Кристаллический фермент

Cтраница 1

Кристаллический фермент при хранении его в растворе сульфата аммония 50 % - ного насыщения стабилен на холоде в течение нескольких месяцев. [1]

Кристаллические ферменты обладают очень высокой каталитической активностью, не меняющейся при многократных перекристаллизациях. Было установлено также, что снижение активности фермента всегда сопровождается частичной денатурацией белка. Все эти факты заставили окончательно признать белковую природу ферментов. [2]

Кристаллический фермент, выделенный из мышц кролика, находится в фосфр-рилированной форме. Он содержит один моль фосфата на моль энзима. Дефосфорили-рованный фермент вообще не проявляет активности, он активен в присутствии небольших количеств глюкозо-1 6-дифосфата. ФГМ в активном центре содержит остаток серина, необходимый для ее каталитической активности. [3]

Кристаллический фермент хранят на холоду в виде суспензии в воде, и перед применением кристаллики фермента ополаскивают водой для удаления свободных аминокислот. Для собственно аналитической работы важно, чтобы фермент не был загрязнен свободными аминокислотами и особенно химотрипсином, поскольку последний легко отщепляет пептидные цепочки в месте присоединения ароматических аминокислот, которые карбоксипепти-даза отщепляет особенно легко. [4]

Рентгенограммы кристаллических ферментов, полученные к настоящему времени, ясно демонстрируют все эти возможности, и они заслуживают самого пристального внимания исследователей, пытающихся объяснить каталитические свойства ферментов. [5]

Хроматографическая очистка глутаматдекарбоксилазы ( Escherichia coli на DEAE-сефадексе А-50. [6]

Гомогенность кристаллического фермента была подтверждена рядом методов. [7]

При получении кристаллических ферментов повторная перекристаллизация может вызвать увеличение удельной активности ферментного препарата до постоянного максимального значения. Необходимо указать, что гомогенность белка может быть определена только на основании данных, полученных несколькими из указанных методов исследования, и нельзя делать вывод о гомогенности по результатам одного из них. [8]

Многочисленные наблюдения над очищенными и кристаллическими ферментами, которые проводились в последние двадцать лет, позволили выяснить многие стороны природы и механизма ферментативного катализа. Важнейшим результатом этих исследований было обоснование положения о возникновении промежуточного комплекса фермент-субстрат, а также о существовании определенного активного центра в молекуле фермента, где, собственно, протекает акт катализа. Именно в активном центре наступает специфическое пространственное присоединение молекулы субстрата и разложение химического соединения, которое атакуется ферментом. Такое присоединение происходит вследствие особого расположения химических групп в активном центре, которые посредством разных сил ( ковалентные, ионные, координационные, водородные связи) воздействуют на химические группы субстрата. [9]

Кроме этого, удалось из кристаллических ферментов получить некоторые производные, например, апетилированные препараты пепсина, неактивные сами по себе, но способные к регенерации в активное соединение. [10]

Как писал В.А.Энгельгардт, получение этих кристаллических ферментов внесло смятение в умы исследователей, поскольку оно стояло в слишком резком противоречии со всеми теми представлениями, которые прочно сложились к тому времени у энзимологов ( 69, стр. [11]

Наконец, были определены молекулярные веса кристаллических ферментов методами, применяемыми в химии белков, причем были найдены иные значения, но того же порядка, что и у других белков. [12]

Методом рентгеноструктурного анализа было исследовано большое число кристаллических ферментов. Результаты таких исследований часто сопоставляются с данными, полученными химическими методами при 1) определении аминокислотной последовательности ферментов, 2) изучении их субстратной специфичности, 3) исследовании действия; специфических ингибиторов и 4) идентификации специфических функциональных групп в активном центре. Здесь показаны изображения ( в масштабе) молекул трех ферментов, иллюстрирующие некоторые их структурные и функциональные особенности, выявленные при рентгено-структурном анализе кристаллов этих ферментов. [13]

Ионоселективные электроды в сочетании с подложками, содержащими различные кристаллические ферменты, могут использоваться для концентратометрических исследований жидких сред. [14]

Определенное взаимодействие электролитов ( солей) с белком определяет условия получения кристаллических ферментов. [15]

Страницы: 1 2 3