Вегетативная стадия
Cтраница 2
Как только споры начнут прорастать, конидиальная стадия переходит в вегетативную, в которой плесневые грибы менее устойчивы к действию фунгистатических веществ. В вегетативной стадии происходят жизненные процессы, требующие значительной энергии. Эта энергия расходуется на образование энзимов и построение мицелия; запасные вещества постепенно исчерпываются, а новые не образуются. [16]
Цикл развития дизентерийной амебы включает две стадии: вегетативную и стадию покоя, или цисты. На вегетативной стадии развития амеба существует в четырех формах: 1) тканевой; 2) большой вегетативной ( magna); 3) просвет-ной - мелкой вегетативной ( minufa) и 4) предцистной. [17]
Микроспоридии развиваются только внутриклеточно, и лишь после разрушения зараженной клетки вегетативные стадии паразита высвобождаются и переходят в гемолимфу, где их можно обнаружить. После более или менее длительного передвижения с гемолимфой паразит проникает через оболочку клетки и начинает делиться в ее цитоплазме, не поражая ядра клетки. Развитие схизонтов в клетке приводит к ее увеличению; по мере разрушения клетки ее ядро дегенерирует и в конечном итоге распадается на гранулы хроматина. Соседние клетки под воздействием инфекции смыкаются, и возникают все более и более увеличивающиеся псевдоцисты - скопления спор, которые используют в качестве оболочки оболочки клеток пораженных органов. Жир и гликоген плазмы клетки исчезают, и образуются вакуоли, в которые проникают паразиты. На микроскопических срезах хорошо заметны такие изменившиеся участки жирового тела, и по ним хорошо видна граница зоны распространения паразита в тканях органа. [18]
 |
Смертность гусениц яблонной плодожорки от опы-ливания 1 % - ным препаратом. [19] |
Штейнкрауз ( 195, 196 ] составил среду, на которой у него росла вегетативная стадия этой бактерии. Состав среды следующий: 1 % триптона, 0 6 % дрожжевого экстракта, 0 3 % КаНРО 0 6 % активированного угля, 0 1 % глюкозы, 0 1 % фруктозы, 0 1 % мальтозы, 0 1 % сахарозы, 0 1 % салицила, 1 % растворимого крахмала и 1 5 % агара. Среда стерилизуется при 120 С в течение 20 минут. На этой среде развивается только вегетативная стадия бактерии. Температурный оптимум для нее равен 32 С, в этих условиях рост заметен через 4 дня. Инъекция культуры возбудителя в гемолимфу насекомых приводит к образованию спор в палочках и к развитию болезни. [20]
Небольшая амеба с одним ядром, без пищеварительной вакуоли, образует четырехъядерные цисты. Живет в мальпигиевых сосудах блох, чаще всего Ceratophyllus fasciatus Bosc. Образует яйцевидные цисты 10 - 12 мк длины и 7 - 8мк ширины, с 4 ядрами, Ядра шаровидные с эксцентрическим ядрышком. Оболочка цист относительно толстая. Вегетативные стадии размещаются на эпителии в верхней, секреторной части сосуда. К нижней, реабсорбционной части сосуда с тонкими стенками число спор постепенно возрастает, и они полностью доминируют в части сосуда перед пузырьком и вводом сосуда в кишечник. [21]
 |
Мукоровые грибы. а - Мисог. 1 - спорангиеносец, и - спорангий, з - спорангиеспоры, 4 - зигоспора. б - Rhizopus. в - Tham.| Сумчатые грибы. 1 - конидиеносец Asperglllus. [22] |
Многие мукоровые грибы вызывают спиртовое брожение и используются в промышленности для производства различных органических кислот и спирта. Мицелий грибов многоклеточный, хорошо развитый. Размножаются грибы в вегетативной стадии развития спорами - конидиями, образующимися снаружи на особых гифах - кони-диеносцах. В стадии полового размножения образуются аскоспоры, развивающиеся в сумках - аскусах. [23]
В первый этап гибели насекомых в их теле можно обнаружить массу бактерий, однако покоящиеся стадии простейших в это время отсутствуют. Эти случаи, по-видимому, можно относить к спон - тайной септицемии. При гибели насекомых в более поздние сроки также проявляется септицемия, но в органах мертвого насекомого присутствует и масса спор микроспоридий, которые и являются причиной гибели насекомого. Септицемия на первом этапе развития болезни не дает возбудителю возможность сохраниться в природе, так как вегетативные стадии микроспоридий неспособны закончить развитие в мертвом хозяине и погибают. [24]
Споры паразита широкояйцевидные, при фиксации деформируются, их размеры 5 5 - 8 5X3 5 - 5 5 мк. Вид обнаружили в Европе Бреслау и Бушкиль в 1919 г. [25], затем Нел-лер [246] и другие авторы, но он не был ими описан. Кудо описал эту микроспоридию из Culex apicalis и С. США она образует хорошо заметные белые цисты в жировом теле. Пораженные участки жирового тела целиком заполняются спорами, так, что, кроме оболочки, от этих тканей ничего не остается. Вегетативные стадии развития паразита характеризуются хорошо выраженными митозами, а молодые панс-поробласты - слоем оболочки. Поверхность спор в воде разбухает, преобразуясь в слизистый чехол, который способствует всплытию спор. Разбухание поверхности оболочки приводит также к тому, что восьмерки спор разделяются на одиночные споры. [25]
