Cтраница 2
Это связано со становлением нового экспресс-метода определения ММ и ММР - гель-проникающей хроматографии [ 192, с. Современные жидкостные хроматографы позволяют автоматизировать процесс измерения, применять ЭВМ. При серийных измерениях результаты можно получить за 10 - 30 мин. [16]
Разделения с помощью жидкостной хроматографии в большинстве случаев проводят при комнатной температуре, реже ( например, при хроматографии искусственных полимеров) используют нагревание, причем обычно не выше 100 С. Для термостатирова-ния часто применяют водяные термостаты. В современных жидкостных хроматографах используют обычно воздушное термостатирование с открытым нагревателем и быстрым принудительным перемешиванием. [17]
Производные аминокислот разделяют обычно методом обращенно-фазовой хроматографии в режиме градиентного элюирования. Применение такой схемы позволяет резко сократить ( до 30 - 40 мий) продолжительность цикла анализа. Высокая эффективность колонки обеспечивает значительное повышение чувствительности. Преимущество приборов, реализующих этот принцип, в том, что они содержат практически все узлы современного жидкостного хроматографа, фактически являясь специализированной версией такового. Поэтому они с легкостью могут быть приспособлены для других работ по ВЭЖХ. [18]
Тонкослойная хроматография ( ТСХ; английское TLC) и предшествовавший ей метод хроматографии на бумаге до середины 70 - х годов занимали центральное место в исследованиях структуры белков и нуклеиновых кислот. В последнее десятилетие эти методы были явно оттеснены электрофорезом и высокоэффективной жидкостной колоночной хроматографией при высоком давлении. Оба метода превосходят ТСХ по разрешающей способности, а второй из них - и по скорости анализа. Кроме того, в результате ЖХВД экспериментатор получает уже разделенные жидкие фракции исходного препарата, в то время как после ТСХ ему надо еще локализовать пятна на пластинке, а в случае необходимости дальнейшего анализа - выполнить длительные операции элюции из них вещества. Точное и проводимое в ходе самого фракционирования определение микроколичеств вещества во фракциях при ЖХВД, которое позволяют осуществить высокочувствительные детекторы и интегрирующие устройства современных жидкостных хроматографов, оставляет далеко позади соответствующие возможности ТСХ - ввиду плохой воспроизводимости процессов элюции из пятен и высокого уровня фона или самопоглощения в слое носителя при использовании оптических, флюоресцентных и радиоактивных методов оценки количества вещества в пятнах на пластинке без его элюции. Наконец, в препаративном варианте фракционирования количественные возможности ТСХ на несколько порядков меньше, чем у обычной колоночной хроматографии и даже у электрофореза. [19]