Спектр - круговой дихроизм
Cтраница 3
Аналогичным образом пики при 305 и 325 ммк ультрафиолетового поглощения соответствуют в спектре кругового дихроизма отрицательным пикам практически при тех же самых длинах волн. Видимая часть спектра поглощения имеет свой двойник в спектре кругового дихроизма - это широкая отрицательная полоса с максимумом около 500 ммк. Тонкая структура в видимой области, достаточно отчетливая в спектре поглощения, в спектре кругового дихроизма менее выражена дополнительным отрицательным пиком около 540 ммк. Наконец, очень сильная положительная полоса кругового дихроизма при 430 ммк соответствует переходу с малой вероятностью, который в спектре поглощения даже не проявляется в виде определенной полосы. Этот переход должен быть связан с большим магнитным дипольным моментом и наблюдается для всех изученных производных. [31]
По-видимому, можно без опасений считать, что молекула субстрата в активном центре прямо взаимодействует с ионом цинка. Ярко выраженная зависимость ферментативной реакции от природы металла, чувствительность электронного спектра и спектра кругового дихроизма Со2 - фосфатазы и спектра ЭПР Си2 - фос-фатазы к фосфату и арсенату - все эти факты делают маловероятным косвенное участие ионов цинка в катализе. Кроме того, прямое присоединение субстрата к иону цинка было уже надежно установлено кристаллографически [78] для другого фермента-карбоксипептидазы ( гл. [32]
В нуклеиновых кислотах оба моносахарида имеют Р - конфигура-цию аномерного центра. Современные доказательства конфигурации аномерного центра базируются на исследовании ЯМР - и ИК-спектров, спектров кругового дихроизма и дисперсии оптического вращения. [33]
На N - У В-переход и индуцирование им эффекта Коттона заметно влияет размер заместителя у N1 бенздиазепинового кольца. В случае незамещенных соединений ( бромазепама, демоксепа-ма, лоразепама, оксазепама) изменяется спектр кругового дихроизма. [34]
Поскольку основные принципы использования неавтономных ЭВМ при спектрофотометрических исследованиях особых видов уже изложены, нет необходимости подробно описывать аспекты совместного применения ЭВМ и обычных спектрофотометров. Отметим только, что описанная в предыдущем разделе вычислительная система идеально подходит для сбора обычных спектров поглощения и спектров кругового дихроизма: неавтономная ЭВМ производит коррекцию базовой линии ( в большинстве случаев с помощью многопотенциометрических схем), сбор разностных дифференциальных спектров ( полезных при анализе спектральных областей, для которых характерно наличие минимумов, максимумов и плечей) и усреднение ( накопление) спектров для увеличения отношения Сигнал / Шум. [35]
 |
Спектр поли - М - метил - Ь - аланяна ( а и метилового эфира М - ацетил - N-метил - 1-алан ина ( б в трифторэтаноле на частоте 60 МГц. [36] |
Введение в мономерное звено дополнительной метильной группы приводит к тому, что реализуется единственная регулярная структура, предположительно спиральная. Предположение о спиральности подтверждается УФ-спектрами, в которых наблюдается заметный гипохромный эффект при длине волны 201 нм, и широкой интенсивной отрицательной полосой в спектре кругового дихроизма в диапазоне около 223 нм. [37]
Де 18), другой - при 425 ммк ( As 12), и их суммарная интенсивность больше интенсивности любых других полос. Так же как и в цианкобаламине, эта полоса соответствует запрещенным переходам, не наблюдающимся в спектре поглощения. В области между 500 и 600 ммк спектр кругового дихроизма дицианкоба-ламина подобен спектру цианкобаламина, однако он существенно отличается в области 350 ммк. [38]
Эта методика уже была описана Джерасси [12] в связи с исследованиями дисперсии оптического вращения. Применительно к нашему случаю она заключается в том, что записывают спектр кругового дихроизма в метаноле, затем добавляют каплю концентрированной соляной кислоты и снова записывают спектр кругового дихроизма. Образование полукеталя происходит быстро только при определенных положениях карбонильной группы. [39]
Аналогичным образом пики при 305 и 325 ммк ультрафиолетового поглощения соответствуют в спектре кругового дихроизма отрицательным пикам практически при тех же самых длинах волн. Видимая часть спектра поглощения имеет свой двойник в спектре кругового дихроизма - это широкая отрицательная полоса с максимумом около 500 ммк. Тонкая структура в видимой области, достаточно отчетливая в спектре поглощения, в спектре кругового дихроизма менее выражена дополнительным отрицательным пиком около 540 ммк. Наконец, очень сильная положительная полоса кругового дихроизма при 430 ммк соответствует переходу с малой вероятностью, который в спектре поглощения даже не проявляется в виде определенной полосы. Этот переход должен быть связан с большим магнитным дипольным моментом и наблюдается для всех изученных производных. [40]
