Оптимальная температура - колонка
Cтраница 2
 |
Относительное удерживание, эффективное число тарелок, параметр Z и степень разделения при различных температурах3. [16] |
Поэтому, как правило, следует ожидать появления максимума на температурной зависимости эффективности разделения ( hm n) при некоторой температуре колонки Гопт. Очевидно, что оптимальная температура колонки определяется свойствами колонки и различна для каждого исследуемого вещества. Поэтому выбрать наиболее благоприятную температуру колонки, подходящую для всех компонентов анализируемой пробы, можно лишь в том случае, если коэффициенты распределения компонентов мало различаются или, в более общем плане, если достаточно узок диапазон температур кипения всех компонентов пробы. Выше оптимальной температуры колонки понижение эффективности происходит исключительно за счет молекулярной диффузии. [17]
Трутона ( для недиссоциирующих жидкостей N 21), R - газовая постоянная ( 1 987 кал / град - моль), a q - требуемое расстояние между пиками, выраженное числом средне - квадратичных отклонений. Эту методику, хотя она и является весьма полезной, можно использовать только при разделении очень близких соединений с известными точками кипения. Хоар и Парнел [66] описали методику определения оптимальной температуры колонки, которая основана на анализе графиков, показывающих зависимость логарифмов удерживаемых объемов от логарифмов давлений насыщенных паров растворенных веществ. Такие расчеты полезны только в том случае, если заранее известны давления паров, что для соединений, представляющих интерес в биохимическом отношении, бывает довольно редко. Чаще удерживаемые объемы определяют при нескольких температурах и по графику зависимости lg Vg от 1 / Т находят оптимальные условия разделения. [18]
Кабра и др. [218] сообщили об одновременном определению фенобарбитала, фенитоина, примидона, этосукцимида и карба-мазепина всего в 25 мкл сыворотки с помощью ВЭЖХ. На проведение анализа требуется около 14 мин при оптимальной температуре колонки 50 С. Нижний предел обнаружения для всех, этих веществ не превышает 10 нг, что позволяет легко определить эти вещества при их содержании в сыворотке 1 мкг / мл. Среди более чем 30 проверенных препаратов только этотоин мешал определению фенобарбитала. [19]
Поэтому, как правило, следует ожидать появления максимума на температурной зависимости эффективности разделения ( hm n) при некоторой температуре колонки Гопт. Очевидно, что оптимальная температура колонки определяется свойствами колонки и различна для каждого исследуемого вещества. Поэтому выбрать наиболее благоприятную температуру колонки, подходящую для всех компонентов анализируемой пробы, можно лишь в том случае, если коэффициенты распределения компонентов мало различаются или, в более общем плане, если достаточно узок диапазон температур кипения всех компонентов пробы. Выше оптимальной температуры колонки понижение эффективности происходит исключительно за счет молекулярной диффузии. [20]
Член А, так же как в уравнении ван Деемтера, учитывает вихревую диффузию и не зависит от температуры; члены В и С, соответствующие Jj / u и Си, представляют влияние молекулярной диффузии и, следовательно, замедления процесса обмена. Член В несколько увеличивается с повышением температуры. Член С, напротив, уменьшается при повышении температуры колонки вследствие температурных зависимостей коэффициента распределения и диффузии в жидкой фазе. Очевидно, оптимальная температура определяется характеристиками хроматографической колонки и различна для каждого исследуемого вещества. По этой причине чем меньше различаются отдельные компоненты по коэффициентам распределения и чем уже область температур кипения пробы, тем легче подобрать оптимальную температуру колонки для всех компонентов анализируемой смеси. При температуре колонки Т Гор1 молекулярная диффузия определяет уменьшение эффективности разделения при повышении температуры. При Т Гор1 улучшение эффективности разделения с повышением температуры характерно для колонок с толстой пленкой и высокой вязкостью неподвижной фазы ( ср. [22]
Член А, так же как в уравнении ван Деемтера, учитывает вихревую диффузию и не зависит от температуры; члены В и С, соответствующие В / и и Си, представляют влияние молекулярной диффузии и, следовательно, замедления процесса обмена. Член В несколько увеличивается с повышением температуры. Член С, напротив, уменьшается при повышении температуры колонки вследствие температурных зависимостей коэффициента распределения и диффузии в жидкой фазе. Как правило, для эффективности разделения, отражающей суммарное изменение этих величин, наблюдают минимальное значение величины ( Нтщ) при определенной температуре колонки ropt. Очевидно, оптимальная температура определяется характеристиками хроматографической колонки и различна для каждого исследуемого вещества. По этой причине чем меньше различаются отдельные компоненты по коэффициентам распределения и чем уже область температур кипения пробы, тем легче подобрать оптимальную температуру колонки для всех компонентов анализируемой смеси. При температуре колонки Т Topt молекулярная диффузия определяет уменьшение эффективности разделения при повышении температуры. При Т; Topt улучшение эффективности разделения с повышением температуры характерно для колонок с толстой пленкой и высокой вязкостью неподвижной фазы ( ср. [24]
Страницы: 1 2