Cтраница 2
В непрерывной полипептиной цепи рибонуклеазы попарно связаны дисульфидными мостами остатки цистеина, обозначенные одинаковыми номерами. Очевидно, что сама по себе последовательность аминокислот в молекуле рибонуклеазы еще совершенно ничего не говорит о ее каталитическом действии на связь фосфорной кислоты с рибозой в РНК. В высшей степени интересны исследования рибонуклеазы, выполненные Анфисеном. Если подействовать р-оксиэтилмеркаптаном на раствор рибонуклеазы в водном - 50 % - ном растворе мочевины ( где а-спираль нарушена полностью) и таким образом разорвать все S-S - мосты, то каталитические свойства ферментов полностью исчезают. Однако если полученный белок, содержащий SH-группы на месте S-S - мостов и освобожденный от мочевины, окислить воздухом, то все SH-группы попарно окисляются в S-S - мосты, структура рибонуклеазы воссоздается, и вновь приобретается активность. Следовательно, S-S - мосты в данном белке ( и это типично) возникают на прежних местах и, несомненно, одновременно воссоздается не только вторичная, но и третичная структура, свойственная рибонуклеазе. Если же окисление производить в растворе мочевины, где обычные водородные связи вторичной структуры нарушены, то сшивание происходит в беспорядке или в ином порядке и активного фермента не получается. Таким образом, как оказалось в этом случае, не дисульфидные мосты, а водородные связи вторичной структуры предопределяют третичную структуру, сближающую определенные цистеиновые SH-группы и создающие возможность окисления их в цис-тиновые мосты S-S. Вместе с тем ясно, что за ферментативную активность ответственна совокупность первичной, вторичной и третичной структур. [16]
В непрерывной полипептидной цепи рибонуклеазы попарно связаны дисульфидными мостами остатки цистеина, обозначенные одинаковыми номерами. Очевидно, что сама по себе последовательность аминокислот в молекуле рибонуклеазы еще совершенно ничего не говорит о ее каталитическом действии на связь фосфорной кислоты с рибозой в РНК. В высшей степени интересны исследования рибонуклеазы, выполненные Анфинсе-ном. Если подействовать ( i-оксиэтилмеркаптаном на раствор рибонуклеазы в водном - 50 % - ном растворе мочевины ( где а-спираль нарушена полностью) и таким образом разорвать все S-S - мосты, то каталитические свойства ферментов полностью исчезают. Однако если полученный белок, содержащий SH-грушш на месте S-S - мостов и освобожденный от мочевины, окислить воздухом, то все SH-группы попарно окисляются в S-S - мосты, структура рибонуклеазы воссоздается, и вновь приобретается активность. Следовательно, S-S - мосты в данном белке ( и это типично) возникают на прежних местах и, несомненно, одновременно воссоздается не только вторичная, но и третичная структура, свойственная рибонуклеазе. Если же окисление производить в растворе мочевины, где обычные водородные связи вторичной структуры нарушены, то сшивание происходит в беспорядке или в ином порядке и активного фермента не получается. Таким образом, как оказалось в этом случае, не дисульфидные мосты, а водородные связи вторичной структуры предопределяют третичную структуру, сближающую определенные цистеиновые SH-группы и создающие возможность окисления их в цистиновые мосты S-S. Вместе с тем ясно, что за ферментативную активность ответственна совокупность первичной, вторичной и третичной структур. [17]
Ферменты, катализирующие расщепление углерод-углеродных связей, часто используют коферменты, такие как тиаминпирофос-фат и пиридоксаль, в качестве портативных аккумуляторов электронов. В таблице отсутствует также какая-либо обратимая окислительно-восстановительная система, в частности для одноэлектронных переносов. И здесь коферменты, а во многих случаях и ионы металлов, помогают заполнить этот пробел. Разнообразные функции ионов металлов обсуждаются ниже ( см. разд. На химика пять функциональных групп табл. 24.1.1 не производят особого впечатления в качестве списка реагентов. Даже нуклео-филы, обладающие, по-видимому, наивысшей четко выраженной внутренней реакционной способностью, присутствуют обычно в виде сопряженных кислот. И все же именно эти группы ответственны за выдающиеся каталитические свойства ферментов. Для того чтобы представить себе, как это может быть, следует рассмотреть их химическое поведение. [18]