Фосфатаза

Cтраница 2

Методы определения активности фосфатаз основаны на количественном учете неорганического фосфора, образующегося при расщеплении под их действием соответствующих органических фосфорных соединений. [16]

К пробе добавляют фосфатазу - фермент, вызывающий гидролиз фосфорного эфира тиамина, который часто присутствует в пищевых продуктах. Фосфатазу и другие нерастворимые вещества отфильтровывают, а фильтрат разбавляют до известного объема. Отбирают две аликвотные порции: одну для анализа, другую для приготовления холостой пробы. К первой аликвотной порции добавляют окислитель ( феррицианид) и к обоим - NaOH и изобутанол. После встряхивания и отделения водного слоя спиртовой раствор исследуют на флуори-метре. [17]

Например, гексокиназа и фосфатаза, сшитые с инертным белком, образуют мембраны, которые могут действовать как глкжоз-ный насос. [18]

Большее значение имеет действие фосфатаз, освобождающих фосфор из его соединений с органическими веществами. [19]

Реакция катализируется ферментом D-глюкозо-б - фосфатазой. Этот фермент обнаруживает довольно высокую специфичность в отношении углеводной части молекулы субстрата: помимо глюкозо-6 - фосфата единственным субстратом, который быстро гидролизуется под действием этого фермента, является D-глюкозамин-б - фосфат. [20]

Обходные реакции при синтезе глюкозы в печени позвоночного. Обход фосфоглицераткиназы точно не установлен. На схеме показаны три возможных варианта, один из которых - кинетический обход, т. е. просто обращение реакции фосфоглицераткиназы. Этот вариант считается наименее вероятным, так как и кинетические, и термодинамические условия весьма неблагоприятны для. такой реакции. [21]

Обход гексокиназной реакции осуществляет глкжозо-6 - фосфатаза. [22]

Часто предполагают, что при действии фосфатаз образуется промежуточное фосфорилферментное соединение, которое затем гидролизуется, и в некоторых случаях эта особенность механизма вполне установлена. Так как водные растворы содержат 55 5 М воды, то эти реакции иногда трудно заметить, если не использовать смешанные растворители. В некоторых случаях, однако, найдены такие нуклеофилы, которые даже в малой концентрации эффективно конкурируют с водой. Неизвестно, имеют ли такие реакции биологическое значение. [23]

Молибден оказывает угнетающее влияние на активность костной фосфатазы, вызывает уменьшение содержания меди в организме. При избытке молибдена у животных и человека усиливается синтез УСЗНТИНОКСИДЭЗЫ и образование мочевой кислоты, что приводит к заболеванию молибденовой подагрой. По данным Т. А. Асмангулян ( 1965), при хронической за-тьавке животных молибден вызывает выраженные функциональные сдвиги в организме, в частности, увеличение количества сульфгидрильных групп в сыворотке крови и печени, а также уменьшение количества витамина С в печени. [24]

Гаррис [59] идентифицировал в яйцах лягушки фосфатазу, которая может гидролизовать фосфатные группы серина в казеине, обработанном трихлоруксусной кислотой. Эти данные были подтверждены и дополнены другими исследователями. [25]

ДНК, рестрикты векторной ДНК обрабатывают фосфатазой. [26]

Наиболее совершенным методом является обработка материала очищенной кишечной фосфатазой и пептидазой печени, при которой из кофермента А освобождается почти теоретическое количество пантотеновой кислоты, рассчитанной по содержанию р-аланина. Для этих же целей используют ферментный препарат из почек свиней, приготовляемый в лабораторных условиях. [27]

Количественное определение ферментативной активности. Эта процедура проводится в три этапа. 1 определение К., ( 9 - 4 и дополнение 9 - 2, 2 измерение начальных скоростей ( А при различных концентрациях фермента и при концентрации субстрата, близкой к насыщающей, например при концентрации, равной 10 KM, 3 построение графика ( Б, по оси абсцисс которого откладывается концентрация фермента, а по оси ординат-начальная скорость. Используя линейную часть кривой, можно определить количество фермента в неизвестном образце, обеспечивающем данную начальную скорость. В этом примере неизвестный образец дает начальную скорость 2 5 мкмоль / мин и содержит 5 8 единиц ферментативной активности. [28]

Несколько иная ситуация имеет место в случае кишечной фосфатазы, катализирующей гидролиз самых разных эфиров фосфорной кислоты, хотя скорости их расщепления сильно различаются. Изучение субстратной специфичности ферментов привело к возникновению идеи о комплемен-тарности молекулы субстрата и специфического участка на поверхности молекулы фермента, которые лодходят друг к другу, как ключ к замку. [29]

Мононуклеотиды в свою очередь расщепляются под влиянием фосфатаз кишечника на фосфорную кислоту и соответствующий нуклеозид ( стр. Нуклеозиды могут гидролизоваться далее с образованием пентозы и пу-ринового или пиримидинового основания. Ферментативный распад нук-леозидов осуществляется нуклеозидазами. [30]

Страницы: 1 2 3 4