Эта методика уже была описана Джерасси [12] в связи с исследованиями дисперсии оптического вращения. Применительно к нашему случаю она заключается в том, что записывают спектр кругового дихроизма в метаноле, затем добавляют каплю концентрированной соляной кислоты и снова записывают спектр кругового дихроизма. Образование полукеталя происходит быстро только при определенных положениях карбонильной группы. [41]
Неравновесные свойства ферментов весьма существенны. В работе Марковича и Крапивинского [ ПО ] были обнаружены медленные конформациоиные изменения фермента, продолжающиеся до 20 - 30 мин. Таковы конформационные изменения окружения SH-групп активного центра D-глицеральдегид - З - фосфатдегидро-геназы ( ГАФД) в присутствии ингибитора - АТФ, Эти изменения проявляются в дифференциальных спектрах поглощения п в спектрах кругового дихроизма, в полосе поглощения специфических флуоресцентных меток. Предполагается, что малая скорость перестроек активного центра, индуцированных АТФ, объясняется их сопряжением с перестройками контактных площадок между субъединицами ( ГАФД - тетрамер) и с последующими изменениями расположения субъединиц. В компактной тетрамер-ной структуре последние изменения невозможны из-за стериче-ских ограничений. Конформационный переход реализуется на промежуточной стадии димера или рыхлого тетрамера с подвижными контактами субъеднниц. Медленность перехода обусловлена низкой константой скорости диссоциации тетрамера. После перехода, вызванного АТФ, происходит ассоциация промежуточных форм, причем образуется тетрамер с иным расположением субъединиц. Эти представления подтверждаются исследованиями миграции энергии электронного возбуждения между хромофорами, расположенными на различных субъединицах. В последующих работах [111, 112] было проведено детальное изучение кинетики ферментативных реакций ГАФД, кинетики связывания ферментом АТФ и кофермента ( НАД), подтвердившее изложенные представления и раскрывшее природу кооперативных свойств фермента, определяемых его четвертичной структурой и неравновесным состоянием. [42]
На рис. 3.7 приведены кривые дисперсии оптического вращения и кругового дихроизма, их связь с УФ-спектрами и показано, как определяют знак и величину эффекта Коттона. Рассматриваемое соединение содержит две хромофорные группы с максимумами поглощения при 217 и 293 нм соответственно. Если мы будем обсуждать только последнюю полосу поглощения, то, как следует из рисунка, она показывает положительный эффект Коттона ( а - 214) и 0 ( 290 нм) хорошо соответствуют максимумам поглощения в спектре кругового дихроизма и в УФ-спектре поглощения. [43]
В конформационно-жесткой системе особенно ясно проявляются пространственные влияния заместителей на реакционную способность; например, экваториальная 2а - ацетоксигруппа в приведенном выше примере гораздо легче подвергается щелочному гидролизу, чем аксиальная Зос-ацетоксигруппа. Не только химические, но и спектральные свойства зависят от конформации. Поэтому стероидные модели, структура которых, казалось бы, сложна, на самом деле наиболее удобны для выявления связи химического и пространственного строения с особенностями ИК -, УФ - и ЯМР-спектров, а также с хироптическими характеристиками - спектрами кругового дихроизма, дисперсией оптического вращения. [44]
Степень взаимодействия плоскополяризованного света с1 оптически активной молекулой характеризуется так называемой силой ротатора. По аналогии с силой осциллятора, относящейся к данному переходу, сила ротатора также зависит от длины волны излучения, потому что для различных переходов дипольные моменты будут неодинаковыми. По этой причине для оптически активных веществ всегда исследуют зависимость оптической активности от длины волны. Однако на опыте не удается отдельно измерять поглощение левой и правой круговых компонент плоскополяризованного света, а можно определять только их разность е / - ег. Зависимость этой разности от длины волны называется КД-спектром ( спектром кругового дихроизма) или КД-кривой. [45]
Страницы: 1 2 3 4