материале можно также с помощью РИФ ( прямой вариант) и ПЦР. [41]
В первых исследованиях было установлено также, что выживаемость риккетсий, определяемая по их ин-фекционности, значительно возрастает, если в солевой раствор добавить одну из аминокислот, а именно глу-таминовую кислоту. Дальнейшие исследования обнаружили, что риккетсий могут окислять глутаминовую кислоту. Оказалось, что они способны также медленно окислять два других вещества - пировиноградную и янтарную кислоты, которые, подобно глутаминовой кислоте, окисляются в большинстве животных и растительных тканей. Из многих испытанных веществ только эти три могли быть использованы в заметном количестве риккетсиями сыпного тифа. Прайс обнаружил, что риккетсий пятнистой лихорадки могут окислять еще и три других вещества - кетоглутарат, фумарат и оксалацетат. [42]
Так же, как и животные, человек ( в данном случае - около 10 % населения) может быть переносчиком факультативно патогенных микроорганизмов, которые не причиняют ему вреда. В организме такого рода носителей могут жить, например, стафилококки, стрептококки и сальмонеллы. Попытка искоренения этих возбудителей профилактически, то есть с помощью антибиотиков или хемоте-рапевтических средств, нереальна. Рациональной является только такая терапия, которая приводит к сведению повышенной плотности популяций патогенов ниже критического уровня. В смысле профилактики результативными являются только индивидуальные прививки против определенных бактерий, риккетсий или вирусов, патогенных для позвоночных. [43]
Не все патогены насекомых можно считать полностью индифферентными в отношении безопасности. Так, возбудители дензонуклео-за и радужные вирусы, а также некоторые виды риккетсий могут размножаться в определенных линиях клеток позвоночных. При инъекции или вдыхании Rickettsiella popilliae у мышей и кроликов возникали патологические реакции. Такие патогены насекомых, как микроспоридии рода Nosetna, например N. С ( но не при 37 С) размножаются в культурах клеток позвоночных. Однако до сих пор при испытании вируса дензонуклеоза, радужных вирусов, риккетсий или микроспоридий вредное влияние на человека или позвоночных не было отмечено. [44]
Все эти вещества участвуют в широко известном цикле лимонной кислоты. Этот цикл осуществляется митохондриями, маленькими тельцами, находящимися в клетках животных. На последних стадиях цикла митохондрии используют неорганический фосфат-для образования богатого энергией соединения - аденозинтрифос-фата ( АТФ), который поставляет энергию для многих реакций внутри животной клетки. В настоящее время есть данные, свидетельствующие в пользу того, что в риккетсиях может осуществляться весь цикл лимонной кислоты. Известно, например, что окисление риккетсиями глутаминовой кислоты зависит от присутствия неорганического фосфата, хотя превращение неорганического фосфата в АТФ в процессе этого окисления показать не удалось. Трудность подобных исследований в значительной мере заключается в том, что еще никому не удалось приготовить из риккетсий активные экстракты, в которых сохранялась бы их ферментативная активность. [45]