Излучение - флуоресценция
Cтраница 4
Часто используют поверхность окиси магния, которая почти полностью удовлетворяет требованиям, предъявляемым к идеальной диффузно рассеивающей поверхности. Однако окись магния рассеивает свет только поверхностью, в то время как во флуоресцирующем растворе излучение появляется во всем объеме раствора. Это приводит к различиям в пространственном распределении рассеянного излучения и излучения флуоресценции. [46]
Здесь зеркало 3 фокусирует непоглощенное излучение источника вновь в заданный объем. Зеркало 4 фокусирует кванты света флуоресценции, попавшие в телесный угол dQ, вновь на регистрирующую систему. Па этом рисунке приведена одна из возможных систем фокусировок, когда излучение флуоресценции наблюдается под прямым углом к излучению источника света, падающему па объем с определяемыми атомами. [48]
 |
Схема электронного усилителя постоянного тока. [49] |
С одной стороны труба закрыта железной заглушкой, с другой имеет внутреннюю нарезку, по которой ввинчен держатель с панелькой для фотоумножителя. Сбоку к трубе приварена плита толщиной 10 мм, имеющая такую же конструкцию, как крышка кюветного отделения спектрофотометра. В середине плиты просверлено окно диаметром 30 мм для ввода внутрь кожуха излучения флуоресценции. Под этим окном на пути выходящего из монохроматора светового потока под углом 45 установлено зеркало размером 30X20 мм с поверхностным алюминиевым покрытием; оно отражает световой поток на фотокатод. [50]
 |
Зависимость поглощения рентгеновских. [51] |
Как видно из рис. 65, для меди такой скачок наблюдается при К - 1 3785А, для серебра - при К 0 485 А. Эти критические длины волн имеют следующее значение. Если освещать какой-либо элемент ( например, Си или Ag) Монохроматическими рентгеновскими лучами убывающей длины волны, то, начиная со строго определенной длины волны возбуждающих рентгеновских лучей, элемент начинает и при дальнейшем уменьшении длины волны продолжает испускать свое собственное характеристическое излучение в виде излучения флуоресценции. [52]
Энергия падающего пучка уменьшается вследствие двух процессов. Первый из этих процессов - рассеяние, при котором электроны и атомы под действием падающего излучения совершают вынужденные колебания и излучают во все стороны сообщенную им энергию. Второй процесс - поглощение атомами некоторой части энергии, которая излучается ими затем в виде характеристического излучения. Это излучение называется излучением флуоресценции и также излучается во все стороны. [53]
Излучение флуоресценции измеряют под прямым углом к направлению возбуждающего излучения. Такой же принцип используется в установках для нефелометрии, поэтому описанные приборы можно использовать в обоих методах анализа. Различие заключается только в следующем: при проведении нефелометрических определений на вещество попадает видимый свет, а ультрафиолетовое излучение задерживают светофильтром, в то время как в методе флуориметрии для возбуждения флуоресценции применяют ультрафиолетовое излучение, а длинноволновое излучение задерживают светофильтром. В последнем случае на пути излучения флуоресценции перед детектором помещают еще один светофильтр, не пропускающий ультрафиолетовое излучение, и прибор показывает интенсивность более длинноволновой флуоресценции. [54]
Для записи спектров возбуждения в ультрафиолетовой области используют входящую в комплект СФ-4 водородную лампу ВСФУ-4, которую помещают на ее обычном месте. Для снятия спектров возбуждения в видимой области применяют лампу накаливания. Из кюветного отделения прибора вынимают алюминйрованное зеркало и под окном камеры фотоумножителя против выходной щели монохроматора устанавливают держатель с кварцевой кюветой, в которую помещают испытуемый раствор. Дальнейшая техника записи спектров возбуждения не отличается от регистрации спектров излучения флуоресценции. [55]
Чувствительность прибора при флуориметрировании в кюветах с толщиной слоя 50 мм соответствует около 0 0001 мкг / мл флуоресцеина; в объеме 25 мл - минимальном количестве раствора, необходимом для заполнения такой кюветы, - это составляет 0 0025 мкг. По схеме ФАС-1 конструкторское бюро завода Геологоразведка разработало улучшенную модель прибора - ФАС-2 ( названного Анализ-1) с тремя камерами-приставками. Третья камера предназначена для флуори-метрирования жидкостей в цилиндрических кюветах с плоскопараллельным дном, через которое выходит излучение флуоресценции, возбуждаемой через боковую стенку отдельными линиями ртутного спектра в пределах между 365 и 546 ммк. [56]
Донор D возбужден за счет поглощения света. Избыток энергии быстро теряется ( 10 - 12 сек) при соударениях. Предположим теперь, что молекула акцептора А имеет возможность совершать переходы с поглощением, и эти переходы по энергии совпадают с переходами с флуоресценцией молекулы D. Тогда, при условии существования связи между двумя системами, могут иметь место оба перехода вместе без излучения флуоресценции с суммарным эффектом передачи энергии возбуждения от D к А. О физическом смысле того, как может осуществляться подобная связь, уже говорилось выше. Энергия взаимодействия наибольшая в том случае, если оба перехода дипольные и разрешенные. Вероятность переноса энергии пропорциональна квадрату энергии взаимодействия и, следовательно, пропорциональна 1 / г6, где г - расстояние между D и А. [57]
Путем вращения барабана монохроматора находят, какие градусы его поворота соответствуют ярким линиям источника с известной длиной волны. По результатам этих измерений строят градуировочную кривую в координатах угол поворота барабана - длина волны. Затем по оптической оси входной щели прибора или на столике, или с помощью какого-либо держателя устанавливают кювету с испытуемым раствором и посредством конденсора проектируют ее изображение на щель. Раствор облучают сверху или сбоку возбуждающим лучистым потоком ( ультрафиолетовым или другим, в соответствии со спектральной характеристикой исследуемого вещества) и, вращая барабан прибора, через каждые 10 ммк берут отсчеты по шкале микроамперметра; для уточнения положения максимума полосы около наибольших значений фототока измерения производят через 1 - 2 ммк. При помощи градуиро-вочного графика полученные результаты переводят из градусов угла поворота барабана в длины волн и строят спектр излучения флуоресценции в координатах длина волны - яркость свечения раствора в относительных значениях флуоресценции ( в процентах от максимального значения ее яркости) с введением поправки на спектральную чувствительность прибора. [58]
Такой прибор называется счетчиком квантов. Очевидно, необходимо, чтобы его квантовый выход флуоресценции не зависел от длины волны возбуждающего света и испускаемого излучения образца, однако нет необходимости знать абсолютное значение квантового выхода флуоресцирующего материала счетчика. Часто используемым материалом является раствор родамина В. При использовании счетчика квантов устраняются проблемы, связанные со спектральной чувствительностью фотоприемника и спектральными распределениями возбуждающего и испускаемого света, так как на фотоприемник всегда попадает один и тот же спектр флуоресценции материала счетчика независимо от длины волны возбуждения. Следует отметить, что кривая относительной спектральной чувствительности фотоприемника может быть определена сопоставлением сигналов для ряда длин волн рассеянного монохроматического возбуждающего пучка и для излучения флуоресценции счетчика квантов при возбуждении его этим же светом с теми же длинами волн. [59]
Страницы: 1 2 3 4