Cтраница 4
Физиологическими называются растворы, которые по составу растворенных веществ способны поддерживать жизнедеятельность клеток, переживающих органов и тканей, не вызывая существенных сдвигов физиологического равновесия в биологических системах. По своим физико-химическим свойствам физиологические растворы и примыкающие к ним кровезамещающие жидкости весьма близки к плазме человеческой крови. Физиологические растворы обязательно должны быть изотоничными, содержать хлориды калия, натрия, кальция и магния в соотношениях и количествах, характерных для кровяной сыворотки. Очень важна их способность сохранять постоянство концентрации водородных ионов на уровне, близком к рН крови ( - 7 4), что достигается введением в их состав буферов. [46]
Большинство альдегидов и кетонов восстанавливаются на КРЭ. Как правило, альдегиды восстанавливаются легче кетонов. Формальдегид отличается от других альдегидов тем, что он легко образует гидраты. Поскольку восстанавливается только свободный формальдегид, его диффузионный ток зависит от скорости дегидратации и, следовательно, от факторов, которые влияют на равновесие, а именно от температуры, рН, растворителя и состава буфера. [47]
Я - число калорий в 1 сек, А - механический эквивалент тепла, / - силы тока и R - сопротивление полосы. По мере повышения температуры бумажной полоски сопротивление несколько падает и сила тока повышается. Скорость электростатического движения - функция силы тока; поэтому использование стабилизированного по силе источника постоянного тока представляет преимущества перед источником, стабилизированным по напряжению. Другим последствием действия тока является ионофорез электролитов буфера. Различия в подвижностях ионов, входящих в состав буфера, могут привести к изменениям рН в бумажных полосках и в соединительных мостиках аппарата. [48]
Из-за флуктуации зарядов белок может существовать при одном и том же значении рН в различных ионных формах. Поэто-му, измеряя подвижность, мы находим значение, усредненное за промежуток времени, значительно превосходящий время жизни каждой из ионных форм белка. Наклоны таких прямых для разных белков, как правило, различны. При том значении рН, где кривые, построенные для двух белков, пересекаются, разделить эти белки с помощью электрофореза невозможно. Величина рН, при которой и 0, зависит от состава буфера, в котором проводится эксперимент. Обычно буфер, содержащий простые однозарядные - иены, меньше сдвигает - - изе - электрическую точку, чем буфер с ионами более сложного строения. [49]
Следует помнить, что иминодиацетатныс труппы неподвижной фазы также способны протонироватьея и терять связанный с ними ион металла, в связи с этим рН меньше 5 нежелательны. Последний образует более устойчивый комплекс. Этот способ эффективен для выделения ферментов, принадлежащих к классу металлопротеинов. Для удерживания белков, содержащих чриптофан, требуется несколько остатков этой аминокислоты в молекуле белка. Если сорбат слишком прочно связан с нигандом, в состав буфера вводят анионы С1О, СР / ЮО, 5СК, СС1 ОО, разрушающие водородные связи. [50]