Cтраница 3
![]() |
Иммуноферментный анализ ( твердофазный вариант. [31] |
Данная реакция ставится с применением AT, конъюгированных с ферритином. После обработки мечеными AT изучаемых объектов ( вирусов, бактерий, срезов инфицированных клеток) они становятся электронноплотными и могут быть выявлены при электронной микроскопии. Чаще всего эта реакция применяется в вирусологии. [32]
Кроме того, приведенный в этой статье [66] молекулярный вес ферритина лежит далеко за пределами области фракционирования, свойственной сефадексу G-200. При крайне сильном отклонении формы молекулы ( фибриноген) от нормальной диффузия в поры геля, естественно, будет затруднена, что приведет к раннему элюированию. Подобное явление наблюдается в опытах с нуклеиновыми кислотами, которые можно представить в виде жестких стержней, в то время как белки, грубо говоря, имеют форму мяча для регби. Фактически на всех гелях границы эксклюзии нуклеиновых кислот лежат гораздо ниже, чем у белков. [33]
Структурные данные и эксперименты по воссозданию дают основания полагать, что ферритин образуется из апоферритина и Fe2 посредством процесса, включающего окисление железа, последующий гидролиз и кристаллизацию. Железо попадает в белок через пространство между его субъединицами. В какой момент происходит его окисление - неизвестно. Возможно, белок участвует в удалении электронов от Fe2 или хелатирует атомы железа. Мазур, Баез и Шорр [116, 117] предположили, что небольшое количество Fe2 связывается в хелат тиоловыми группами, находящимися на поверхности белка. [34]
В опытах 1 мл 0 2 % - ного по железу насыщенного ферритина был подвергнут диализу против 10 мл 0 2 % - ного Рз-трансферрина, 1 0 мМ аскорбиновой кислоты, 1 0 мМ АМФ в 0 1 М трис-буфере, рН 7 4 [ воспроизводится с разрешения Дж. [35]
Полные оболочки апоферритина могут накапливать железо in vitro, образуя продукт, напоминающий ферритин. Лоэвус и Файнберг [112] подтвердили этот результат и показали, что захват соли железа ( Ш) апоферритином может регулироваться кипящим экстрактом печени. [36]
Испытывалось влияние различных посредников на перенос железа в отделении, в котором находится ферритин. [37]
Хелатирующие агенты, обладающие высоким сродством к железу, медленно выделяют его из ферритина. [38]
При токсических дозах свинец в печени, почках и селезенке частично связывается с ферритином и нерастворимым гидрок-сидом железа. Происходит ли аналогичное связывание в норме, неизвестно [ Russel H. В мозге свинец концентрируется в сером веществе и базальных ганглиях [ Klein M. Внутри нервных клеток этот МЭ локализуется преимущественно в митохондриях, занимая, по-видимому, участки связывания кальция. В норме у человека более 20 % свинца находится в скелете. Из них около 70 % приходится на трубчатые кости. Свинец откладывается в кости сперва в легкорастворимой форме, затек превращается в трифосфат. Обмен этого элемента во многом аналогичен обмену кальция. Концентрация этого МЭ в зубах выше, чем в костной ткани, причем находится он в них в прочно связанной форме. [39]
![]() |
Шлиран-диаграммы ферритина, воссозданного из Fe2 и апоферритина в условиях окисления. [40] |
Известно, что сывороточное железо, связанное с трансферри-ном, in vivo переносится в ферритин. [41]
При электронно-микроскопическом исследовании обнаружены множество плеоморфных сидеросом, железо в различной стадии кристаллизации и ферритин на мембранах рези-дуальных телец. Впоследствии больной умер от сердечно-сосудистой недостаточности. [42]
Для получения ферритина до сих пор широко используется метод Гранина [21], основанный на относительной устойчивости ферритина к нагреванию. Водный экстракт измельченной ткани нагревают до 80 С на водяной бане. После охлаждения и удаления денатурированных белков ферритин осаждают сульфатом аммония и выделяют центрифугированием. [43]
Видно, что в молекулах с низким содержанием железа ядра кажутся гораздо меньшими, чем ядра полного ферритина. [45]