Cтраница 4
Для обнаружения на хроматограмме бесцветных пятен применяют физические и химические методы. Для проявления веществ, поглощающих в УФ-области спектра, применяют слои сорбента, содержащие флуоресцирующий индикатор, или орошают хроматограмму раствором флуоресцирующего индикатора. Под действием УФ-лучей вещества проявляются в виде темных пятен. Многие вещества способны флуоресцировать в УФ-све-те. Пятна при этом имеют различный оттенок. Для тех и других веществ в качестве источников света применяют приборы с максимумом излучения в области 254 и 365 нм, например ртутную лампу, снабженную фильтром Вуда. [46]
Ультрахроматография с флуоресцирующим индикатором проводится методом вытеснения, например на силикагеле с зернами 28 - 200 меш, помещенном в колонку длиной 1 м при диаметре 9 мм. Образец бензина берется в количестве 2 - - 5 мл и к нему добавляется одна капля флуоресцирующего индикатора. Конрадом для этой цели использовался индикатор парашин, в присутствии которого зона адсорбции ароматических углеводородов при облучении колонки ультрафиолетовым светом окрашивается в пурпурный цвет. Образец вводится в колонку, и после его полного поглощения в нее добавляется немного сухого силикагеля на высоту 5 мм. Затем в колонку вводится вытесняющий растворитель ( этиловый или изопропило-вый спирт) в количестве, равном двойному объему образца. [47]
Полученный олефиновый индикатор в УФ-свете дает ярко-синюю, а ароматический индикатор - ярко-голубую флуоресценцию. Для одного определения используется всего около 0 5 см3 углеводородной смеси, содер жащей 1 % ( по объему) флуоресцирующих индикаторов и жирового красителя. [48]
Для обнаружения на хроматограмме бесцветных пятен применяют физические и химические методы. Для проявления веществ, поглощающих в УФ-области спектра, применяют слои сорбента, содержащие флуоресцирующий индикатор, или орошают хроматограмму раствором флуоресцирующего индикатора. Под действием УФ-лучей вещества проявляются в виде темных пятен. Многие вещества способны флуоресцировать в УФ-све-те. Пятна при этом имеют различный оттенок. Для тех и других веществ в качестве источников света применяют приборы с максимумом излучения в области 254 и 365 нм, например ртутную лампу, снабженную фильтром Вуда. [49]
В этом методе определяют число искусственно загрязненных тарелок, которые можно отмыть раствором до момента исчезновения пены. В качестве загрязнений применяют маргарин, сало или смесь муки, яиц и масла. Иногда добавляют флуоресцирующий индикатор. Этот метод имеет ряд недостатков. То обстоятельство, однако, что этот метод испытания близок к обычному ручному способу мытья посуды, является известным преимуществом. [50]
В некоторых люминесцентных методах анализа флуоресцирующее вещество выступает как индикатор при объемных определениях. Так, например, флуоресцирующие индикаторы могут быть с успехом применены при реакциях нейтрализации: в точке эквивалентности происходит резкое изменение света флуоресценции. В табл. 30 приведены некоторые флуоресцирующие индикаторы, рН перехода их и характер изменения окрзеки. Обращает на себя внимание очень узкий интервал перехода рН для ряда индикаторов, что особенно ценно. Точно так же флуоресцирующие индикаторы могут быть применены при окислительно-восстановительных методах анализа. [51]
Многие гетероциклические соединения, например кумарин, ксантен, карбазол, акридин и их производные, флуоресцируют в растворах. Введение галоида или нитрогрупп уменьшает флуоресценцию, а введение аминогруппы увеличивает ее. Вещество может флуоресцировать в недиссоциированном состоянии или только как катион или анион; на этом основано применение флуоресцирующих индикаторов в объемном анализе. На флуоресценцию в значительной степени влияют внешние условия. Многие красители ( например, дифенилметановые, трифенилметановые и азокра-сители), слабо или вовсе не флуоресцирующие в воде, спирте или другом жидком растворителе, сильно флуоресцируют при нанесении на хлопок, шерсть или шелк. Один и тот же краситель может флуоресцировать на разных волокнах с различным цветом; флуоресценция Тиофлавина на ацетилцеллюлозе - синяя; на вискозе - желтая; на шелке - зеленая. [52]
Зона аренов в хроматографической колонке может быть установлена при освещении ультрафиолетовым светом - на этом основано применение ультрахроматографии. По отношению длины люминесцирующей зоны к общей длине углеводородных зон рассчитывают объемное содержание аренов в смеси. Арены бензиновых фракций не дают флуоресценции в ультрафиолетовом свете, но ультрахроматографию можно использовать и в этом случае, добавляя к анализируемой фракции флуоресцирующие индикаторы. [53]