Cтраница 2
Отделение окисленных жирных кислот от неокисленных представляет особый интерес при выделении простагландинов. Грин-и Самуэльсон [179], а также Андерсон - [180] разработали для этого различные элюирующие системы. Число, двойных связей в молекуле не оказывает существенного влияния на очередность элюирования в рассматриваемой системе. В этих системах простагландины либо мигрируют практически с фронтом растворителя, либо остаются близко к старту. [16]
Основу скелетной структуры соединений этой группы составляет углеводород прегнан. В ряде работ описано разделение этих соединений на самых различных адсорбентах с различными элюирующими системами. Шварц [202] разделил смесь 8 таких соединений на оксиде алюминия, предварительно дезактивированном часовым встряхиванием с 2 5 % - ной уксусной кислотой. [17]
Причиной этого является то, что для ФС до сих пор еще не подобрана подходящая элюирующая система. [18]
Рассмотрим в качестве примера разделение методом ЖХВД на силикагеле двух соединений с удовлетворительным коэффициентом емкости k и коэффициентом разделения а, близким к единице. На хроматограмме, полученной при элюировании 4 % - ным раствором эфира, пики таких соединений недостаточно хорошо разделены. Поэтому следует улучшить а, меняя состав элюирующей системы. С этой целью целесообразно, например, определить, как влияет на а переход к системе с 4 % этилацетата в пентане или 26 % дихлорметана в пентане. Нельзя ожидать, что замена пентана, например, на гексан окажет существенное влияние на а. При длительном хроматографировании методом классической колоночной хроматографии или при повторном разделении методом ЖХВД с безводными растворителями или системами растворителей вода из колонки постепенно удаляется, что ухудшает хро-матографические свойства колонки. Это явление особенно важно при работе с неполярными системами растворителей, когда эффективность колонки сильно зависит от содержания воды в адсорбенте и когда содержание воды убывает с возрастанием полярности элюирующих систем. Для сильнополярных растворителей этот эффект незначителен. Чтобы предотвратить его, можно или добавлять воду к растворителям или, что еще лучше, предварительно насыщать элюирующую систему водой в специальной колонке. [19]
Нишихара и Кито [261] модифицировали описанную методику, заменив элюирующую систему для проведения ТСХ во втором направлении на смесь хлороформ - ацетон - метанол - уксусная кислота - вода ( 40: 20: : 30: 3: 1) и применили ее для разделения первичного липид-ного экстракта. Ренконен и др. [1], а также авторы работ [280, 289, 290] использовали смесь, хлороформ - метанол - аммиак ( 65: 20: 4) для ТСХ в первом направлении вместо соответствующей системы в описанной выше методике. В работах [291-295] сходное разделение было получено в том случае, когда во второй элюирующей системе отсутствовал ацетон. [20]
Вопрос о механизме разделения на полиамидах все еще остается открытым. Согласно этой теории, хроматографирование на полиамидах идет в две стадии. В неводных элюирующих системах сольватируется гидрофобная часть, а в водных системах происходит сольватация фенольного гидроксила. [21]
При адсорбции на полярных адсорбентах решающее значение имеют число и характер полярных функциональных групп в молекуле адсорбированного вещества. В табл. 4.3 функциональные группы расположены в порядке возрастания адсорбируемости ( определенной на силикагеле) тех соединений, в состав которых входят эти группы [65]; такое распределение носит очень приближенный характер, поскольку существует еще различие между алифатическими и ароматическими соединениями. Далее, оказывают влияние величины дипольного момента и поляризуемости молекул. Влияние двойных или тройных связей на адсорбционные свойства ничтожно мало по сравнению с влиянием числа упомянутых функциональных групп. Влияние данной функциональной группы соединения на его адсор-бируемость различно для разных адсорбентов. Среди других факторов, в большей или меньшей степени влияющих на адсор-бируемость, следует упомянуть рН адсорбента, стерические факторы и полярность элюирующей системы. На адсорбцию на неполярных адсорбентах влияют главным образом размеры молекул ( они возрастают с возрастанием молекулярной массы, достигая определенного максимума, а затем убывают) и стерические факторы. [22]
Рассмотрим в качестве примера разделение методом ЖХВД на силикагеле двух соединений с удовлетворительным коэффициентом емкости k и коэффициентом разделения а, близким к единице. На хроматограмме, полученной при элюировании 4 % - ным раствором эфира, пики таких соединений недостаточно хорошо разделены. Поэтому следует улучшить а, меняя состав элюирующей системы. С этой целью целесообразно, например, определить, как влияет на а переход к системе с 4 % этилацетата в пентане или 26 % дихлорметана в пентане. Нельзя ожидать, что замена пентана, например, на гексан окажет существенное влияние на а. При длительном хроматографировании методом классической колоночной хроматографии или при повторном разделении методом ЖХВД с безводными растворителями или системами растворителей вода из колонки постепенно удаляется, что ухудшает хро-матографические свойства колонки. Это явление особенно важно при работе с неполярными системами растворителей, когда эффективность колонки сильно зависит от содержания воды в адсорбенте и когда содержание воды убывает с возрастанием полярности элюирующих систем. Для сильнополярных растворителей этот эффект незначителен. Чтобы предотвратить его, можно или добавлять воду к растворителям или, что еще лучше, предварительно насыщать элюирующую систему водой в специальной колонке. [23]
Рассмотрим в качестве примера разделение методом ЖХВД на силикагеле двух соединений с удовлетворительным коэффициентом емкости k и коэффициентом разделения а, близким к единице. На хроматограмме, полученной при элюировании 4 % - ным раствором эфира, пики таких соединений недостаточно хорошо разделены. Поэтому следует улучшить а, меняя состав элюирующей системы. С этой целью целесообразно, например, определить, как влияет на а переход к системе с 4 % этилацетата в пентане или 26 % дихлорметана в пентане. Нельзя ожидать, что замена пентана, например, на гексан окажет существенное влияние на а. При длительном хроматографировании методом классической колоночной хроматографии или при повторном разделении методом ЖХВД с безводными растворителями или системами растворителей вода из колонки постепенно удаляется, что ухудшает хро-матографические свойства колонки. Это явление особенно важно при работе с неполярными системами растворителей, когда эффективность колонки сильно зависит от содержания воды в адсорбенте и когда содержание воды убывает с возрастанием полярности элюирующих систем. Для сильнополярных растворителей этот эффект незначителен. Чтобы предотвратить его, можно или добавлять воду к растворителям или, что еще лучше, предварительно насыщать элюирующую систему водой в специальной колонке. [24]