Cтраница 3
Заражение живых насекомых для массового производства патогенных организмов широко применялось в прошлом и еще применяется теперь, даже в промышленности. Обычно в живых насекомых размножают вирусы, простейших и риккетсии, но есть также хорошие примеры массового производства этим методом бактерий, грибов и нематод. С развитием наших знаний о питании возбудителей болезней все больше и больше так называемых об-лигатных паразитов будет выращиваться ак-сенно. Я согласен с Трагером [2126] в том, что облигатные внутриклеточные паразиты представляют крайнюю степень пищевой специализации. Простота Escherichia coli обманчива. Она прекрасно растет на источнике с небольшим содержанием аммония и углерода, но она содержит средства для синтеза почти всех витаминов, необходимых для питания млекопитающих. В некоторых случаях легко выращивать аксенно вегетативные стадии микроорганизма, но при этом устойчивых стадий ( например, бактериальных спор) не образуется. Использование живых насекомых в качестве метода массового производства представляется оправданным только в тех случаях, когда при наших современных знаниях невозможно получить нужные стадии микроорганизма на неживой среде. Когда возможно выращивать возбудителя на неживых средах, этот метод предпочтут при массовом производстве. [31]
Из гистологических красителей используется гематокрилин. Краситель Майера приготовляется из 1 г гематоксилина, 0 2 г NaNOa и 50 г квасцов на 1 л воды. Железный гематоксилин по Гейденгайну приготовляется в двух растворах. Дубителем ( 4 % - ный водный раствор железоаммонийных квасцов) задуб-ляют мазки и срезы в течение 2 - 12 часов ( оставляют на ночь), а затем после тщательного промывания окрашивают 1 % - ным водным гематоксилином ( 10 г гематоксилина растворяют в 100 мл спирта и вливают в 900 мл дистиллированной воды) также в течение 2 - 12 часов. После этого препарат промывают в чистой проточной воде, и при этом гематоксилин темнеет. Отмывку препаратов следует проводить в 3 % - ном растворе железоаммонийных квасцов при регулярном просмотре препаратов под микроскопом. Отмывку прекращают, когда определенные стадии возбудителя, которые намечено исследовать, - окрасятся достаточно интенсивно. При просмотре препарата в процессе отмывки первыми обнаруживаются главные структуры, затем вегетативные стадии паразита, но споры остаются еще черными и не дифференцированы. В конечном итоге под микроскопом становятся хорошо различимы детали спор, но вегетативные стадии паразита в это время уже полностью обесцвечиваются. После того как нужные детали на препарате дифференцируются, его быстро ополаскивают водой и оставляют в проточной воде, пока вновь не почернеет лак, который под действием квасцов стал коричневым. Из других способов следует указать метод окрашивания трихромом по Массону. При этом методе после 5 - 10 минут окрашивания гематоксилином препарат дополнительно 2 - 5 минут окрашивают смесью водных растворов 1 % - ного ксилидина Понсо, 1 % - ного кислого фуксина и 1 % - ной ледяной уксусной кислоты. После этого препарат промывают подкисленной водой, обрабатывают 1 % - ным раствором фосфоро-молибденовой кислоты ( 5 минут) и докрашивают 1 - 5 минут 1 % - ной светлой зеленой. Подобным же красителем является смесь Маллори. Препарат окрашивают 5 - 10 минут 0 5 % - ным раствором нейтрина красного в 5 % - ном растворе сернокислого аммония, затем промывают препарат водой, обрабатывают в 1 % - ном растворе фосфоро-молибденовой кислоты и докрашивают 1 - 5 минут в смеси 2 г оранжа, 2 г щавелевой кислоты и 0 5 г анилиновой синей в 100 мл воды. [32]