Cтраница 2
А) образованы, по-видимому, из двойных а-спиралей. Ферментативная активность не обнаружена; повышена устойчивость к денатурирующим воздействиям. Актин, извлекаемый из мышц, содержит трудноудаляемый тропо-миозпн в количестве 10 - 15 % по отношению к актину. [16]
Весьма интересной в теоретическом отношении, а возможно и в технологическом, является так называемая денатурационная стабилизация. Здесь повышение устойчивости макроструктуры возникает, как это на первый взгляд ни странно, под влиянием денатурирующего фактора. Термин денатурационная стабилизация отражает и то, что стабилизация белка происходит по отношению к денатурирующему воздействию и под влиянием последнего. [17]
Формальдегид в низкой концентрации легко реагирует со свободными аминогруппами нуклеотидов РНК и почти не затрагивает аминогруппы нуклеотидов, связанных водородными связями в пары. При взаимодействии РНК с формальдегидом смещается максимум поглощения в УФ и повышается коэффициент молярной экстинкции. Это дает возможность использовать реакцию с формальдегидом в оценке структурных изменений РНК, возникающих под влиянием различного рода повреждающих и денатурирующих воздействий. [18]
Денатура-дия при растекании объясняется тем, что на поверхности раздела возникает монослой белка, в котором полнпептидные цепи развертываются. Чувствительность белка к этим воздействиям весьма различна: яичный альбумин, например, очень легко денатурируется при встряхивании раствора, тогда как активность инсулина не изменяется. Липопротеиды подвержены денатурации и диссоциации при замораживании. К механическим денатурирующим воздействиям следует также отнести и облучение звуковыми волнами высокой частоты. Это следует учитывать при использовании ультразвуковых генераторов для разрушения клеток с целью экстракции белков. При частоте порядка 10 кгц и тщательном охлаждении озвучиваемого раствора денатурация обычно незначительна или не наблюдается вовсе. [19]
Вместе с тем неизбежно должно происходить образование менее совершенных двунитевых структур, когда случайное комплементарное соответствие имеет протяженность в несколько нуклеотидов или когда в более длинных комплементарных участках есть отдельные некомплементарные пары оснований. Связывание НК на нуклеиновом аффинном сорбенте в результате такого несовершенного спаривания следует считать артефактом неспецифической сорбции. Для удаления неспецифически сорбированных НК можно воспользоваться различием в прочности совершенных ( специфических) и несовершенных двунитевых структур. С этой целью варьируют силу денатурирующих воздействий среды, подбирая их таким образом, что образование несовершенных двунитевых структур оказывается затрудненным при посадке вещества на сорбент, а все же образовавшиеся структуры такого рода диссоциируют при промывке. В то же время эти воздействия должны быть достаточно умеренными, чтобы не мешать образованию и сохранению совершенных, истинно комплементарных двунитевых структур. В качестве денатурирующих агентов используют обычно формамид и повышение температуры. Концентрация формамида 50 % при температуре около 40 отвечает постав ленным требованиям. [20]
Классический метод разделения альбуминов и глобулинов сыворотки крови основан на осаждении последних. Вместо сульфата аммония могут быть использованы и другие нейтральные соли - сульфат натрия, сульфат магния, смеси одно - и двухзамещенных фосфатов и др. Однако наибольшее распространение в качестве солевого осадителя - белков получил именно сульфат аммония. Это обусловлено главным образом тем, что высокая растворимость в воде сочетается у него с практической независимостью растворимости от температуры. Сульфат аммония весьма удобен также тем, что не оказывает денатурирующего воздействия на самые лабильные из известных белков. [21]