Cтраница 3
Веллингтон [2263] разводил еловую листовертку-почкоеда Choristoneura fumiferana, а также гусениц двух других видов бабочек на кормовой среде, состоящей главным образом из хвои бальзамической пихты. Веллингтон также разводил гусениц листовертки Archips fervidana Clem, на близкой к предыдущей кормовой среде, основанной на смеси из дубовых листьев - натурального растения-хозяина этого вида. [31]
Как указывалось в разделе по разведению личинок двукрылых, массовое размножение некоторых вредных видов плодовых мух-пестрокрылок проводилось успешно. Для эффективного размножения взрослые плодовые мухи многих видов требуют полноценного питания, однако до 1931 г. не пользовались другими кормами, кроме плодов и овощей. К этому времени Флук и Аллен [715] обнаружили, что мертвые дрожжевые клетки с медом и водой не только продлевают жизнь яблонной мухи Rhagoletis pomonella ( Walsh), но и стимулируют откладку яиц. Экспериментируя с этим же видом, Дин [450] сильно увеличил яйцевую продукцию самок добавлением пептона-аль-бумозы в указанную кормовую среду. В основном Дин пользовался 2 частями сахара и 1 частью пептон-альбумозы, давая отдельно дистиллированную воду. Хейген и Финни [880] обнаружили, что скармливание продажного ферментативного гидролизата дрожжевого белка в смеси с раствором сахара или отдельно в твердом виде в небольшой мелкой тарелке, когда твердый тростниковый сахар и дистиллированную воду давали в другой посуде, обеспечивало хорошую откладку яиц плодовыми мухами Dacus dorsalls и D. Однако для обеспечения высокой плодовитости средиземноморской плодовой мухи корм необходимо давать в виде раствора 3 г гидролизата белка и 6 г фруктозы в 10 мл дистиллированной воды или нанося 20 - 50 % - ный раствор гидролизата белка на один кусок восковой бумаги, а мед - на другой. Хейген [877] также выявил, что ферментативный ( трипсиновый) гидролизат соевого белка с отдельным скармливанием сахарозы стимулировал откладку яиц несколько меньше, чем дрожжевой гидролизат, однако обычно повышал плодовитость мух больше всех других испытанных гидролизатов белка. [32]
Часто практичнее проводить отбор химикатов, используя другие стадии развития, а не взрослых насекомых, или определять эффективность действия химикатов на другие стадии развития. В Гейнсвилле потенциальные хемостерилизаторы оценивают также и по их действию на молодых комнатных мух. Для этого 25 г сухого корма для личинок смачивают 25 мл воды, затем 40 яиц помещают на мокрый лоскут черной ткани, с которого их смывают 15 мл воды во влажную кормовую среду. Через 72 часа 25 мл воды, содержащей 0 25 г раствора или суспензии химиката, выливают в кормовую среду. Через 24 часа определяют состояние личинок в среде. [33]
Другие исследователи также используют комнатную муху в качестве организма-тестера при испытании потенциальных хемосте-рилизаторов. Дальнейший ход испытаний не отличается от описанного выше кормления взрослых мух. В качестве исходной минимальной концентрации используется 1 % - ный раствор испытуемого вещества, а мухам через 3 - 4 дня после их вылупления предлагают субстрат для откладки яиц, оставляя его в садке на 3 дня. Определение стерильности по Кенага основано на подсчете личинок. Когда чашку с кормовой средой для личинок вынимают из садка, ее наполняют теплой водой до полного покрытия среды. Вода вынуждает личинок всплывать на поверхность. [34]
Часто делались попытки разводить клопов и равнокрылых хоботных на жидких искусственных средах при использовании перепонок в качестве поверхностей. Поскольку указанным авторам не удалось разведение растительноядных клопов на жидких средах, покрытых проницаемыми перепонками, они заключили, что подобные условия вообще не нужны. Это побудило их испытывать различные кормовые среды, в том числе гели, порошки и полутвердые среды; клопов обеспечивали водой при помощи ватных фитилей, а очищенные среды подавали в виде шариков или в неглубоких пластмассовых чашечках. [35]
Ричардсона [1642], состоящей из пшеничных отрубей, люцерновой муки, воды и дрожжевой суспензии. Морленд и Мак-Леод [1410] обсуждают такого рода среды, обращая особое внимание на количество добавляемой к средам воды. Хаммен [903] воспроизвел полный цикл развития комнатной мухи на среде из сухого молока и сухих дрожжей на агаре с водой. Требования комнатной мухи к витаминам и составы различных кормовых сред для ее размножения представлены Хоузе и Барлоу [994] и Хафезом [871], а Петерсон [1575] описал все подробности лабораторного разведения комнатной мухи. [36]
По-видимому, именно при изучении двукрылых было обнаружено, что питание личинок влияет на продолжительность жизни и на плодовитость взрослых насекомых. Экспериментируя с питательными средами для дрозофилы, Гюйено [860] обнаружил, что при кормлении взрослых мух яичным лецитином наблюдалась нормальная откладка яиц. Обычно взрослых дрозофил воспитывают на такой же питательной среде, как и их личинок. Специальные приемы работы со взрослыми дрозофилами описаны у Керра [1126], который кормил их смесью равных частей меда и прессованных хлебопекарных дрожжей. Геролт [789], по-видимому, выкармливал взрослых дрозофил на кормовой среде для личинок, и он же подробно описал методы обращения со взрослыми дрозофилами и их скрещивания. [37]
