Приготовленный сорбент
Cтраница 2
Колонку длиною 5 м и диаметром 4 мм промывают ацетоном и сушат до исчезновения его запаха. При периодическом постукивании заполняют колонку приготовленным сорбентом так, чтобы слой сорбента на 5 мм не доходил до верхнего фланца. Неплотно закрыв стеклянной ватой концы колонки, устанавливают ее в термостат хроматографа и проводят тренировку колонки: не присоединяя колонку к прибору, пропускают через нее газ-носитель азот со скоростью 80 мл / мин в течение 10 ч при температуре 120 С, после чего выходной конец колонки соединяют с ионизационно-пламенным детектором. [16]
 |
Размер пробы для различных колонок. [17] |
С одного конца колонку свободно закрывают небольшим кусочком стеклянной ваты. К другому концу подсоединяют воронку и заполняют ее под вакуумом приготовленным сорбентом при воздействии электровибратора или при постукивании по ней палочкой до тех пор, пока в нее не перестанет входить сорбент. Затем необходимо несколько раз слегка постучать колонкой об пол для более плотного заполнения сорбентом, после чего открытый конец закрывают стеклянной ватой. Стеклянный палец служит для того, чтобы экспериментатор смог вовремя обнаружить проскок сорбента вследствие недостаточно плотного закрытия второго конца колонки стеклянной ватой. Заполнение колонки возможно сорбентом под давлением инертного газа со стороны воронки. [18]
Заданная концентрация паров ртути обеспечивается благодаря поддержанию с помощью термостата постоянной температуры, а также заданного расхода и влажности воздуха, проходящего через испаритель ртути. Концентрацию ртути в паровоздушной смеси определяют путем отбора пробы с помощью аспиратора на специально приготовленный сорбент паров ртути, который затем растворяют в дистиллированной воде и производят сравнение с приготовляемыми эталонными растворами. [19]
В этот раствор погружают на несколько минут 70 г очищенной гранулированной пемзы и высушивают при 100 С. Приготовленным сорбентом наполняют U-образные трубки. [20]
Носитель для хроматографической колонки готовят следующим образом: берут навеску ортофосфорной кислоты в количестве 2 % по отношению к весу хроматона и растворяют в метаноле, взятом в количестве, достаточном для полного смачивания носителя. Затем берут навеску Апиезона L в количестве 15 % по отношению к весу хроматона и растворяют в хлороформе, раствор заливают в фарфоровую чашку с хррматоном, модифицированным ортофосфорной кислотой, и, аналогично выше описанному, удаляют растворитель. Хроматографическую колонку заполняют приготовленным сорбентом и кондиционируют при температуре 185 С в течение 6 - 8 часов. После этого колонку подсоединяют к детектору и снижают температуру термостата до рабочей. Общую подготовку прибора к работе проводят согласно инструкции. [21]
На испарение низкокипящего растворителя ( диэтилового эфира, ацетона) требуется не более тридцати минут. После завершения испарения растворителя приготовленный сорбент досушивается в сушильном шкафу. [22]
В последние годы в состав центральной лаборатории входят аналитический отдел, отдел хроматографических методов анализа и группа по ремонту лабораторного оборудования. Аналитический отдел выполняет анализы отложений, продуктов коррозии, оборотных и сточных вод, артезианских и речных вод, паровых конденсатов, аккумуляторной кислоты и реагентов. Отдел хроматографических методов осуществляет проверку приготовленных сорбентов, набивку хроматографических колонок, выдачу образцовых хроматограмм, анализ газов носителей, регенерацию чувствительных элементов, освоение и пуск новых автоматических приборов качества и газового анализа совместно с цехами КИП. [23]
