Неподвижная водная фаза

Cтраница 2

Компоненты гидролизата распределяются между водой, адсорбированной на целлюлозе и являющейся неподвижной фазой, и органическим растворителем, пбдвйжной фазой ( например, водный этиловый спирт, бутиловый спирт, фенол), которая движется вдоль листа вверх или вниз, - восходящий или нисходящий способы. Более липофильные аминокислоты сильнее увлекаются органическим растворителем, более гидрофильные - проявляют большую тенденцию связываться с неподвижной водной фазой. Гомологичные соединения, отличающиеся даже на одно метиленовое звено, движутся с различной скоростью и легко могут быть разделены. По окончании хроматографии бумагу высушивают и опрыскивают нин-гидрином для проявления аминокислот в виде окрашенных пятен. [16]

Сущность бумажной распределительной хроматографии состоит в том, что на полоску бумаги наносят микрокаплю раствора исследуемой смеси веществ, полоску помещают в герметически закрывающуюся камеру, насыщенную парами растворителя, и тот конец бумаги, на который нанесено вещество, опускают в кювету с подвижным растворителем ( подвижной фазой), насыщенным водой. Бумага имеет сильное сродство с водой, содержащейся в растворителе, и ее можно рассматривать как носитель неподвижной водной фазы. [17]

Ионоэксклюзионная распределительная хроматография является хорошо известным методом, который в последнее время привлек к себе повышенное внимание. Благодаря эффекту доннановского распределения ионизированные соединения не удерживаются ионообменной смолой, в то время как неионизированные продукты могут распределяться между неподвижной водной фазой, находящейся внутри частиц смолы, и подвижной жидкой фазой, перемещающейся в пространстве между частицами насадки. [18]

Консден, Гордон и Мартин46 рассматривали хроматографию на бумаге как простую форму жидкостной распределительной хроматографии, в которой фильтровальная бумага является инертным носителем неподвижной водной фазы. Позже авторы сами раскритиковали эту точку зрения, поскольку во многих случаях разделение достигается при использовании водорастворимых растворителей - этанола и пропано-ла, ацетона, пиридина или даже чистой воды. Однако Мартин94 пришел к выводу, что удерживаемая целлюлозой вода скорее сравнима с концентрированным раствором глюкозы или полисахаридов, чем с водой, насыщенной органической фазой. Аналогичным образом Гейне и Ишервуд95 рассматривают неподвижную фазу как комплекс воды с целлюлозой. По-видимому, в хроматографии на бумаге имеют значение как адсорбция, так и процессы распределения, во всяком случае Штамм и Цолин-гер 97 определенно установили это в случае азокрасителей. [19]

Ионоэксклюзионная хроматография является широко известным эффективным методом, вторая волна популярности которой наблюдается в настоящее время. В основе данного механизма разделения лежит эффект доннажшскош распределения, в результате которого соединения в ионизированной форме не удерживаются на иоиообменникс, тогда как соединения в молекулярной форме распределяются между неподвижной водной фазой внутри пор ионообменника и подвижной фазой, мигрирующей в пространстве между частицами сорбента. Разделение основано на: шектростати-ческом отталкивании, полярных и гидрофобных взаимодействиях между растворенным соединением и сорбентом. [20]

Различают методы окислительного и восстановительного хро-матографирования плутония. Первый из них основан на извлечении Pu ( IV) и Pu ( VI) в фазу подвижного растворителя и сорбции элементов, имеющих большие Kd - Во втором случае, наоборот, плутоний в виде Pu ( III) задерживается в неподвижной водной фазе, а такие элементы, как U ( VI), удаляются подвижным растворителем. Иногда становится необходимым последовательное использование обоих методов. [21]

Хультгрен и Хеффнер [238] пользуются упрощенной техникой приготовления носителя и колонки. Силикагель для хроматографии ( 50 - 100 меш) перед использованием выдерживают - 2 час. Перед работой колонку заполняют силикагелем и водой, затем пропускают неподвижную водную фазу, избыток которой вытесняют подвижным органическим растворителем. [22]

Делительная воронка. [23]

Этот способ разделения называется распределительной хроматографией. В хроматографическую колонку ( см. рис. 3) помещают твердый адсорбент, например силикагель, предварительно смоченный водой и высушенный до воздушно-сухого состояния, На поверхности воздушно-сухого силикагеля остается еще значительное количество адсорбированной воды, ее можно рассматривать как неподвижную водную фазу, а силикагель - как носитель этой фазы. [24]

Термин распределительная жидкостная колоночная хроматография, строго говоря, предполагает наличие двух жидких фаз, неподвижной и подвижной, при том, что неподвижность одной из них обусловлена ее связью с твердой матрицей, заполняющей хромато-графическую колонку. Этот вид хроматографии базируется на явлении растворимости. Движение хроматографических зон по колонке и элюция пиков подвижной фазой происходят в направлении от % менее гидрофильных к более гидрофильным компонентам смеси. При изократической элюции последние лишь понемногу и с трудом диффундируют от неподвижной водной фазы в подвижную. Для ускорения их элюции можно постепенно ( градиентно) увеличивать полярность подвижной фазы, например уменьшая в ней содержание органического растворителя в пользу воды. [25]

На разделении аминокислот неблагоприятно сказывались адсорбционные свойства используемого инертного носителя, чаще всего силикагеля. В 1943 г. Мартин, Консден и Гордон использовали для анализа малых количеств аминокислот фильтровальную бумагу в качестве носителя неподвижной водной фазы, а в качестве подвижной фазы смесь органического растворителя с водой. [26]

Страницы: 1 2