Флуорофор

Cтраница 2

Флуоресцентная анизотропия, связанная с интенсивностью параллельной и перпендикулярной компонент флуоресценции, является мерой деполяризации, быстро происходящей с незатрудненным флуорофором, и медленно, если флуорофор затруднен. [16]

Удовлетворительные результаты при использовании 4-моноза-мещенных стильбена в качестве оптических отбеливателей достигнуты лишь в тех случаях, когда заместителем является такой сильный флуорофор, как арилтриазол-2 - ильный радикал. Ди-замещенные стильбены представлены в достаточно широком ассортименте, поскольку бисациламиностильбены могут быть использованы как флуоресцентные отбеливающие агенты. Из всех бисациламиностильбенов наибольший эффект дают бистриазинил-аминостильбеновые производные. [17]

Возможно также непрямое флуоресцентное детектирование, при этом речь может идти об универсальной методике детектирования, если имеется в распоряжении подходящий флуорофор без эффекта тушения. [18]

Амино - и карбоксильные производные стильбена. [19]

Выпуск Тинопала RBS [1] ( CI Флуоресцентный отбеливающий агент 46) [21] явился замечательным успехом в комбинировании стильбенового и арилтриазольного флуорофоров. [20]

Само собой разумеется, что могут использоваться УФ-неактивные и нефлуоресцирующие пробы, если применять реагенты, употребляемые обычно для получения соответствующих производных перед разделением хромофоров и флуорофоров. В результате этого, однако проявляют себя недостатки предколоночного происхождения, известные из ВЭЖХ. Специальные реагенты для электрофореза, имеющие помимо хромофора еще и соответствующий заряд, являются темой для обсуждения. [22]

Для измерения флуоресценции используют специально предназначенные для этой цели флуоресцентные спектрофотометры, позволяющие с помощью монохроматоров задавать длины волн для возбуждающего и испускаемого света. Испускаемый флуорофором свет обычно регистрируют под углом 90 к падающему свету. [23]

Хемилюминесцент-ный метод обнаружения ДНК-мишени. Б - биотин, ЩФ - щелочная фосфатаза. А. Связывание биотинилированно-го зонда с ДНК-мишенью. Б. Связывание стрептавидина с биотином. Б. Связывание биотинилированной щелочной фосфатазы со стрептави-дином. Г. Образование люми-несцирующего продукта под действием щелочной фосфатазы. [24]

ДНК-мишени и не спариваются друг с другом, а 5 концевых нуклеотидов взаимно комплементарны и образуют шпильку. К 5 -концу присоединен флуоресцентный хромофор ( флуорофор), а к 3 -концу - нефлуоресцентный хромофор ( тушитель), на который передается энергия возбуждения флуорофора. В растворе при комнатной температуре маяк имеет такую конфигурацию, при которой флуорофор и тушитель находятся в тесном контакте, и флуоресценция флуорофора тушится. [25]

Всякое флуоресцирующее вещество неизбежно является поглощающим, поэтому естественно, что некоторые закономерности теории цветности могут быть перенесены на явления флуоресценции; однако подобная аналогия довольно тривиальна и такие, например, понятия, как бато - и гипсофлор, дублирующие понятия бато - и гипсохромных групп, теории цветности не представляются особо необходимыми, поскольку между спектрами абсорбции и флуоресценции в подавляющем большинстве случаев имеет место вполне определенное соответствие. В то же время основное понятие флуорофора остается чрезвычайно расплывчатым. Исследование спектральных характеристик люминесценции и ее поляризации позволяет думать, что отдельное понятие флуорофора не имеет смысла, если подразумевать под ним систему, в которой происходит излучение. Эта система тождественна с хромофорной системой молекулы, поскольку поглощение света в длинноволновой полосе, обусловливающей окраску соединения, и излучение определяются одними и теми же электронными состояниями молекулы. [26]

Это становится понятным, если учесть сольватацию молекулы флуорофора в основном и электронно-возбужденном состояниях молекулами растворителя в результате диполь-дипольного взаимодействия. [27]

Широко используют в ТСХ пред - и пост-дериватизацию исследуемых соединений. Обычно целью дериватизации в ТСХ является повышение чувствительности анализа при введении хромофоров или флуорофоров в молекулы исследуемых соединений. [28]

После фильтрования с отсасыванием гель насыщают несколькими каплями 10 % - ного триэтиламина в хлороформе. Триэтиламин должен присутствовать в геле перед добавлением флуорескамина для предотвращения превращения производного геля, содержащего флуорофор, в нефлуоресцирующий у лак - тон. Подготовленный раствор оставляют на 10 мин при комнатной температуре, затем гель фильтруют с отсасыванием и промывают хлороформом, метанолом и снова хлороформом. [29]

Значительная чувствительность флуоресценции к внутримолекулярным и межмолекулярным изменениям позволяет выявить взаимодействия молекул, не обнаруживаемые другими методами. Так, ионизация и взаимодействие между молекулами, которые трудно обнаружить спектрофотометрическими методами, могут изменять квантовый выход флуоресценции, Флуорофоры, взаимодействуя со специфическим ферментом, могут увеличить или уменьшить интенсивность его флуоресценции, и по степени изменения интенсивности можно судить о типе связи. Межмолекулярные и внутримолекулярные взаимодействия могут вызвать также изменения в спектрах возбуждения и флуоресценции. [30]

Страницы: 1 2 3