Хроматографический слой

Cтраница 3

Ошибочно рассматривать подвижную фазу только как растворитель, который переносит растворенное вещество через хроматографический слой. Подвижная фаза выполняет не только эту функцию, она также играет очень активную роль в процессе адсорбции, конкурируя с компонентами пробы за место в адсорбированном слое. Если растворитель адсорбируется сильно, то растворенное вещество будет с трудом замещать его в процессе хроматографирования. В этом случае растворенное вещество довольно долго будет пребывать в подвижной фазе и быстро передвигаться через хроматографический слой. Исходя из сказанного, можно прийти к логическому выводу, что для данного растворенного вещества и адсорбента скорость миграции первого зависит от адсорбционной способности растворителя, а не от растворимости в нем пробы. Это часто нарушает привычное представление о системе растворитель - растворенное вещество. Например, в гептане алканы растворяются лучше, чем в метаноле ( подобное растворяется в подобном), но метанол будет перемещать алканы ( или подобные им соединения) через адсорбционную хроматографическую колонку быстрее, чем гептан, просто потому, что он не дает возможности алканам осесть в колонке. [31]

Чашка для ввода пробы. [32]

При большем диаметре колонки возможны более высокие скорости потока, в результате чего продолжительность разделения сокращается. Объем пробы для группового разделения может составлять до 25 - 30 % объема хроматографического слоя. [33]

В том случае, когда анализируемое вещество приобретает флюоресцентные свойства в результате специальной обработки, существенное значение для точности анализа также имеют перечисленные выше условия. Однако если обработка флюорогенным реагентом производится после хроматографирования, то необходимо обеспечить однородное прокрашивание хроматографического слоя, как в глубину, так и по плоскости пластинки. [34]

Пластины на полиамидных пленках обладают существенными особенностями. Переход от фиксированных на подложке гранулированных сорбентов к пористым мембранам позволяет за счет увеличения гидравлической проницаемости хроматографического слоя и его большей регулярности значительно повысить скорость и чувствительность анализа в ТСХ. Ряд фирм ( Шляйхер и Шуль, Пирс, Машерей и Нагел и др.) выпускают полиамидные пластины ( полиэтилентерефталатные пленки, покрытые с двух сторон пористым слоем полиамида), приготовленные по методу Ванга. Толщина слоя полиамида составляет 50 мкм. Такие пластины можно использовать многократно после промывки полярным растворителем. [35]

Конечно, этот идеал недостижим на практике. На основе современного состояния приготовления частиц и методов заполнения ими хро-матографических слоев невероятно, чтобы идеальное блуждание было когда-либо достигнуто в хроматографическом слое, полученном на основе частиц. Однако пока лучшего способа нет, и использование таких слоев остается удобным путем осуществления хроматографии. Ключевыми характеристиками при создании слоев препаративной ЖХ являются: размер частиц, форма, пористость ( размер пор, форма и распределение по размерам), доступная площадь поверхности, механическая прочность, стоимость и доступность. [36]

Время разделения в свою очередь определяется большим числом переменных, начиная с термодинамических свойств ЖХ-системы. Коэффициент распределения растворенных веществ между подвижной и неподвижной фазами k определяет отношение объема ко времени, требуемому для элюирования этого растворенного вещества из хроматографического слоя ( см. разд. Хотя меньшие значения k позволяют увеличивать нагрузку в адсорбционной ЖХ ( разд. При оптимизации коэффициента разделения а комбинацию подвижной и неподвижной фаз прежде всего выбирают так, чтобы сделать максимальным отношение коэффициентов k, и затем стремятся установить наименьшее значение k, которое позволяет работать с хорошей нагрузкой при приемлемом разрешении, поскольку это минимизирует расход растворителя и общее время разделения. К сожалению, во многих случаях трудного разделения ( а1 3) увеличение времени разделения и расхода растворителя являются обычной платой за достижение требуемого результата. При заданном количестве образца разделение можно выполнить или путем его повторения несколько раз с использованием малой нагрузки на колонке малого объема ( высокая эффективность на единицу длины), или за один пробег при полной нагрузке на колонке большого объема ( та же общая эффективность, но большая емкость, см. разд. Даже в последнем случае, который обычно оптимален, может потребоваться большее время для того, чтобы разделить необходимое количество образца. [37]

Схема S-камеры. [38]

Процессы проявления в S-камере и в камере обычного типа различаются между собой принципиально. В S-камере значения RF веществ обычно выше, что объясняется запаздыванием фронта растворителя по отношению к разделяемым веществам, перемещающимся по слою. Это происходит потому, что в S-камере пространство между хроматографическим слоем и крышкой предварительно не насыщается парами растворителя; оно насыщается лишь по мере продвижения системы растворителей при элюировании. [39]

В сочетании с данной неподвижной фазой она определяет массовый коэффициент распределения ( Dm) или коэффициент емкости k компонентов образца. Так как ЖХ является динамическим процессом, миграция образца начинается с момента входа молекул образца в хроматографический слой в процессе ввода пробы. Если при соответствующей концентрации ( см. разд. [40]

Один из первых и наиболее простых методов [7] сохранения хроматограмм состоит в следующем. На пластинку накладывают полоску липкой ленты ( Scotch tape) так, чтобы ее концы выступали за края пластинки. Энергично потирая обратную сторону ленты каким-либо гладким предметом, добиваются тесного контакта ее липкой поверхности с хроматографическим слоем. При снятии ленты на ней остается прочно прилипшая верхняя часть слоя. Выступающими концами ленту фиксируют на карточке. [41]

Существуют различные способы приготовления пластинок с тонким слоем сорбента. В практических работах описано приготовление хро-матографических пластинок с незакрепленным слоем окиси алюминия и с закрепленным слоем силикагеля. Основное достоинство пластинок с незакрепленным слоем связано с простотой их получения, не приводящей к изменению первоначальных свойств сорбента, а также возможностью использования хроматографических пластинок сразу же после их приготовления. Основной их недостаток - непрочность хроматографического слоя. [42]

При обычном проявлении хроматограммы основная часть зоны при этом движется вперед, обгоняя ту часть вещества, которая адсорбируется на более активных центрах и медленнее десорбируется. В результате наблюдается образование хвоста. Недавно Гиддингс [91] развил эту теорию более детально. Образование хвостов может происходить также при перегрузке хроматографического слоя. [43]

Пик неудерживаемого вещества служит маркером, который проходит через хроматографиче-скую систему без какого-либо существенного взаимодействия с неподвижной фазой. Объем подвижной фазы, необходимый для элюирования этого компонента в колонке Ум, или мертвый объем, равен объему подвижной фазы, содержащейся в хроматографической системе, начиная от точки ввода пробы до точки детектирования, причем учитываются объем дозатора, насадки колонки ( между и внутри частиц), конца колонки, соединительных трубок и объем ячейки детектора. Объемы удерживания V и Vi соответствуют объемам подвижной фазы, требуемым для элюирования компонентов 1 и 2 из колонки, измеренным от точки ввода до максимума соответствующего пика. Каждый пик на хроматограмме представляет непосредственно или опосредованно концентрацию растворенного вещества подвижной фазы в точке детектирования на небольшом ( но иногда важном) расстоянии от выхода из хроматографического слоя ( см. разд. [44]

Устройство для градиентного проявления. [45]

Страницы: 1 2 3 4