Аффинная хроматография [27-31] i представляет собой один из наиболее специфических методов выделения реакцион-носпособных соединений, в частности ферментов, и даже таких надмолекулярных агрегатов, как вирусы. Сорбентом в этом случае служит гель типа агарозы, к которому ковалентно присоединен подходящий лиганд, например субстрат фермента. Когда раствор, содержащий выделяемое вещество ( скажем, фермент), пропускают через колонку с соответствующим образом приготовленным сорбентом, взаимодействие этого вещества с закрепленным на сорбенте лигандом ( в данном случае фермента с субстратом) приводит к его удерживанию и, следовательно, к концентрированию. Поскольку сорбция носит обратимый характер, это вещество можно затем элюировать с колонки. Один из вариантов этого приема, который, строго говоря, уже не относится к области хроматографии, заключается в том, что иммобилизованный на геле фермент служит для непрерывного превращения растворенного в подвижной фазе субстрата. Разделение по методу аффинной хроматографии может быть основано на различного рода специфических взаимодействиях, таких, как связывание фермента с ингибитором, гормона с рецептором, антигена с антителом, а также гибридизация полину-клеотидов. Этот метод позволяет выделять даже целые клетки. [24]
В табл. 2 даны результаты исследований группового, элементного состава образца гудрона товарной западно-сибирской нефти, отобранного на Ново-Уфимском ИШ. Гудрон имел следующие показатели: плотность 987 кг / м3; коксуемость - 11, 8 X; содержание серы - 2 3 %; начало кипения - 433 С, до 450 С выкипает 2 %, до 500 С выкипает 15 X. Разделение гудрона осуществлялось путем осаждения асфальтенов в изооктане и фракционирования астворимой в изоокта-не части гудрона на специа ьно приготовленных сорбентах [ 25 - 263 на кислые, основные, нейтральные смолы, а углеводородной части гудрона ( на сидикагеле) на параф: ю-нафтеновые, ароматические углеводороды по методике, разработанной в работе 273: Парафинонаф-теновые углеводороды, выделенные из гудрона Западно-Сибирской нефти, содержат по данным гедь-хроматографического разделения [28] углеводороды с молекулярной массой от 350 до 1250, причем представлены в основном и - и изо-парафинами, алкшщиклогексанами и алкилдекалинами. [25]
Все эти методы обладают рядом недостатков. Точность тер-мостатирования во многих приборах существенно влияет на воспроизводимость полярности. Хотя скорость кристаллизации регулируется легко, она сильно зависит от количества антипирина, нанесенного на носитель. Поэтому каждый вновь приготовленный сорбент должен быть откалиброван. [26]
Стероидные соединения самых разнообразных типов относятся к тем органическим веществам, для которых тонкослойная хроматография оказывается наиболее пригодной. Различия в структуре, конфигурации заместителей, конформации отдельных частей молекулы обычно весьма четко проявляются в различиях хроматогра-фической подвижности, так что, за исключением некоторых специальных случаев, разделение стероидных веществ не представляет особых трудностей. В тех случаях, когда адсорбционная хроматография оказывается a priori непригодной для разделения некоторых веществ ( например, гомологов), хорошую службу может сослужить распределительная хроматография. Для разделения-некоторых пар веществ, различающихся, например, степенью ненасыщенности молекулы, пригодны специально приготовленные сорбенты или можно воспользоваться простыми химическими реакциями in situ, которые позволяют преодолеть затруднения с разделением. [27]
Объем инертного носителя, соответствующий объему колонки с 20 % - ным избытком на уплотнение при набивке, взвешивают с точностью 0 0001 г. Затем навеску стационарной фазы ( SE-30), 5 - 10 % массы носителя растворяют в хлороформе. Растворенную стационарную фазу помещают в колбу с носителем и перемешивают электрической мешалкой в течение двух часов. После этого основную массу хлороформа испаряют в течение одного часа на водяной бане при постоянном перемешивании. Приготовленный сорбент переносят в небольшую фарфоровую чашку или металлический противень и помещают в сушильный шкаф с температурой 100 С для удаления остатков хлороформа при периодическом перемешивании в течение двух часов. [28]
Просеивают носитель ТНД ТС-М на еитах и отбирают фракцию с размером зерен 0 15 - 0 25 мм. Высушивают фракцию 1 ч в сушильном шкафу при 200 С. Растворяют 1 г трикрезилфосфата в 250 мл ацетона и в этот раствор при перемешивании всыпают 85 г ТНД ТС-М. Выпаривают растворитель на водяной бане при непрерывном перемешивании. Отсеивают приготовленный сорбент и засыпают в колонку с помощью воронки при постоянном постукивании палочкой по стенке колонки для обеспечения равномерного и плотного заполнения колонки сорбентом. [29]
Страницы: 1 2