Репликативная форма

Cтраница 2

Получены четкие доказательства ( см. стр. РНК вирусов сопровождается образованием двух-цепочечной репликативной формы РНК. Эта РНК устойчива к рибонуклеазе, но при нагревании до высоких температур ( от 102 до 104) наступают резкие изменения. При градиентном центрифугировании двухцепочечная форма характеризуется несколько меньшей плотностью, чем соответствующая одноцепочечная. [16]

Оно было идентифицировано как двухцепочечная репликативная форма РНК фага MS2 ( стр. Эта репликативная форма, по-видимому, аналогична репликативной форме ДНК фага Х174 ( стр. [17]

Наряду с этим та же РНК способна образовывать гибриды с денатурированной ДНК. По всей вероятности, в этом случае образуется гибрид со второй, ( - ) - цепью ДНК репликативной формы. Таким образом, источником передаваемой генетической информации служит ( - ) - цепь репликативной формы ДНК. In vitro же матрицами транскрибирующейся РНК могут служить обе цепи ДНК. [18]

Далее следует перестройка одного из концов этой молекулы с образованием заячьих ушей. В таком случае синтез новой цепи будет сопровождаться вытеснением исходной родительской цепи из дуплекса; другим продуктом реакции будет двухнитевая репликативная форма, у которой комплементарные цепи опять ковалентно связаны между собой, но на этот раз уже на другом конце молекулы. Затем происходит регенерация и инверсия З - конца комплементарной цепи. [19]

Схема репликации генома фага cfX174 ( схема разматывающегося рулона. [20]

Как уже было сказано, ряд фагов ( срХ174, G4, М13 и др.) имеют однонитевой кольцевой геном. Вскоре после попадания такого генома в клетку он превращается в кольцевой ковалентно-непрерывный дуплекс ( или, как говорят, в репликативную форму - Это превращение включает ряд стадий: 1) образование затравки; 2) элонгацию комплементарной цепи, осуществляемую клеточной ДНК-полимеразой III; 3) удаление РНК-затравки, которое производится, по-видимому, за счет 5 -экзонуклеазной активности клеточной ДНК-полимеразы I; 4) достраивание комплементарной цепи; 5) лигирование концов комплементарной цепи ДНК-лигазой и 6) внесение сверхспиральных витков в ковалентно-непрерывный дуплекс при помощи гиразы. Обратим внимание, что все ферменты, обеспечивающие перевод родительского генома в репликативную форму, имеют клеточное происхождение. [21]

ДНК в соответствии с размерами и формой их макромолекул, но при этом происходит денатурация ДНК. С помощью этого метода можно отличать линейную форму ДНК от кольцевой и определять относительные размеры фрагментов ДНК. Репликативная форма II ( РФП) ДНК фага фХ174 представляет собой двухцепочеч-ное кольцо с разрывом в одной из цепей. [22]

Схема терминации синтеза ( 4 - цепи фага рХ174. [23]

Трансляция фаговых мРНК приводит к накоплению вирус-специфических белков, в том числе и структурных, которые - при достаточной концентрации - начинают превращаться в сложные структуры - предшественники вирусного капсида. Генерируемые на этой стадии ( - ( -) кольца в результате специфических взаимодействий с белками фага вовлекаются в процесс сборки вириона. Тем самым предотвращается ставший уже ненужным переход () цепей в репликативную форму. [24]

Схема репликации генома фага [ Х174 ( схема разматывающегося рулона. [26]

Как уже было сказано, ряд фагов ( срХ174, G4, М13 и др.) имеют однонитевой кольцевой геном. Это превращение включает ряд стадий: 1) образование затравки; 2) элонгацию комплементарной цепи, осуществляемую клеточной ДНК-полимеразой III; 3) удаление РНК-затравки, которое производится, по-видимому, за счет 5 -экзонуклеазной активности клеточной ДНК-полимеразы I; 4) достраивание комплементарной цепи; 5) лигирование концов комплементарной цепи ДНК-лигазой и 6) внесение сверхспиральных витков в ковалентно-непрерывный дуплекс при помощи гиразы. Обратим внимание, что все ферменты, обеспечивающие перевод родительского генома в репликативную форму, имеют клеточное происхождение. [27]

Левосторонняя транскрипция идет через гены ехо и р, принимающие участие в процессе рекомбинации, и ген xis, необходимый для исключения ( excision) фаговой ДНК из хромосомы. Теперь транскрипция профага может продолжаться с точки а на гены бактерии. Трансляция мРНК, транскрибированной с этого раннего левого оперона, приводит к появлению ферментов, необходимых для освобождения профага и образования кольцевой репликативной формы фаговой ДНК-Исключение ДНК из бактериальной хромосомы происходит также вблизи точки а, причем легко видеть, что при исключении фаг А может иногда захватывать с собой соседние гены gal клетки-хозяина. [29]

Свойства этой ДНК ( имеющей молекулярный вес 1 6 - 10е) ясно показывали, что по своей кон-формации она сильно отличается от большинства нормальных типов ДНК и скорее напоминает некоторые типы РНК. Теперь мы знаем, что ДНК фага фХ174 является одноцепочечной. Весьма интересно, что, подобно РНК некоторых РНК-содержащих вирусов, эта ДНК переходит при репликации in vivo в так называемую репликативную форму, в которой имеется комплементарная цепь и которая представляет собой, по-видимому, замкнутую в кольцо двойную спираль. [30]

Страницы: 1 2 3