Cтраница 1
Изотахофорез представляет собой также разновидность электрофореза в ПАГ с использованием прерывистой буферной системы, в которой ведущий ион имеет высокую под вижность, а замыкающий - низкую, что обеспечивает высокую разрешающую способность метода. [1]
Метод изотахофореза, обладающий высокой разрешающей способностью, осуществляется с помощью капилляров, колонок и тонкослойных поддерживающих сред. Первоначально метод был использован для разделения смесей ионов, но впоследствии был развит и. [2]
При изотахофорезе ( iso - равный, tacho - скорость) [47, 48], также обладающем высокой разрешающей способностью, разделяемую белковую смесь вводят в специальный электролит, содержащий ионы с более высокой подвижностью ( лидирующие) и ионы с меньшей подвижностью ( терминирующие), чем подвижность ионов белка при равных скоростях перемещения. При добавлении специфических промежуточных ионов, поддерживающих интервал, разделяются белки с очень близкими подвижностями. Препаративное разделение белков проводят большей частью в колонках с полиакриламидным гелем при применении амфолитов в качестве буферных и поддерживающих интервал веществ, причем разделенные компоненты элюируются из колонки с помощью подходящей системы. [3]
В основе метода изотахофореза лежит уравнение Коль-рауша. [4]
Для макроразделений предпочтителен метод непрерывного изотахофореза без носителя, когда электрическое поле приложено перпендикулярно выбранному направлению потока электролита. [5]
Движение отдельных компонентов в системе изотахофореза является различным до тех пор, пока компоненты не расположатся в соответствии с их подвижностью. После этого скорости перемещения всех зон становятся равными, а рН принимают характеристические значения, соответствующие квазистационарному соотношению компонентов в отдельных зонах. [6]
Интересно было выяснить, возможно ли образование этого иона в условиях изотахофореза, и, следовательно, установить полноту перехода Fe ( Ш) в зону в стационарном состоянии. [7]
Ранее [ I, 2 ] при изучении поведения ионов урана ( 17), ( П) в изотахофорезе было обнаружено, что процессы комплексообразо-вания влияют на скорость и полноту выделения ионов в зону. В присутствии в исходном растворе урана или в католите сульфат -, ацетат - и некоторых других анионов образование зоны урана замедлялось и длина зоны уменьшалась. Это явление было объяснено склонностью урана к образованию анионных комплексов при высоких концентрациях сульфат - и ацетат-ионов и переходом в форме этих комплексов в анолит. [8]
Из исследований в области электрохроматографии следует отметить опубликованную в 1937 г. работу Тизелиуса ( электро-форетическое разделение белков) и метод изотахофореза, предложенный Константиновым и Ошурковой. [9]
Быстрое развитие метода было обусловлено двумя решающими усовершенствованиями: во-первых, был существенно уменьшен внутренний диаметр разделительного капилляра; во-вторых, детектирование по электропроводности, пришедшее первоначально из изотахофореза, было заменено на прямое УФ-двтектирование в потоке жидкости. [10]
Изотахофорез - - электрофорез, в котором перед разделяемой смесью помещают лидирующий электролит, а после нее - концевой электролит, причем под воздействием электрического полясмесь разделяется на примыкающие друг к другу зоны индивидуальных компонентов, выходящих в порядке понижения их электрофорстической подвижности. [11]
Если разделение проводится в трубках с полиакриламидным гелем, образующиеся зоны имеют форму дисков. В условиях изотахофореза [50] мигрирующие вещества образуют соприкасающиеся друг с другом зоны, которые расположены между лидирующим и замыкающим электролитом. Чтобы эти зоны не соприкасались, в исходную смесь добавляют вещества-разделители ( spacers), которые по своей электрофоретической подвижности занимают промежуточное положение между двумя наиболее близкими по этому параметру компонентами смеси. [12]
Это широкое определение охватывает также такие методы, которые обычно не относят к хроматографии, например фракционирование в поле тока и электрофорез. В то же время изотахофорез не подпадает под это определение. [13]
Самый медленный катион системы замыкает этот ряд ионов и остается ближайшим к аноду. После того как наступит равновесие изотахофореза и зоны расположатся в определенном порядке, их скорость миграции станет равна скорости перемещения границы между ведущим катионом и следующим самым быстрым катионом. [14]
![]() |
Разделение легких цепей свиного иммуноглобулина методом электрофореза в полиакриламидном геле ( по данным Франека и Зорина. [15] |