Cтраница 2
В настоящее время не доказано существование полисахаридов, состоящих более чем из шести типов моносахаридных звеньев. В большинстве случаев компонентами полисахаридов являются пентозы, гексозы и их производные, например гексуроновые кислоты, 6-дезоксигексозы, 2-амино - 2-дезоксигексозы ( гексозамины) и метилированные сахара. [16]
Не намного лучше обстоит дело с удельным вращением. Таким образом, даже совпадение обеих этих констант для двух моносахаридов может оказаться случайным с вероятностью в не-сколько сотых процента. Ко всему этому нужно добавить, что очень многие моносахариды, а особенно метилированные сахара, весьма трудно получить в кристаллическом состоянии, причем сделать это тем труднее, чем хуже очищено вещество и чем меньшим его количеством располагает исследователь. [17]
В этой главе сахара разделены на три группы: I - моносахариды и олигосахариды, II - замещенные сахара и производные Сахаров, III - полисахариды. К первой группе отнесены простые альдозы, кетозы и гексометилозы ( метилпентозы), содержащие от 4 атомов углерода и выше, а также их олигосахариды, содержащие до 14 сахарных остатков. К последней отнесены сахароспирты, кислоты, лактоны и ангидриды Сахаров, дезоксиуглеводы, гликали, метилированные сахара, метилгликозиды, фосфорные офиры и аминосахара. Наконец, для группы полисахаридов приведены примеры их хроматографии на бумаге и методы определения строения полисахаридов. [18]
На бумаге из стеклянных волокон, предварительно забуференной, можно четко разделять различные монозы, биозы, триозы, галактуровую и глюкуроновую кислоты. В микроорганизмах можно определять связанные углеводы, свободные моно - и дисахариды в растительном материале, также свободные олигосахариды, свободные углеводы в крови и моче, молоке, наблюдать гидролиз и синтез олиго - и полисахаридов, энзиматические превращения моносахаридов в связи с процессами окисления, восстановления, изомеризации, реакции углеводов с азотсодержащими соединениями, контролировать чистоту углеводов и идентифицировать их, определять кислоты и ла-ктоны, уроновые кислоты, кетокислоты, метилированные сахара, дезоксисахара, аминосахара, полисахариды, инозит, сорбит, эфиры фосфорной кислоты, структуру галактоманнана, эремурана, новых галактозидов, проследить превращение сахарозы, синтез олигосахаридов в растущей культуре. Бумажная хроматография применяется в сахарной промышленности, в пивоварении. Мало еще разработана теория распределительной хроматографии углеводов, мало изучены возможности разделения оптических изомеров и антиподов. [19]
В этом случае наиболее пригодной оказалась хроматографическая бумага № 77 - 78 фабрики Гознак. При использовании в качестве растворителя системы этилацетат - пиридин - вода достигается четкое разделение метилированных альдоз с очень близким значением Rf, при этом сахара распределяются в виде резко ограниченных полос. Разделение завершается за 40 - 48 час. Разделенные на хроматограммах метилированные сахара проявлялись анилинфталатом или диме-тиланилином. [20]
Для разделения полученных после гидролиза или метаиолиза метиловых эфиров моносахаридов ли их метилгликозидов применяют различные виды хроматографии: распределительную хроматографию на бумаге и колонках с целлюлозой, тонкослойную хроматографию на си-ликагеле. Высокой разрешающей способностью при использовании небольших количеств веществ обладает г-азо-жидкостная хроматография. Перед анализом смесь, содержащую метиловые эфиры моносахаридов, дополнительно ацетилируют или метилируют для повышения летучести производных моносахаридов. Этим методом удается разделить не только метилированные сахара, но и а - и ( 3-аномеры. [21]
Диметиланилин ( Д 44) дает различные окраски с триметил - и диметшь производными ксилозы или арабинозы. Для отличия тетраметилфрукто-фуранозы от тетраметилглюкопиранозы, обладающих одинаковыми величинами R, Гирст и сотрудники применяют для проявления по Джонсу щавелевокислый анилин и щавелевокислую мочевину. Первый проявитель реагирует с тетраметилглюкозой, а второй - с тетраметилфруктозой. В некоторых сомнительных случаях при идентификации метилированных Сахаров целесообразно применить для проявления по Цифонелли и Смиту перйодат калия и бензидин. С этими проявителями реагируют только метилированные сахара, содержащие свободную а-диоловую группировку. [22]
Хлороформные экстракты переливают в те же самые колбочки, в которых проводилась реакция первоначально, и упаривают растворитель досуха. В каждую колбочку добавляют 0 5 г окиси серебра, полученной предварительно из нитрата серебра ( примечание 2), 5 мл йодистого метила и 10 мл диметилформамида. Колбочки присоединяют к холодильникам, устанавливают на столик магнитной мешалки и проводят реакцию в течение 10 ч при слабом кипячении реакционной смеси. После этого растворитель упаривают досуха, добавляют в каждую колбочку 15 мл воды, размешивают содержимое шпателем и отфильтровывают. Осадок промывают водой и промывные воды присоединяют к фильтрату. Затем все упаривают досуха в роторном испарителе, извлекают, метилированные сахара хлороформом и, как описано выше, еще раз убеждаются в полноте метилирования хроматографией на пластинке. [23]