Cтраница 1
Тиохром - н а я реакция. [1]
Тиохром экстрагируют изобутиловым спиртом. Для этого добавляют в обе пробирки по 10 мл изобутанола, хорошо их закрывают и встряхивают в течение 2 мин. При этом тиохром переходит из водного раствора в изобутанол. [2]
Тиохром извлекают 10 мл изобутилового спирта и определяют флюоресценцию, приливая к так же обработанной, но без окисления красной кровяной солью пробе стандартный раствор тиохрома ( тот же, что для мочи) до равенства флюоресценции. [3]
Для тиохрома характерны два максимума поглощения - при 358 и 375 нм. [4]
Растворы тиохрома предохраняют от света. Вначале измеряют флуоресценцию стандартного рабочего раствора и контрольной пробы к нему ( только со щелочью), а затем флуоресценцию испытуемых растворов и контрольной пробы к ним. [5]
Образование тиохрома: при добавлении нитрата серебра к раствору препарата, подкисленному азотной кислотой, выпадает осадок. Затем прибавляют 2 капли 1 % - ного раствора гексацианоферрата ( III) калия, 5 мл воды, 5 мл амилового или изобутилового спирта и энергично перемешивают. Слой спирта проявляет сине-фиолетовую флуоресценцию, интенсивность которой увеличивается в УФ-свете При добавлении 2 капель 12 5 % - ной соляной кислоты флуоресценция исчезает, а после добавления 4 капель 15 % - ного раствора едкого натра появляется снова. [6]
Так как тиохром при длительном облучении ультрафиолетовым светом разрушается, для нахождения нулевой точки флюорометра можно использовать раствор солянокислого хинина. [7]
Мягкое окисление витамина Вг в тиохром осуществимо, по-видимому, в тканях и без его извлечения; благодаря этому оказывается возможным следить за локализацией витамина. Так, Мюлар [45] считает возможным наблюдать в нервных тканях флуоресценцию тиохрома, образующегося при окислении; на основании проведенных наблюдений он приходит к определенным выводам относительно локализации витамина. [8]
После извлечения и промывки раствора тиохрома, вследствие неполного разделения жидкостей, раствор в изобутиловом спирте иногда бывает не совсем прозрачным, что очень мешает определению. Для устранения этого можно прибавить в раствор небольшое количество прокаленного сернокислого натрия, который связывает воду и таким образом просветляет рйствор. К раствору можно прибавить также 1 мл этилового спирта, который растворяет воду и таким образом просветляет раствор. Если анализ не очень спешный, можно дать ему просто постоять в темном месте, тогда осядут остатки воды и раствор сам просветлится. [9]
Количественно тиамин определяется по интенсивности флуоресценции тиохрома ( см. с. При взаимодействии с диазотированной сульфаншювой кислотой в присутствии формальдегида тиамин образует красное окрашивание, интенсивность которого зависит от концентрации. В синтетическом кристаллическом препарате тиамин определяется последовательным титрованием азотнокислым серебром и щелочью в присутствии бромтимолового синего; разность между этими определениями соответствует количеству брома, связанного в виде четвертичной соли. [10]
Тиамин и его эфиры окисляют до тиохромов, флуоресцирующих в УФ-свете. [11]
Витамин В, окисляясь, переходит в тиохром, который в ультра - - фиолетовой области обладает интенсивной голубой флуоресценцией. [12]
Механизм реакции 46 окисления витамина В в тиохром тесно связан, повидимому, с превращением витамина BI, которое он претерпевает под воздействием щелочи. [13]
Напомним, что стандартный раствор содержит количество тиохрома, соответствующее 0 01 мг тиамина в 1 мл. [14]
В щелочном растворе тиамин легко окисляется до тиохрома. Это соединение, будучи растворено в изобутиловом спирте, флуоресцирует в ультрафиолетовом свете. На основании указанных свойств разработан метод флуорометрического определения тиамина. Однако при попытке определить этим методом тиамин в пищевых продуктах возникают трудности. Во-первых, часть витамина содержится в пище в виде сложных эфиров пиро - и ортофосфорной кислот. Окисление этих эфиров дает флуоресцирующие соединения, которые растворимы в воде, но не растворяются в изобутиловом спирте. Это затруднение устраняется гидролизом сложных эфиров перед окислением. Во-вторых, пищевые продукты содержат и другие вещества, ведущие себя подобно тиамину и мешающие поэтому его определению. Хеннесси и Церецедо [6] отделили тиамин от этих примесей методом ионного обмена. [15]