Cтраница 3
Искажение в результаты анализа может внести разложение антиоксиданта, происходящее за счет загрязнений испарителя, каталитического действия материала испарителя и колонок, а также носителя. Для проверки и исключения подобных ошибок перед началом работы следует проанализировать искусственную смесь наиболее неустойчивого из определяемых антиоксидантов со стандартом. Полученная при этом хроматограмма изучается, определяется правильность формы пика антиоксиданта ( отсутствие размывания переднего и заднего фронтов пика, отсутствие ложных пиков) и рассчитывается состав пробы с учетом поправочных коэффициентов, который затем сравнивается с составом взятой искусственной смеси. Свежеприготовленный сорбент и колонка, как правило, дают неудовлетворительные результаты по первым пробам, так как при этом происходит насыщение каталитически и адсорбци-онно активных центров сорбента и материала стенок колонки. После того как эти центры насыщаются ( за счет первых проб), проводят вышеуказанное испытание на искусственной смеси и приступают к анализу. [31]
При этом на оси самопишущего потенциометра 2 устанавливается дополнительный реохорд сравнения 3, с которого снимается напряжение, пропорциональное отклонению пера самописца. Это напряжение с помощью сумматора 4 сравнивается с напряжением задатчика программы, выполненного в виде набора потенциометров; четные потенциометры задают уровень отбора передних, нечетные - задних фронтов пиков. Когда напряжения с реохорда сравнения и потенциометра совпадают, коммутирующее устройство переключает клапаны и подсоединяет к сумматору следующую пару потенциометров. Для различения переднего и заднего фронтов пика применяется реле направления движения 7: зубчатое колесо, насаженное на ось реохорда, которое в зависимости от направления движения замыкает одну или другую систему контактов, подсоединяя к сумматору четные или нечетные потенциометры. Любой пик может быть пропущен без отбора. [32]
Обычно в газовой хроматографии получается пик с размытым задним фронтом, поэтому преаде всего мы исследовали форму этого заднего фронта. На рис. 1 представлен график зависимости С у-я, где у. X - ее абсцисса, причем за начя о координат принят максимум пика. Из рисунка видно, что задн, фронт пика можно описать двумя экспонентами, причем изл - - -, о-ксходит приблизительно з точке перегиба пика. В районе максимума пика кривая экспонентой не описывается и имеет более слом-нуго форму. [33]
Перегрузка колонки наступает тогда, когда нарушены два ограничения ( см. разд. III, А), определяющие максимально допустимую величину пробы, в результате чего падает эффективность колонки. В практике препаративной газовой хроматографии перегрузка колонки является скорее правилом, чем исключением. Изотермы распределения при этом нелинейны, при небольших перегрузках становятся растянутыми тыловые фронты пиков, а при больших перегрузках - и передние фронты. Однако первостепенное значение имеет чистота разделенных компонентов, и на неправильную форму пиков обращают мало внимания. [34]
Полученные результаты позволяют сделать выводы о целесообразности понижения температуры на начальном участке с постепенным повышением ее к концу колонки. Преимущества градиентной колонки начинают выявляться лишь при достаточно больших количествах разделяемой смеси. По-видимому, понижение температуры колонки на начальном участке и соответствующее снижение скорости движения хро-матографических полос разделяемых веществ создают благоприятные условия для массообмена в условиях высокой концентрации разделяемой смеси. Дальнейшее продвижение полос в более нагретые области колонки связано с уменьшением массообмена, связанного с ростом диффузии в жидкой фазе. Это обстоятельство противодействует расширению пика и снижению эффективности. Поскольку по мере продвижения полос к концу колонки температура повышается, то фронт пика движется быстрее, чем хвост. [35]
В особо трудных случаях, или когда компоненты образцов сильно отличаются по полярности и растворимости ( требуется ступенчатый градиент), может стать необходимым предадсор-бировать их на части неподвижной фазы. Для этого растворяют образец в хорошем растворителе, обычно намного более сильном, чем растворитель, который может быть использован в качестве подвижной фазы. Затем полностью адсорбируют этот раствор на достаточном количестве неподвижной фазы. Путем тщательной сушки, например с помощью роторного испарителя под вакуумом и осторожного нагревания, удаляют все следы растворителя, чтобы покрыть насадку образцом. Затем сухой материал помещают на вход препаративной ЖХ-колонкн или в отдельную колонку, подсоединенную к входу первой колонки. Затем через колонку пропускают подвижную фазу или проводят элюирование с помощью ступенчатого градиента. Такая методика достаточно хороша для фракционирования образца при условиях градиента, однако не дает хороших разделений в изократических системах. Медленное растворение компонентов образца приводит к интенсивному расширению полосы, размыванию фронта пика ( ср. [36]