Хроматографический слой
Cтраница 2
Одна из проблем, возникающая при использовании авторадиографии, заключается в том, что из-за низких энергий р-частиц, в особенности в случае трития, большая часть энергии поглощается хроматографическим слоем так, что пленкой регистрируется лишь небольшое число электронов. Один из методов преодоления этого затруднения сводится к включению в слой сцинтиллятора, который излучает свет при поглощении Р - частиц. [16]
Подобные модели для КХ и ТСХ включают уравнения для K R типа (1.99) и (1.100), уравнения для Н типа (1.101) и (1.102) и уравнения Козени - Кармана [39], описывающие скорость движения жидкости в гранулированном хроматографическом слое. [17]
Растворитель подается на слой через лист фильтровальной бумаги. Хроматографический слой прикрывают стеклянной пластинкой, оставляя между нею и слоем сорбента очень небольшой зазор. Край слоя сорбента, противоположный старту, остается неприкрытым. В этом месте происходит испарение растворителя, и слой все время впитывает новые его порции. Камеру для непрерывного проявления по Бреннеру и Нидервайзеру производит фирма Desaga под названием BN-камера. [19]
Микротрубки наполняют суспензией окиси алюминия при отсасывании. Хроматографические слои после проявления имеют не ровные плоскости, а выпуклые, как мениск ртути, причем кривизна их тем больше, чем меньше диаметр трубки. [20]
Иначе поступают при фиксировании раствором коллодия. На хроматографический слой осторожно наливают 4 % - ный раствор коллодия с добавкой 7 5 % глицерина. На заливку поверхности 20X20 см расходуется около 50 мл раствора. После затвердевания коллодия слой снимают с пластинки с помощью лезвия. Слипшийся слой хроматограммы наклеивают с помощью липкой ленты на бумагу. Преимущество таких фиксированных хроматограмм состоит в том, что пятна могут быть впоследствии вырезаны и элюи-рованы для количественного определения. Хроматограммы, фиксированные этим способом, представляют очень удобный демонстрационный материал. [21]
В качестве тонкого хроматографического слоя применяют силикагель марки КСК, измельченный на шаровой мельнице, просеянный через сито с отверстиями 160 - 200 меш, промытый концентрированной НС1 и водой и высушенный при 120 в течение 24 час. Силикагель наносят тонким слоем ( 1 0 мм) на шлифованную матовую стеклянную пластинку размером 17 X 24 см, от края пластинки проводят старт и капилляром наносят рабочий спиртовой раствор. Нанесение раствора осуществляют без тока холодного воздуха, так как слой силика-геля предварительно не закрепляют. Пластинку помещают в камеру с притерной крышкой ( высотой 25 см) и стеклянной наклонной подставкой. Восходящее хроматографирование происходит в смеси растворителей: 8 % - ный метанол в хлороформе в течение 30 мин. Затем хроматограмму вынимают из камеры, высушивают под тягой до полного исчезновения запаха растворителя, площадь силикагеля от стартовой до фронтовой линии делят на десять равных поперечных полос. [22]
Чем шире полоса образца в подвижной фазе, которую вводят в колонку или в тонкий слой, тем шире полосы, полученные после разделения, - это не требует доказательств. Поэтому в идеале образцы должны вводиться в хроматографический слой в виде бесконечно узких полос. [23]
В этом уравнении суммируется влияние происходящих в хроматографическом слое процессов на форму ( и, в частности, ширину) полосы элюируемого вещества. График уравнения имеет вид, показанный на рис. 2.4, на нем видны примерные вклады отдельных членов. В газовой хроматографии график такого типа достаточно хо-оошо известен. Для любой колонки можно легко установить соотношение между различными частями уравнения. Минимальная высота тарелки наблюдается при оптимальной скорости подвижной фазы. Тщательные исследования, выполненные для газохроматографических колонок с набивками, показали, что оптимальная скорость соответствует объемной скорости 1 - 5 О мл мин-1 т.е. линейной скорости потока около 5 см - с-1. При этих условиях разделение обычно длится 5 - 60 мин. [24]
Однако такое предположение может быть ошибочным, если маленькие и крупномасштабные препаративные колонки отличаются в устройстве систем распределения в местах ввода или вывода образца. Результатом этого может быть неполное использование всей емкости хроматографического слоя в одной или в обеих колонках ( ср. К счастью, различия обычно бывают в пользу крупномасштабной системы, так как аналитические колонки для ЖХ обычно не имеют системы распределения образца, кроме металлокерамического пористого фильтра или сита, обеспечивающих центральный одноточный ввод или вывод. [25]
Рассмотрение, проведенное в этой главе, дает принципиальную возможность получить все элементы хроматографического распределения с помощью статистических моментов. При этом в них входит информация о структурно-динамических характеристиках хроматографического слоя в соответствии с методом Гиддингса. [26]
Нередко применяют флуориметрические методы, при которых измеряют флуоресценцию некоторых веществ. Флуориметры имеют источник УФ-излучения, которое через фильтр попадает на хроматографический слой. Вторичное излучение, которое производят отдельные вещества, проходит через другой фильтр и попадает в регистрирующее устройство, снабженное фотоэлементом. При измерениях методом УФ-спектро-метрии часто мешают примеси, экстрагируемые из сорбента, от которых бывает очень трудно избавиться; контрольные эксперименты дают слишком высокие и невоспроизводимые значения. Положение удается улучшить фильтрованием растворов через синтетические мембранные фильтры ( разд. [27]
Часто возникает необходимость максимально точно запротоколировать результаты хроматографического разделения. Хранить хроматограммы трудно вследствие неустойчивости окраски пятен и малой механической прочности хроматографического слоя. Точное фиксирование условий эксперимента требует не только проведения записи в журнале: зарисовка хроматограммы, формы пятен и их размещения является очень важной характеристикой выполненной работы. [28]
Силикагель аккуратно соскребали, пока не становилось видно полное внутреннее сечение хроматографического слоя. [29]
Часто возникает необходимость максимально точно запротоколировать результаты хроматографического разделения. Хранить хроматограммы трудно вследствие неустойчивости окраски пятен и малой механической прочности хроматографического слоя. Точное фиксирование условий эксперимента требует не только проведения записи в журнале: зарисовка хроматограммы, формы пятен и их размещения является очень важной характеристикой выполненной работы. [30]
Страницы: 1 2 3 4