Cтраница 3
Присутствие всех четырех классических рибонуклеозид-5 - трифосфатов ( или монофосфатов и три-фосфат-регенерирующей системы), так же как дезоксирибонуклеино-вой кислоты, обязательно. Продукт обладает обычными свойствами рибонуклеиновых кислот. Он гидролизуется рибонуклеазой, а щелочной гидролиз после включения меченного Р32 уридин-5 - фосфата дает смесь нуклеозид - 2 ( 3) - фосфатов, причем все они содержат метку. [31]
Ферментативный синтез полидезоксинуклеотидов из дезоксину-клеозид-5 - трифосфатов ( сопровождающийся выделением неорганического пирофосфата) был впервые осуществлен Корнбергом и его сотрудниками [6] с помощью фермента из Escherichia со / г. Эта система, которая, вероятно, очень похожа на биосинтетические системы in vivo, требует присутствия всех четырех основных нуклеозид-5 - трифосфатов и дезоксирибонуклеиновой кислоты в качестве затравки, а также ионов магния. По ряду химических ( включая соотношение оснований), биохимических и физических свойств продукт ( молекулярный вес - 5 10) неотличим от затравочной ДНК, даже если состав смеси субстратов сильно отличается от состава затравки. Сродство к субстрату чрезвычайно велико. [32]
Точка эквивалентности NTA в смеси с трифосфатами, сульфатами или сульфонатами остается без изменения даже в присутствии большого количества этих веществ. Этим методом NTA успешно определяют в моющих средствах, содержащих также сульфонаты и сульфаты. [33]
Гликозидная связь в пуриновых нуклеозид-5 - трифосфатах лабильна в условиях УФ-облучения. [34]
Препятствует взаимопревращению пуринов; его нуклео-зид-5 - трифосфат мешает синтезу NAD. [35]
В ферментативную полимеризацию вводят смесь нуклеозид-5 - трифосфатов ( см. стр. Образующийся полимер расщепляют далее до мононуклеотидов таким образом, что разрывается связь Р - О ( О при С-5); для этой цели в случае ДНК используется гидролиз смесью ДНК-азы микрококков и фосфодиэстеразы змеиного яда, в случае РНК - гидролиз щелочью. После такого расщепления радиоактивный фосфат оказывается в составе нуклеозид - З - фосфата, остаток которого в полимерной цепи был соседним с остатком введенного меченого предшественника. [36]
Одна из многих биологических функций аденозин-5 - трифосфата состоит в активации различных кислот посредством образования смешанного ангидрида. [37]
Он максимально активен при наличии всех четырех трифосфатов, Mg2, NH, а также нативной ДНК. [38]
![]() |
Различные нуклеозид - и дезокси-нуклеозидтрифосфаты служат теми каналами, через которые энергия АТР направляется на биосинтез тех или иных клеточных компонентов. [39] |
Что же касается перечисленных здесь других ну-клеозид-5 - трифосфатов, то все они выполняют специализированные функции, обслуживая только строго определенные биосинтетические пути. Свои концевые фосфатные группы они получают от АТР в реакциях, катализируемых Mg2 - зависимыми ферментами, которые носят название нуклеозиддифосфокиназ. [40]
Является предшественником в биосинтезе соответствующих ди - и трифосфатов. [41]
Если в реакционной смеси отсутствует любой из трех немеченых трифосфатов, то тогда и включение меченого трифосфата значительно ослабляется. [42]
АМФ служит побочным продуктом реакций, использующих аденозин-5 - трифосфат ( АТФ) в качестве источника энергии. [43]
Повторив анализ для всех входящих в полимер нуклеозид-5 - трифосфатов, можно определить содержание всех возможных сочетаний динуклеотидов в данном полимере; это позволяет обнаружить идентичность или неидентичность двух нуклеотидных последовательностей. [44]
Для протекания ферментативной полимеризации нуклеозид-5 - ди - и трифосфатов, как правило, необходимо присутствие в инкубационной смеси помимо фермента и мононуклеотидных предшественников определенного количества олиго - или полинуклеотида, который может выполнять различные функции. [45]