Радиальная хроматография
Cтраница 3
В других случаях желательно подчеркнуть особый характер течения фаз. В сухой колоночной хроматографии элюент вводят в колонку, заполненную сухим адсорбентом. В круговой хроматографии стартовая линия пробы имеет форму окружности; элюент вводится в центр, и фронт растворителя движется радиально, образуя расширяющуюся окружность. Препаративный вариант этого процесса проводится в цилиндрическом сегменте и носит название радиальной хроматографии. Аппарат для препаративной центрифужной радиальной хроматографии называется хроматоцентрифугой. Хроматография на клиновидных полосках представляет собой комбинацию круговой и линейной хроматографии: сначала используется принцип круговой хроматографии на круговом сегменте, чтобы расширить зоны в поперечном направлении и сузить в продольном, а дальнейшее разделение проводится при обычном линейном и параллельном перемещении растворителя. [31]
В анализе полимеров бумажную хроматографию применяют для качественного обнаружения и идентификации примесей. Бумажная хроматография - разновидность хроматографическо-го метода, где роль колонки, заполненной сорбентом, выполняет фильтровальная бумага. Движение растворителя обусловлено капиллярными силами. Когда поток растворителя движется вниз - нисходящая хроматография, когда вверх - восходящая; в радиальной хроматографии движение начинается от пятна - места нанесения капли. [32]
 |
Установка для нисходящей хроматографии. [33] |
При исследовании сложных смесей удобной оказывается радиальная хроматография. Исследуемое вещество помещают в центр бумажного кружка и туда же каплями наносят растворитель. Диффундируя, он захватывает анализируемое вещество, составные части которого распределяются концентрическими кругами. Полученная хроматограмма может быть разрезана на отдельные секторы, каждый из которых можно подвергнуть проявлению различными проявителями. Применение радиальной хроматографии расширяет возможности хроматографии, но требует большего внимания для получения равномерного продвижения фронта растворителя. [34]
В других случаях желательно подчеркнуть особый характер течения фаз. В сухой колоночной хроматографии элюент вводят в колонку, заполненную сухим адсорбентом. В круговой хроматографии стартовая линия пробы имеет форму окружности; элюент вводится в центр, и фронт растворителя движется радиально, образуя расширяющуюся окружность. Препаративный вариант этого процесса проводится в цилиндрическом сегменте и носит название радиальной хроматографии. Аппарат для препаративной центрифужной радиальной хроматографии называется хроматоцентрифугой. Хроматография на клиновидных полосках представляет собой комбинацию круговой и линейной хроматографии: сначала используется принцип круговой хроматографии на круговом сегменте, чтобы расширить зоны в поперечном направлении и сузить в продольном, а дальнейшее разделение проводится при обычном линейном и параллельном перемещении растворителя. [35]
Бумажная хроматография - исключительно простая разновидность хроматографическото метода, которая стала необычайно важным инструментом в органической химии и биохимии. В атом случае роль заполненной колонки выполняет фильтровальная бумага. Каплю раствора, содержащую образец, наносят на бумагу; в результате тока подвижной жидкости, называемой проявителем, происходит миграция. Движение проявителя обусловлено капиллярными силами. В некоторых случаях поток движется сверху вниз ( нисходящая хроматография), при этом вклад в движение вносит гравитационная сила. При восходящей хроматографии проявитель движется снизу вверх; в радиальной хроматографии движение начинается из пятна - места нанесения капли. [36]
Был предложен количественный хроматографический метод определения пи-ровиноградной кислоты в моче, проведена хроматография уроновых кислот на бумаге, нелетучих органических кислот в моче. Получена качественная хроматограмма нормальной мочи человека ( впервые такая хроматограмма получена Ф. М. Шемякиным и О. С. Лобахиной в 1952 г.), проведено определение нелетучих органических кислот в моче хроматографией на бумаге. Колонки, наполненные зернами резины, применены для выделения эстриола из мочи беременных, изучалась моча монозиготных и дизиготных близнецов. Хроматография успешно применена также для определения различных красящих веществ в моче - уропор-фиринов 1 и 3 и их эфиров, урохрома В, были изучены различные случаи порфиронурии хроматографией на бумаге, предложен упрощенный способ разделения порфиринов мочи и выделен кристаллический уропорфирин. Было изучено влияние солей на хроматографию Сахаров в моче, разделены восстанавливающие сахара. Методом радиальной хроматографии проведено разделение, идентификация и количественное определение мочевины в моче. Многочисленны работы по определению стероидов в моче - А-кетостероидов и стероидных кетолов. Было выяснено влияние кортизона на выделение 17-кетостероидов в моче при новообразованиях и др. Из мочи хроматографией выделен хлоргидрат дитио-фенилбутениламина. Распределительная хроматография применена для разделения аминокислот мочи в клинической биохимии, ионообменная хроматография использована при изучении болезни Вильсона, подробно разработана техника хроматографии аминокислот в моче. [37]
Для нанесения проб используют микропипетки различных емкостей и конструкций. Точность градуировки пипеток различна, поэтому при количественных анализах нужна повторная калибровка. Если требуется точное нанесение очень небольших количеств пробы, то применяют микрошприцы. При нанесении проб шприцами и микропипетками обычно используют специальный штатив, в котором их закрепляют. Если требуется нанести большее количество, то нанесение повторяют в одну и ту же точку по каплям, каждый раз просушивая пятно. Диаметр пятна не должен превышать 5 - 6 мм. Наносимый образец должен быть по возможности растворен в наименее полярном растворителе, чтобы избежать радиальной хроматографии веществ на старте. Желательно, чтобы температура кипения растворителя, в котором растворено наносимое вещество, не превышала 40 - 60 С ( D. Пятна веществ неправильной формы могут возникать также и в случае нарушения целостности слоя в точках нанесения проб. Beroza с сотрудниками ( - 1968) предложено устройство для автоматического одновременного нанесения нескольких проб на пластинки с тонким слоем сорбента. [38]
Страницы: 1 2 3