Жидкостная хроматография - высокое разрешение
Cтраница 2
Гоу и Джентофт [15] в обзоре, посвященном жидкостной хроматографии высокого разрешения, обращают внимание на то, что приготовление хороших колонок требует от исследователя терпения, находчивости наряду с экспериментаторскими способностями. [16]
Для препаративного разделения веществ и сбора разделенных фракций особенно полезной является жидкостная хроматография высокого разрешения. Этот процесс превосходит традиционные варианты газовой и жидкостной хроматографии по скорости разделения и удобству работы. Кроме того, при использовании этого метода снижается возможность разрушения пробы, так как она не подвергается воздействию высоких температур. [17]
 |
Разделение стероидов с использованием пористого полимера в качестве сорбента в системе с обращенной фазой.| Хроматограмма загрязнений. [18] |
В связи с этим окись алюминия заслуживает рассмотрения как насадка в жидкостной хроматографии высокого разрешения. На рис. 10.14 показано разделение образца воздушных загрязнений на колонке с окисью алюминия. [19]
Поскольку значения VK, по существу, не зависят от скорости подвижной фазы, они очень полезны в тех случаях, когда скорость подвижной фазы может меняться ( например, в жидкостной хроматографии высокого разрешения), или в тех случаях, когда эту скорость трудно измерять. [20]
 |
Схема двухцилиндрового возвратно-поступательного насоса фирмы Perkin-Elmer ( воспроизведено с разрешения Perkin-Elmer Corp., Norwalk, Conn.. [21] |
Ясно, что одним из наиболее важных факторов, определяющих возможности всего жидкостного хроматографа, является качество насоса. Для жидкостной хроматографии высокого разрешения необходим насос, который может продвигать подвижную фазу через длинные колонки малого диаметра, заполненные плотно упакованными очень мелкими частицами. Кроме того, важно, чтобы возникающие при работе насоса импульсы давления были бы сведены к минимуму, так как такие импульсы вызывают появление градиентов концентрации пробы, что приводит к нарушению работы автоматических детектирующих устройств. В особой степени это проявляется при работе с рефрактометрическим детектором. Для аналитической работы необходимы скорости подвижной фазы около 1 - 6 мл / мин. Точное значение необходимой скорости элюента зависит от диаметра колонки и от характера заполняющего ее материала. [22]
Время разделения является функцией вязкости подвижной жидкой фазы, общей пористости колонки, ее длины и перепада давлений на входе и выходе из колонки. Интенсивное изучение процесса жидкостной хроматографии высокого разрешения ( разд 7.4.4) привело к появлению большого числа сообщений о том, как перечисленные факторы влияют на время разделения. На рис 7.33 показана зависимость времени удерживания стандартного соединения ( о) от длины колонки для жидкостной хроматографии высокого разрешения при разных диаметрах частиц неподвижной фазы. [24]
Совершенно исключительное значение этого открытия для развития экспериментальной техники во всех направлениях химической науки ныне признается научной общественностью всего мира. Развитые на его основе методы газожидкостной, тонкослойной и жидкостной хроматографии высокого разрешения внесли поистине революционные преобразования в мир химической лаборатории, позволяя в считанные часы решать такие исследовательские задачи, которые раньше требовали многих лет упорного труда. [25]
Ввиду того что коэффициент емкости k прямо пропорционален объему стационарной фазы Vs, величина этого коэффициента увеличивается при повышении содержания жидкой фазы, нанесенной на твердый носитель. В частности, пелликулярные или поверхно-стнослойные стеклянные шарики, широко применяемые в жидкостной хроматографии высокого разрешения, в данных условиях эксперимента обычно имеют меньшие значения Vs и k для колонки заданных размеров. [26]
Скорости подвижной фазы в традиционной колоночной жидкостной хроматографии обычно довольно низки по сравнению, например, со скоростями в газовой хроматографии, так как диффузия молекул разделяемых веществ в стационарной фазе жидкостной хроматографии происходит относительно медленно. Для того чтобы увеличить скорость диффузии молекул пробы в неподвижной фазе, в жидкостной хроматографии высокого разрешения применяются частицы очень малого размера. Малые размеры таких мелких частиц создают определенные затруднения: для того чтобы продавить подвижную фазу через колонку, плотно заполненную очень мелкими частицами, требуется давление, намного превышающее атмосферное. Начиная с 1968 г. это направление хроматографии развивалось очень быстро. Для нагнетания подвижной жидкой фазы в колонки, заполненные очень мелкими частицами, применяются насосы, развивающие давление в сотни килограммов на квадратный сантиметр. Величина частиц современных адсорбентов составляет всего несколько микрометров. Разработаны специальные неподвижные фазы, имеющие непроницаемую для жидкости твердую сердцевину, что ограничивает диффузию органических соединений только поверхностным слоем адсорбента. Это облегчает элюиро-вание разделяемых веществ. Обычно в жидкостной хроматографии высокого давления применяют детекторы, регистрирующие элюируемые из колонки вещества по изменению показателя преломления, по поглощению УФ-света и по возникновению флуоресценции. Это экспериментальное направление развивалось очень быстро, и сейчас этот высокоэффективный метод разделения стал доступен химикам-органикам. [27]
Расходы на контроль качества термореактивных смол очень велики, поэтому кроме основных требований к аналитической процедуре - воспроизводимость, точность и чувствительность - все большее значение приобретает экономичность метода, определяемая, в первую очередь, степенью автоматизации соответствующего оборудования. Сегодня в аналитической химии фенольных смол все шире используют физико-химические методы исследований: гель-проникающую хроматографию ( ГПХ), газовую хроматографию ( ГХ), жидкостную хроматографию высокого разрешения ( ЖХВР) в сочетании с системами обработки информации на ЭВМ. [28]
 |
Схема двухцилиндрового возвратно-поступательного насоса фирмы Perkin-Elmer ( воспроизведено с разрешения Perkin-Elmer Corp., Norwalk, Conn.. [29] |
Растворители, применяемые в качестве подвижной фазы, должны быть освобождены от растворенных газов, так как в противном случае кислород может вступать в реакцию с подвижной или неподвижной фазой. Кроме того, пузырьки выделяющихся из растворителя газов могут нарушать нормальную работу детектора. Необходимо принимать во внимание тот факт, что жидкостная хроматография высокого разрешения предъявляет довольно жесткие требования ко всем элементам процесса. [30]
Страницы: 1 2 3