Cтраница 3
Для открытия аневрина рекомендуются цветные реакции с диазосоеди-нениями, но действительно специфичной реакцией можно считать лишь окисление аневрина в щелочной среде с образованием тиохрома. [31]
Затем, перемешав растворы в изобутиловом спирту, отмеривают 10 мл в пробирку из нефлюоресцирующего стекла и сравнивают флюоресценцию пробирки 3 ( с тиохромом) с флюоресценцией пробирки 2, где тиохрома нет, так как тиамин в ней не подвергался окислению. По израсходованному количеству тиохрома высчитывают содержание тиамина в данной моче. [32]
Витамин Bj сам по себе не флуоресцирует; его щелочные растворы легко подвергаются окислению, причем из витамина Ъ1 образуется соединение желтого цвета - тиохром, обладающее в воднощелочной среде яркой флуоресценцией синего цвета; максимум интенсивности свечения лежит при 460 - 470 ммк. Для выделения тиамина, например, из биологических жидкостей применяют кислый адсорбент - фуллерову землю; на кислых адсорбентах Bt в кислой среде устойчив. [33]
Тиохром извлекают 10 мл изобутилового спирта и определяют флюоресценцию, приливая к так же обработанной, но без окисления красной кровяной солью пробе стандартный раствор тиохрома ( тот же, что для мочи) до равенства флюоресценции. [34]
При люминесцентном методе определения витамина Вх [37] водную вытяжку, содержащую витамин в щелочном растворе, окисляют красной кровяной солью K3Fe ( CN) e, при этом образуется флуоресцирующий тиохром; его извлекают из реакционной смеси изобутиловым спиртом, и по интенсивности флуоресценции определяют содержание витамина Вг При этом методе существенно брать для окисления именно нужное количество красной кровяной соли: избыток окислителя, равно как его недостаток, приводят к ошибочным результатам. [35]
Затем, перемешав растворы в изобутиловом спирту, отмеривают 10 мл в пробирку из нефлюоресцирующего стекла и сравнивают флюоресценцию пробирки 3 ( с тиохромом) с флюоресценцией пробирки 2, где тиохрома нет, так как тиамин в ней не подвергался окислению. По израсходованному количеству тиохрома высчитывают содержание тиамина в данной моче. [36]
Более чувствительным и специфичным реактивом является свежеприготовленный гек-сацианоферрат ( III) калия ( реактив № 81); при освещении кварцевой лампой ( 365 м л) еще можно обнаружить 0 03 лг окисленного тиамина ( тиохрома) в виде светло-голубой флуоресценции. [37]
В щелочной среде тиамин окисляется в тио-хром феррицианидом калия. Тиохром обладает синей флюоресценцией при ультрафиолетовом облучении раствора на флюороскопе. [38]
Открытая тиольная форма тиамина - бесцветное вещество состава Cl2H17O2N4SNa - 4H2O [58] - находится в равновесном состоянии со своей циклической формой - XXII ( темно-желтые нестабильные кристаллы состава Cl2H15ON4SNa - 3H2O, получаемые при обработке суспензии тиамина в безводном спирте этилатом натрия [58]), которая дегидрируется различными окислительными агентами. Эта схема получения тиохрома через тиольную форму подтверждается тем, что тиохрома при использовании трех эквивалентов щелочи ( I, XIX, XX, II) образуется значительно больше, чем с двумя эквивалентами, когда раскрытия тиазолиевого цикла не происходит. [39]
Затем, перемешав растворы в изобутиловом спирту, отмеривают 10 мл в пробирку из нефлюоресцирующего стекла и сравнивают флюоресценцию пробирки 3 ( с тиохромом) с флюоресценцией пробирки 2, где тиохрома нет, так как тиамин в ней не подвергался окислению. По израсходованному количеству тиохрома высчитывают содержание тиамина в данной моче. [40]
Флюорометрическое определение тиамина часто затрудняется присутствием в ряде объектов соединений, также обладающих флюоресценцией. Эти примеси, маскируя флюоресценцию тиохрома, искажают результаты анализа и делают невозможным проведение определения без специальных обработок проб. [41]
Тиамин принадлежит к числу очень неустойчивых витаминов. В присутствии кислорода он превращается в тиохром и тиаминдисульфид. В лекарственных препаратах значение рН не должно превышать 4, за пределами оптимальной области рН повышение. [42]
К 1 капле 5 % раствора тиамина ( или к 1 - 2 мг порошка) добавляют 5 - 10 капель 10 % раствора едкого натра и 1 - 2 капли 5 % раствора железосинеродистого калия и перемешивают. При нагревании жидкость окрашивается в желтый цвет вследствие превращения тиамина в тиохром. При освещении растворов тиохрома ультрафиолетовыми лучами видна голубая флюоресценция. [43]
По прошествии указанного времени хроматограмму удаляют из камеры и высушивают на воздухе. Под влиянием щелочного раствора феррицианида калия тиамин фосфорных эфиров окисляется в тиохром с образованием интенсивной синей флуоресценции. При просмотре в ультрафиолетовом свете флуоресцирующие пятна обрисовывают карандашом, и соответственно их местоположению определяют пятна на боковых, не проявленных окислителей, полосах бумаги. [44]
Открытая тиольная форма тиамина - бесцветное вещество состава Cl2H17O2N4SNa - 4H2O [58] - находится в равновесном состоянии со своей циклической формой - XXII ( темно-желтые нестабильные кристаллы состава Cl2H15ON4SNa - 3H2O, получаемые при обработке суспензии тиамина в безводном спирте этилатом натрия [58]), которая дегидрируется различными окислительными агентами. Эта схема получения тиохрома через тиольную форму подтверждается тем, что тиохрома при использовании трех эквивалентов щелочи ( I, XIX, XX, II) образуется значительно больше, чем с двумя эквивалентами, когда раскрытия тиазолиевого цикла не происходит. [45]