Cтраница 4
Если эффект, наблюдаемый в некоторой клеточной структуре, вызван изменением химического состава среды в результате ионизации жидких компонентов клетки, теория мишеней также не может быть полезной. Совершенно ясно, что большое количество возможных типов действия излучений лежит вне сферы теории мишеней, и некоторые авторы ( например, Скотт, 1937) ставили вообще под сомнение существование таких эффектов излучений, которые можно было бы вполне удовлетворительно интерпретировать на основе этой теории. По мнению автора данной книги, в случае инактивации мелких вирусов и получения определенных хромосомных аберраций путем облучения справедливость теории мишеней достоверна настолько, насколько вообще может быть достоверна научная теория в столь быстро развивающейся области; основания для подобного утверждения станут ясными из дальнейшего изложения. Мы используем также эту теорию при анализе экспериментов по убиванию крупных вирусов и бактерий и по получению генных мутаций, считая, что и в этой области ее применение вполне оправдано. [46]
Материал обрабатывают антибиотиками - пенициллином ( 1000 ЕД / мл) и стрептомицином ( 500 ЕД / мл) в течение 2 ч при комнатной температуре, а затем используют его для выделения вируса. Часть материала замораживают и хранят при - 70 С. Многократное замораживание и оттаивание недопустимо, так как приводит к инактивации вируса. [47]
Репная белянка в США устойчива к вирусу гранулеза, если выращивалась при 36 [1991]; еловый общественный пилильщик Diprion her-cyniae устойчив к ядерному полиэдрозу при 29 4 [194]; совки Trichoplusia ni ( Hbn. Эти насекомые, однако, становятся восприимчивыми к соответствующим вирусам, если температура снижается или колеблется между высокой и низкой. Поскольку вирусы способны выдерживать высокие температуры вне тела насекомых, подавление болезни при высоких температурах, очевидно, не обусловлено инактивацией вируса. Поскольку гусеницы Trichoplusia ni и Heliothis zea, зараженные соответствующими вирусами и выдержанные 2 дня при 26 7, при последующем содержании при. Томпсон [2020] пришел к выводу, что высокая температура, по-видимому, влияет на механизм или на способ внедрения вирусов. Следовательно, точный механизм, благодаря которому насекомые противостоят заражению при высоких температурах, - не обязательно сводится к неспособности вируса внедряться в хозяина, а может заключаться в неспособности вируса размножаться в теле хозяина при высоких температурах или же быть обусловленным более высоким клеточным гуморальным иммунитетом, вызванным повышенным обменом веществ у хозяина. [48]
Все три рассмотренных усложняющих фактора действуют в одном направлении и приводят к тому, что размеры мишеней, вычисленные для различных излучений, не совпадают: полученные из данных для у-частиц, эти размеры больше, чем вычисленные из данных для у-лучей. Следовательно, если эксперименты по летальным мутациям интерпретированы на основе теории многих мишеней, число мишеней получится слишком большим. Однако известны случаи совпадения размеров мишеней, полученных для а-частиц и у-лучен. Сюда относится случай инактивации малых вирусов, рассмотренный в гл. [49]
В первую очередь это относится к группе кишечных вирусов, постоянно присутствующих в сточных водах. В результате исследований на доочищеной сточной воде Курьяновской станции аэрации ( Москва) с использованием модельного вируса полиомиелита определены условия, необходимые для инактивации кишечных вирусов в городских стоках. В основе процесса обеззараживания должно лежать сочетание двух факторов - продолжительности контакта и концентрации дезинфектанта. Оба эти фактора должны обеспечить 99 6 - 100 % - ную инактивацию остаточных вирусов. [50]
Энзимы и вирусы, по-видимому, удовлетворяют этим требованиям. II, единичная ионизация, в пределах молекулы энзима ведет к ее инактивации, а в гл. IV приведены данные, показывающие, что в случае крупномолекулярных вирусов имеется тесная связь между размером мишени для инактивации вируса и размером самой частицы вируса. Тем не менее, при исключительной недостаточности сведений о размерах гена, которые можно получить другими методами1, определение, дающее величину, большую или меньшую истинной величины, вероятно не более, чем в два раза, самое точное из всех возможных в настоящее время. [51]
