Установление - первичная структура
Cтраница 2
Как видно из материала предыдущего раздела, задача установления первичной структуры нуклеиновых кислот является весьма сложной и разрешена пока лишь в некоторых простейших случаях. В связи с этим большое значение для исследований связи структуры и реакционной способности, а также биологической активности приобретают модельные олиго - и полинуклеотиды определенного строения. [16]
Значение этих двух ферментов определяется прежде всего их использованием при установлении первичной структуры протеинов. [17]
Другая серия работ, проводимых в лаборатории Д. Г. Кнорре ( С. К. Василенко и др.), направлена на установление первичной структуры олигонуклеотидов и т - РНК. Основу этих исследований составляет остроумное использование фосфодиэстеразы змеиного яда. [18]
Дальнейшие задачи-установление последовательности расположения аминокислот в каждом из выделенных пептидов ( фенилтиогидантоиновым или другими методами), сопоставление полученных данных и установление первичной структуры всей молекулы. [19]
Первые опыты масс-спектрометрии метилированных дисахаридов показывают, что после должного усовершенствования техники такие подходы могут принести успех и сильно упростить задачу установления первичной структуры полисахаридной цепи. [20]
Познание биологической функции и, в частности, молекулярного механизма физиологического действия белка невозможно без детального знания его строения. Установление первичной структуры белка служит основой для определения вторичной и третичной структур, выяснения расположения функциональных групп в его активном центре и открывает путь к познаиию механизма его функционирования. Исследование первичной структуры мутантных белков позволяет на молекулярном уровне выяснить характер наследственных болезней. Данные по первичной структуре используются как один из показателей при установлении и проверке таксономических взаимоотношений между различными видами живых организмов и построении схемы биологической эволюции. [21]
Эти методы охарактеризованы в § 7.8. С их помощью прочитаны текст ы многих генов, а также транспортных и других видов РНК. Установление первичной структуры нуклеиновой кислоты является сейчас более простой задачей, чем установление последовательности аминокислотных остатков в белке. [22]
Белки и нуклеиновые кислоты при всем их неисчерпаемом многообразии построены из стандартных наборов соответствующих мономеров. Поэтому установление первичной структуры сводится преимущественно к выяснению, в каком порядке эти мономеры располагаются вдоль полипептидной или полинуклеотид-ной цепи. Эту задачу часто называют секвенированием ( от англ. [23]
Большие надежды в определении первичной структуры ДНК исследователи возлагают на физические, химические ( синтез генов), генетические и другие методы, а также на методы выделения некоторых генов ( или их фрагментов) из природных источников и синтеза генов на мРНК при участии фермента обратной транскриптазы. Для установления первичной структуры ДНК недавно предложен экспресс-метод, включающий применение двух ДНК-полимераз ( из E. Однако во всех этих случаях определяется структура небольшого участка ДНК, поэтому полная расшифровка первичной структуры ДНК генома человека ждет своего решения. [24]
Широко известен работами по установлению первичной структуры мембранных белков с помощью методов генной инженерии ( ацетил холи новый рецептор. [25]
 |
Геяетическия код. [26] |
Информация, получаемая при установлении первичной структуры генов, может с помощью генетического кода легко переводиться в информацию о структуре кодируемого белка. Это в ряде случаев весьма существенно, так как техника секвенирования ДНК на сегодняшний день существенно проще, чем для белков. Правда, для такого перевода необходимо решить несколько нетривиальных задач. Во-первых, нужно правильно разбить установленную нуклеотидную последовательность на кодоны. Во-вторых, нужно найти положение кодона, соответствующего первой аминокислоте полипептидной цепи. [27]
Очевидно, что наиболее точным методом Определения молекулярной массы индивидуального белка или нуклеиновой кислоты является установление их первичной структуры, после чего молекулярную массу получают простым суммированием ее значений для отдельных мономерных звеньев. Поскольку на сегодняшнем уровне биохимии установление первичной структуры практически всегда является одной из основных целей исчерпывающего изучения биополимера, остальные методы определения молекулярной массы применяются в основном на промежуточных этапах исследования, а также в тех случаях, когда биополимер не удается получить в виде индивидуального, пригодного для детальных структурных исследований вещества. В этом параграфе речь будет идти именно о таких приближенных методах, используемых на первой фазе изучения биополимера. [28]
Благодаря широкому применению автоматических аминокислотных анализаторов определение аминокислотного состава пептидов не представляет в настоящее время значительных трудностей. Однако один из важнейших вопросов установления первичной структуры белков и пептидов - определение последовательности аминокислотных остатков в цепи продолжает оставаться весьма трудоемким и сложным. Недавно было установлено, что при масс-спектрометрировании эфиров N-ацилированных олигопептидов в качестве первого акта фрагментации молекулярного иона происходит элиминация алк-оксильной группы и возникает линейный ион, у которого положительный заряд локализован на С-конце, а N-конец защищен ацильным остатком. Дальнейший распад этого иона заключается в последовательной элиминации аминокислотных остатков с перемещением положительного заряда вдоль цепи. [29]
Наиболее удобными объектами исследования оказались транспортные РНК. Достигнуты большие успехи и в установлении первичной структуры многих ДНК. [30]
Страницы: 1 2 3