Cтраница 1
Способ заполнения колонки определяется типом ионита и размером его зерен, и, чем меньше размеры частиц, тем сложнее добиться равномерного заполнения колонки. Суспензию ионита ( 50 - 100 меш) наливают в колонку через воронку, на одну треть заполненную тем же элюентом, и дают жидкости медленно сливаться из колонки. Зерна ионита быстро оседают. Заполняя колонку ионитом с более крупными зернами, целесообразно время от времени постукивать по стенкам колонки. [1]
Разработано много способов заполнения колонок. Гель, набухший в растворителе, помещают в колонку, частично заполненную растворителем. В колонке гель оседает до тех пор, пока не образуется слой насадки достаточной толщины для задерживания потока растворителя из колонки, после этого выходной кран открывают, чтобы растворитель мог вытекать при постоянной скорости. В колонку добавляют следующую порцию геля и всю операцию повторяют. [2]
Проведено сравнение нескольких способов заполнения колонок с применением вибраторов 2 типов. Показано, что эффективность заполнения колонок с помощью вибраторов увеличилась вдвое по сравнению с заполнением вручную. [3]
Приведенное выше обсуждение способов заполнения колонки насадкой показывает большую важность этого этапа изготовления колонки в препаративной хроматографии. Длинные и узкие колонки, которые по своим характеристикам близки к аналитическим колонкам, можно заполнить насадкой с высокой эффективностью и высокой воспроизводимостью характеристик. Однако в случае широких и коротких колонок воспроизводимое и высокоэффективное заполнение их насадкой обеспечить чрезвычайно трудно. [4]
Что касается вопроса м-ра Пипкера о способе заполнения колонок, то в этом отношении не легко дать какой-либо совет. Процесс заполнения колонок зависит от многих причин. Мы нашли, что один и тот же способ заполнения дает различные результаты для колонок диаметром 7 6 и 10 см и для колонок, изготовленных из различных материалов. [5]
Хиггинс и Смит [9] разработали четыре различных способа заполнения колонки насадкой. Они пробовали засыпку с постукиванием, засыпку через малое отверстие ( для двух разных отверстий) с последующей вибрацией колонки, а также засыпку, при которой насадка из воронки ссыпалась тонкой струйкой по стеклянной трубке, и непосредственно перед колонкой проходила через малое отверстие, которое непрерывно перемещали вверх с тем, чтобы оно находилось чуть выше уровня уже засыпанной насадки. [6]
Флодин [1, 187] и фирма Pharmacia [7] рекомендуют два способа заполнения колонки. Согласно одному из способов, колонку наращивают трубкой с таким же диаметром и длиной, как и колонка, и в верхнюю часть помещают воронку. Колонка и удлинительная трубка должны располагаться строго вертикально. Такую систему заполняют растворителем до уровня конической части воронки и в нее добавляют при осторожном помешивании кашицу геля. В то время как гель медленно оседает, выходной кран колонки постепенно открывают, чтобы получить стационарный поток растворителя. Движущаяся вверх горизонтальная поверхность границы слоя геля в трубке свидетельствует об однородности заполнения. [7]
Большое значение придается приготовлению и качеству сили-кагеля и способу заполнения колонки. Получение брикетированного силикагеля в лабораторных условиях описано достаточно подробно в работах [ 9, стр. [8]
Ввиду важности роли подвижной фазы в жидкостной хроматографии тщательно исследуется способ заполнения колонки. Снай-дер [34] опубликовал обзор различных методов заполнения, целью каждого из которых является создание материала носителя с одинаковой плотностью поперечного сечения и стремление упаковать его как можно плотнее. Используемые в высокоскоростной ЖХ частицы малого диаметра иногда бывает трудно упаковать в колонки. Насадка из частиц размером более 20 мкм хорошо работает при сухой упаковке колонки, если упаковка проведена тщательно. Не следует применять позонную вибрацию, лучше вибрировать всю колонку. [9]
Даже при использовании гомогенизаторов газового потока большой выигрыш в эффективности может дать правильный выбор твердого носителя и способа заполнения колонки насадкой. Так, Спенсер и Кучарски [45] пришли к выводу о том, что простая засыпка насадки в колонку не дает хороших результатов и для получения максимальной эффективности насадку следует вводить в колонку небольшими аликвотными порциями объемом 200 мл и при этом встряхивать колонку на вибрирующем столе. [10]
Второй величиной, от которой зависит коэффициент К, является величина ВЭТТ, определяемая условиями хроматографи-ческого опыта: скоростью газа-носителя, зернением сорбента, способом заполнения колонки, количеством неподвижной фазы, диаметром колонки, физическими константами компонентов, газа-носителя и фазы, прежде всего коэффициентами диффузии компонента в газовой и неподвижной фазах. [11]
До первых попыток проведения хрома-тографического разделения следует подумать о следующих факторах: поведение пробы в тонкослойной хроматографии, адсорбент, материал колонки ( стекло, найлон), способ заполнения колонки и способ проявления колонки. [12]
В препаративных хроматографических колонках, как и в насадочных колонках вообще, большое значение имеет упаковка сорбента. Способ заполнения колонки является важным фактором, оказыв ающим существенное влияние на величину Я. Эффективность колонки большого диаметра можно существенно повысить, применяя более совершенную методику заполнения ее насадкой. Очень удобны колонки из прямолинейных секций, так как можно отработать методику заполнения на одной секции и воспроизвести ее на остальных. [13]
Метод заполнения колонок определяется типом, формой и размером частиц материала носителя. Существует несколько способов заполнения колонок: 1) фильтрацией растворителя, 2) заполнением сухим материалом и 3) суспензионный способ. [14]
Воду из взвешенного стаканчика ( 20 - 25 см3) вливают в делительную воронку и спускают ее до заполнения / 2 объема колонки. При таком способе заполнения колонки ионит успевает набухнуть. Вставляют в верхнюю часть колонки ватный тампон и закрывают колонку пробкой. Спускают из делительной воронки воду в тот же стаканчик с дистиллированной водой. Взвешивают оба стаканчика с оставшимися количествами воды и ионита. Рассчитывают количество ионита и воды в колонке. [15]