Cтраница 2
При хроматографировании протекают два процесса: разделение веществ и размывание хроматографиче-ских зон. Процессы размывания обычно объясняют теорией теоретических тарелок и теорией скоростей. [16]
Наиболее распространенной теорией, позволяющей количественно оценить хрома-тографический процесс, является теория теоретических тарелок, предложенная А. Согласно этой теории хроматографическая колонка представляется состоящей из ряда элементарных участков, секций, которые называются теоретическими тарелками. Теоретическая тарелка соответствует части колонки, в которой происходит элементарный акт распределения между двумя фазами. [17]
Метод анализа кривых элюирования применен в колоночной хроматографии олигоадениловой кислоты на агарозе со связанной поли уридиловой кислотой при нескольких температурах и концентрациях олигоадениловой кислоты. Теория кооперативного связывания олигонуклеотидов с полинуклеотидом была расширена таким образом, что эта хроматографическая система может быть описана теорией теоретических тарелок, как упоминалось в разд. [18]
Для характеристики эффективности хроматографи-ческой колонки широко используется такая величина, как число теоретических тарелок N. Это понятие вытекает из достаточно общего, но формального описания размывания хроматографической зоны в ходе разделения, которое было предложено Мартином и Синжем [13] на основе теории теоретических тарелок. Хроматогра-фическая колонка в этой теории рассматривается как система, состоящая из последовательно примыкающих друг к другу секций. Каждая секция является теоретической тарелкой, в которой мгновенно устанавливается равновесие компонентов анализируемой пробы между неподвижной и подвижной фазами. Хроматографический процесс моделируется как многократное повторение двух операций: мгновенного переноса подвижной фазы из данной тарелки в следующую при отсутствии массообме-на между фазами и установлении равновесия между подвижной и неподвижной фазами на каждой тарелке. [19]
Это явление может быть обусловлено диффузионными и кинетическими факторами. Их влияние на процесс разделения может быть настолько велико, что даже при значительной разнице коэффициентов распределения вещества могут не разделиться. Явление размывания полос в реальной хроматографи-ческой колонке очень сложно и может быть описано лишь приближенно на основе теорий, устанавливающих зависимость между мерой размывания и указанными факторами. Для описания неравновесной ГХ чаще всего используются теория теоретических тарелок и теория эффективной диффузии. Обе теории основаны на допущении о том, что хроматографический процесс протекает в линейной области изотермы распределения ( в ГЖХ) или изотермы адсорбции ( в ГАХ), Количественной мерой размывания в первом случае является высота теоретической тарелки Н, во втором - эффективный коэффициент диффузии Дэфф. [20]