Голдсмит и Френк [54] помещали самцов и самок Drosophila melanogaster, только что вышедших из куколки, на искусственную среду Пирла, в которую добавляли хе-мостерилизатор. Кантуелл и Хеннеберри [20] просто давали в течение 24 часов 3 - 4-дневным самцам и самкам сахарно-дрожжевую приманку с хемостерилиза-тором. В последующие 24 - 48 часов мухи получали смесь, содержащую 20 4 % дрожжей, 77 6 % меда, 1 % хемостерилизатора и 0 5 % водного раствора NaOH. МакФадден и Рубио [93] использовали методику, применявшуюся при обработке мексиканской плодовой мухи, но Кейзер и др. [74] для стерилизации средиземноморской плодовой мухи ( Ceratitis capitata), восточной плодовой мухи ( Dacus dorsalis) и дынной мухи ( Dacus сисиг - bitae) вводили на все время опытов в кормовую среду для взрослых мух раствор хемостерилизатора с гидролизатом фруктового белка. Вместе с тем Кейзер и др. часто давали мухам в течение трех дней после выхода из куколок просто раствор хемостерилизатора в воде. [38]
Часто делались попытки разводить клопов и равнокрылых хоботных на жидких искусственных средах при использовании перепонок в качестве поверхностей. Поскольку указанным авторам не удалось разведение растительноядных клопов на жидких средах, покрытых проницаемыми перепонками, они заключили, что подобные условия вообще не нужны. Это побудило их испытывать различные кормовые среды, в том числе гели, порошки и полутвердые среды; клопов обеспечивали водой при помощи ватных фитилей, а очищенные среды подавали в виде шариков или в неглубоких пластмассовых чашечках. Клопы поддаются разведению на полутвердых кормовых средах, однако для равнокрылых хоботных могут оказаться необходимыми жидкие среды, и отсутствие нужного давления среды на перепонку было причиной, препятствующей правильному питанию этих насекомых. Кеннеди и Миттлер [1122] показали, что у некоторых тлей поступление растительного сока через ротовые стилеты примерно соответствует количеству выделяемой ими медвяной росы. [39]
Стандартный корм взрослых мух был выбран потому, что он уже более 15 лет используется для поддержания лабораторных популяций комнатных мух и мухи предпочитают его всем другим рационам. Параллельные исследования с сахаром, обработанным хемостерилизатором, необходимы, потому что белковая основа стандартного корма может оказывать вредное влияние на некоторые потенциальные хемостерилизаторы. В этих испытаниях обработанный корм, содержащий 1 0 % испытуемого вещества и соответствующее количество воды, вводится в садки с одной сотней молодых мух обоего пола. Садки со 100 мухами с сахаром или кормом без потенциального хемостерилизатора служат контролем. Через 3 дня мух в каждом садке осматривают для определения возможной токсичности химиката, а в садки, где был только обработанный сахар с хемостерилизатором, добавляют необработанный корм, который служит источником белка для развития яиц в яичниках самок. Когда мухи достигнут 6 - 7-дневного возраста, в садки помещают влажный личиночный субстрат для откладки в него яиц. Через 4 - 6 часов субстрат для откладки яиц удаляют, погружают в воду и размешивают для отделения яиц. Пробу из 100 всплывших яиц переносят на кусок влажной черной ткани, которую помещают на среду для развития личинок в маленьком садке. Если яйца не были отложены, то субстрат для откладки яиц предлагается мухам 5 -раз с 1 - 2-дневными перерывами. После 24-часового выдерживания отложенных яиц на питательной среде для личинок определяют процент отрождения. Личинкам позволяют перебраться с ткани на среду и примерно через неделю после откладки яиц производят подсчет куколок, чтобы определить число окуклившихся личинок; степень стерильности определяют по числу куколок, полученных из 100 яиц. Сухость и загрязненность кормовой среды могут вызвать гибель личинок и, следовательно, уменьшение числа куколок, но параллельный контроль в необработанном садке с такой же средой обычно может выявить это обстоятельство. Неспособность самок к откладке яиц также служит критерием для оценки потенциального хемостерилизатора. [40]
Среды для разведения личинок плодовых мух-пестрокрылок незначительно отличаются от кормовой среды для дрозофил. Грисон, Ферон и Сакантанис [854] разводили средиземноморскую плодовую муху на агаровой среде, содержащей яблочную кислоту, соли, сахарозу, казеин, дрожжевой экстракт и вещества, подавляющие рост плесени. Маеда, Хейген и Фин-ни [1270] разводили три указанных вида плодовых мух в стерильных условиях на видоизмененной агаровой среде, похожей на среду Бекка и др. для стеблевого мотылька. Использованные в среде Бекка казеин и глюкоза оказались лишними. Эти же ученые обнаружили, что в стерильных условиях личинки D. Так как рН 4 5, создаваемый соляной кислотой, препятствовал росту бактерий, а прибавление N-бутил-параоксибензоата подавляло рост плесени, эти изменения позволяли разводить личинок D. Смесь вареной тыквы с пивными дрожжами также была пригодна для развития названных трех видов плодовых мух. Финни [645] пользовался смесью моркови с пивными дрожжами для массового разведения D. Эта среда стоила значительно дешевле, чем указанная выше химически чистая кормовая среда. Кристенсон, Маеда и Холлоуэй [326] заменили свежую морковь обезвоженной при массовом разведении D. [41]