В связи с отсутствием методов массового разведения этой бактерии на искусственных питательных средах для их размножения применяется заражение личинок жука путем инъекций. Датки [62] разработал и запатентовал метод разведения В. Инъекция делается со спинной стороны личинки, между вторым и третьим задними брюшными сегментами. Зараженных личинок помещают в ящики с несколькими отделениями ( камерами) и засыпают почвой. У зараженных особей в гемолимфе сначала исчезают споры, затем через 30 часов по являются вегетативные стадии бактерии, а число спор вдвое уменьшается. [27]
Яичники самок заражаются паразитом лишь после поражения большинства остальных тканей тела, причем в яичниках заражаются только те яйца, которые еще не окружены хорионом. Внутри яйца схизонты и споры расположены в клетках фолликула или в желточных шариках. При образовании в развивающемся яйце пищеварительного тракта будущей личинки или гусеницы схизонты и споры переходят в его полость и позднее с первыми экскрементами выделяются наружу, в связи с чем личинка ( или гусеница) обычно освобождается от инфекции. В тех случаях, когда споры связаны с тканью, они остаются в ней и при дальнейшем эмбриональном развитии. Там, где наряду со спорами имеются и схизонты, болезнь продолжает развиваться, и инфекция проникает в другие органы. Действие повышенной температуры прежде всего вызывает ускоренное образование спор, а остающиеся вегетативные стадии паразита при этом погибают. Тем самым болезнь стабилизируется, ее дальнейшее развитие прекращается. В тех случаях, когда стабилизация болезни происходит раньше, чем инфекция проникнет в яичники, ее развитие останавливается на стадии спор, расположенных в пораженных органах. [28]
Из гистологических красителей используется гематокрилин. Краситель Майера приготовляется из 1 г гематоксилина, 0 2 г NaNOa и 50 г квасцов на 1 л воды. Железный гематоксилин по Гейденгайну приготовляется в двух растворах. Дубителем ( 4 % - ный водный раствор железоаммонийных квасцов) задуб-ляют мазки и срезы в течение 2 - 12 часов ( оставляют на ночь), а затем после тщательного промывания окрашивают 1 % - ным водным гематоксилином ( 10 г гематоксилина растворяют в 100 мл спирта и вливают в 900 мл дистиллированной воды) также в течение 2 - 12 часов. После этого препарат промывают в чистой проточной воде, и при этом гематоксилин темнеет. Отмывку препаратов следует проводить в 3 % - ном растворе железоаммонийных квасцов при регулярном просмотре препаратов под микроскопом. Отмывку прекращают, когда определенные стадии возбудителя, которые намечено исследовать, - окрасятся достаточно интенсивно. При просмотре препарата в процессе отмывки первыми обнаруживаются главные структуры, затем вегетативные стадии паразита, но споры остаются еще черными и не дифференцированы. В конечном итоге под микроскопом становятся хорошо различимы детали спор, но вегетативные стадии паразита в это время уже полностью обесцвечиваются. После того как нужные детали на препарате дифференцируются, его быстро ополаскивают водой и оставляют в проточной воде, пока вновь не почернеет лак, который под действием квасцов стал коричневым. Из других способов следует указать метод окрашивания трихромом по Массону. При этом методе после 5 - 10 минут окрашивания гематоксилином препарат дополнительно 2 - 5 минут окрашивают смесью водных растворов 1 % - ного ксилидина Понсо, 1 % - ного кислого фуксина и 1 % - ной ледяной уксусной кислоты. После этого препарат промывают подкисленной водой, обрабатывают 1 % - ным раствором фосфоро-молибденовой кислоты ( 5 минут) и докрашивают 1 - 5 минут 1 % - ной светлой зеленой. Подобным же красителем является смесь Маллори. Препарат окрашивают 5 - 10 минут 0 5 % - ным раствором нейтрина красного в 5 % - ном растворе сернокислого аммония, затем промывают препарат водой, обрабатывают в 1 % - ном растворе фосфоро-молибденовой кислоты и докрашивают 1 - 5 минут в смеси 2 г оранжа, 2 г щавелевой кислоты и 0 5 г анилиновой синей в 100 мл воды. [29]
Лимфоциты окружают микроспоридии несколькими слоями, образуя из них уплотненные шаровидные сгустки. Споры, находящиеся внутри образовавшихся таким путем мегалоцитов, чернеют, деформируются и атретизируются. Все эти явления, в какой-то мере эффективные в борьбе ррганизма с болезнью, являются исключениями из общего правила - отсутствия у насекомых защитных реакций против микроспоридий. Лимфоциты и другие элементы гемолимфы не обладают свойствами, которые могли бы предотвратить развитие вторгшихся в организм насекомого микроспоридий. Несмотря на это, опыты термической дезинфекции хозяина показали, что такой метод приводит к непрерывному уничтожению схизонтов лимфоцитами хозяина. Температурные оптимумы развития хозяина и микроспоридий не совпадают; для микроспоридий этот оптимум лежит около 20 С, в то время как насекомые способны длительное время переносить температуру выше 30 С. Содержание насекомых ( при искусственном их разведении) в условиях повышенных температур позволяет защитной системе насекомых получить перевес над медленно размножающимся паразитом и уничтожить его. Следует, однако, сказать, что температуры, при которых возможна такая стерилизация насекомых от вегетативных стадий паразита, не смертельны для спор микроспоридий, поэтому полной стерилизации не происходит. [30]
Страницы: 1 2 3