Неконкурентный ингибитор

Cтраница 3

При этом было установлено, что величина / so лишь в случае чисто неконкурентных ингибиторов совпадает с / G. Уже для конкурентных обратимых ингибиторов при переходе от 5о к Kt необходим учет величин константы Михаэлиса и концентрации субстрата, поскольку в системе устанавливается равновесие между Е, S и I ( стр. Что касается необратимых ингибиторов, то в этом случае использование / 8о для оценки их реакционноспособ-ности без учета времени реакции не имеет никаких оснований. [31]

Разумеется, если ферментативная реакция протекает путем последовательного многоступенчатого превращения фермент-субстратного комплекса, ингибитор может реагировать на всех стадиях. В этих случаях ингибитор и субстрат взаимодействуют с ферментом независимо, вследствие чего ингибиторы такого типа носят наименование неконкурентных ингибиторов. [32]

При таком механизме процесса ингибирующее влияние продуктов реакции может рассматриваться как частный случай действия конкурентных обратимых ингибиторов. Не исключено, однако, что продукт ферментативной реакции имеет возможность взаимодействовать, помимо того, с функциональными группами вне активного центра и, таким образом, влиять на активность фермента по принципу неконкурентного ингибитора. [33]

Очевидно, что механизмы, включающие образование комплексов EAI, EQI или EI, можно легко отличить один от другого. Характер ингибирую-щего действия продукта реакции может также служить критерием при выборе допустимых механизмов; как уже было сказано выше, добавление продукта Q ( в случае прямой реакции) приводит к конкурентному ингиби-рованию в отношении субстрата А и неконкурентному в отношении субстрата В; продукт Р в случае упорядоченного механизма дает неконкурентное ингибирование как в отношении А, так и в отношении В, а в случае беспорядочных механизмов как Р, так и Q являются неконкурентными ингибиторами в отношении обоих субстратов - А и В. [34]

Обратимое ингибирование характеризуется равновесием между ферментом и ингибитором Константа равновесия ( Kt) служит мерой их сродства. Обратимые ингибиторы, действие которых приводит к увеличению эффективной Кт, называют конкурентными. Неконкурентные ингибиторы не влияют на величину Кт, но уменьшают максимальную скорость. [35]

Неконкурентные ингибиторы взаимодействуют с ферментами не в области активного центра, а на каком-то от него удалении, причем никаким избытком субстрата из комплекса не удаляются. При взаимодействии ингибитора с ферментом происходит изменение его конформации с последующей частичной дезинтеграцией активного центра. При взаимодействии фермента с неконкурентным ингибитором изменяется Vmax ферментативной реакции. [36]

Кинетика простой ( 7. [37]

До настоящего времени структура и механизм функционирования транспортных белков изучены недостаточно, что в значительной степени связано с трудностью их выделения в солюбилизированной форме. По-видимому, наиболее распространенным путем трансмембранного переноса веществ по механизму облегченной диффузии является транспорт с помощью каналообразующих веществ. Vmax ( рис. 22.7); 3) белок-переносчик имеет характерную для него константу связывания Км, равную концентрации транспортируемого вещества, при которой скорость транспорта составляет половину ее максимальной величины ( аналогично Км для системы фермент-субстрат), транспортные белки чувствительны к изменению значения рН среды; 4) они ингибируются конкурентными или неконкурентными ингибиторами. [38]

Различают конкурентные и неконкурентные ингибиторы ферментов. Конкурентные ингибиторы структурно подобны субстрату и занимают его место в субстратсвязывающем центре. Избытком субстрата они могут быть снова удалены. Неконкурентные ингибиторы реагируют с другими важными структурными частями фермента, например с группой SH, и не могут быть удалены избытком субстрата. [39]

Проведенный нами анализ неконкурентного ингибирования нельзя считать полным, так как мы исходили из предположения, что константы равновесия / Ki для образования комплексов EI и ESI совпадают. Более того, возможен также другой механизм образования тройного комплекса: EI S EIS. Для подобной системы был проведен полный анализ при условии стационарности реакции. При этом был сделан следующий важный вывод: существование неконкурентных ингибиторов обычно означает, что константа Км является константой равновесия. [40]

Наконец, в-четвертых, следует предостеречь от слишком поспешных выводов такого рода, поскольку активация, как и рН - эффекты, действительно может быть связана с пространственной блокадой. Она может объясняться просто удалением какой-то блокирующей группировки, скажем связанного ингибитора или одной из функциональных групп самого фермента, закрывающей активный центр и препятствующей тем самым образованию фермент-субстратного комплекса и каталитическому эффекту. Подобный механизм неконкурентного поведения весьма вероятен, особенно в случае фермента типа аскорбатоксидазы, когда в активный центр входит ион металла, играющий существенную роль как в каталитическом эффекте, так и в связывании субстрата. В подобном случае лиганд, связывающий ионы меди фермента, вполне может быть неконкурентным ингибитором, а другой лиганд, способный вытеснить первый, - неконкурентным активатором. Эти соображения не изменяют кинетической интерпретации, но влияют на выводы относительно химического механизма изучаемого процесса. [41]

В циклической системе, как и в линейной, обычно существует стадия, лимитирующая скорость процесса в целом; скорость этой стадии, зависящая от концентрации ферментов и величин мономолекулярных констант скорости, определяет максимальную скорость всего циклического процесса. Как и в случае линейной системы, частичное ингибирование этой лимитирующей стадии приводит к накоплению некоторых промежуточных продуктов. Примем, что лимитирующей является реакция, катализируемая Ер, и посмотрим, что произойдет при уменьшении концентрации этого фермента вследствие воздействия необратимого ингибитора или при уменьшении V вследствие воздействия неконкурентного ингибитора. [42]

Страницы: 1 2 3