Можно высказать достаточно правдоподобное предположение о том, что чувствительная к радиации часть вируса, о существовании которой говорят опыты но облучению, соответствует внутренней структуре ( или структурам), наблюдаемой с помощью электроннсго микроскопа, и допустить, что генетический аппарат вируса заключен в этой структуре. Следующее предположение состояло бы в том, что единичная ионизация в любой точке этой структуры, имеющей диаметр 0 1 мк, вызывает инактивацию вируса. III, систематическое увеличение вычисленного диаметра мишени с повышением плотности ионизации, вызываемой радиацией, свидетельствует о том, что мы имеем дело не с одной сферической мишенью, а либо с мишенью, форма которой очень далека от сферической, либо с множеством сферических мишеней, ионизация в пределах каждой из которых ведет к инактивации вируса. [52]
Изучение динамики инактивации аттенуированного ( LSc 2 ав) и вирулентного ( Магоней) штаммов вируса полиомиелита, серотип, а также вирусов Коксаки А-7, В-3 и ЕСНО-7 показало, что исследованные вирусы были одинаково чувствительны к действию продуктов электролиза поваренной соли. Вирулицидное действие продуктов электролиза зависит от тех же факторов, что и бактерицидное. Кроме того, установлено, что эффект инактивации продуктами электролиза энтеровирусов и фагов кишечной палочки зависит от активной реакции ( рН) среды. Аналогичные результаты были получены при инактивации вируса хлором. [53]
Озон разлагается с выделением теплоты. Вступают в реакции также свободные радикалы, образующиеся при разложении озона в воде. Озон, являясь сильным окислителем, разрушает ароматические ядра, но не действует на пиридиновые кольца. Полная гибель спор наблюдается только при дозе озона 10 мг / л и выше. При остаточной дозе озона 0 3 мг / л инактивация вирусов на 99 99 % наблюдается через 4 мин. Время контакта озона с водой, необходимое для обеззараживания, составляет 3 - 10 мин. Она выбирается пробным озонированием воды, контроль обеззараживания ведется по остаточному озону. Концентрация остаточного озона, равная 0 05 - 0 1 мг О3 / л, обеспечивает бактерицидный эффект при озонировании очищенной воды. [54]
Во введении к этой главе отмечалось, что в типичной клетке высокоспецифичный и генетически важный нуклеопротеид, составляющий хромосомы, занимает относительно небольшую часть всей клетки. В мелких кристаллизующихся вирусах нет такой дифференциации на генетически важный нуклеопротеид и цитоплазму, поскольку частица вируса построена только из нуклео-протеида. В отношении более крупных вирусов данных, полученных прямыми методами, мало. Некоторые сведения о природе вирусов могут дать, по-видимому, опыты с облучением. Чувствительный к облучению материал, в пределах которого единичная ионизация ведет к инактивации вируса, следует идентифицировать с генетически важным нуклеопротеидом, потому что вряд ли ионизация в пределах менее специсэичной цитоплазмы может привести к инактивации. Определение дозы инактивации дает возможность вычислить объем чувствительного материала, а сравнение его с объемом вируса позволяет определить, какую часть последнего составляет этот чувствительный к облучению материал. Так можно показать, что самые мелкие вирусы в соответствии с химически установленным их составом из одного только нуклеопротеида почти полностью чувствительны к облучению. Один из наиболее крупных вирусов - вирус вакцины обнаруживает дифференциацию на чувствительный и нечувствительный к облучению материал, сравнимую с дифференциацией высших клеток. Генетически самые мелкие вирусы можно рассматривать как голые гены, тогда как наиболее крупные вирусы ближе к одноклеточным организмам. Опыты облучения дают возможность определить, к какой из этих категорий данный вирус относится. [55]