Cтраница 2
Однако есть и свои трудности. Они связаны с формированием слоя геля. Не ограниченный стенками колонки слой геля на всей открытой поверхности пластинки должен быть одинаковым и однородным. Его консистенция должна быть оптимальной, чтобы гранулы плотно прилегали друг к другу и весь объем между ними был заполнен жидкостью, но чтобы не было и ее избытка над поверхностью слоя геля. Нельзя допустить подсыхания геля во время хроматографического процесса - для этого его следует держать в атмосфере насыщенного пара. [16]
Хроматография в тонких слоях в обычной форме ее осуществления принадлежит к первому из рассматриваемых в этой главе вариантов. В идеальном случае ее можно описать следующим образом: в процессе разделения неизменное количество данного вещества под действием потока подвижной фазы движется независимо от сопутствующих веществ вдоль неподвижной фазы. В процессе этого движения вещество непрерывно распределяется между двумя фазами. Между попаданием молекулы в подвижную фазу и последующим выходом из нее протекает некоторое время. Сумма этих интервалов времени составляет определенную долю времени хроматографического процесса, которую мы обозначим как время пребывания этой молекулы в подвижной фазе. Определенное таким образом время пребывания колеблется для одинаковых молекул около некоторого среднего значения, которое определяется их физическими свойствами и условиями опыта. Перемещение вперед с потоком наступает только тогда, когда молекула находится в потоке, и поэтому это происходит скачкообразно. Скорость в направлении потока также колеблется около некоторого. [17]
Хроматография в тонких слоях в обычной форме ее осуществления принадлежит к первому из рассматриваемых в этой главе вариантов. В идеальном случае ее можно описать следующим образом: в процессе разделения неизменное количество данного вещества под действием потока подвижной фазы движется независимо от сопутствующих веществ вдоль неподвижной фазы. В процессе этого движения вещество непрерывно распределяется между двумя фазами. Между попаданием молекулы в подвижную фазу и последующим выходом из нее протекает некоторое время. Сумма этих интервалов времени составляет определенную долю времени хроматографического процесса, которую мы обозначим как время пребывания этой молекулы в подвижной фазе. Определенное таким образом время пребывания колеблется для одинаковых молекул около некоторого среднего значения, которое определяется их физическими свойствами и условиями опыта. Перемещение вперед с потоком наступает только тогда, когда молекула находится в потоке, и поэтому это происходит скачкообразно. Скорость в направлении потока также колеблется около некоторого среднего значения, которое одинаково для всех частиц и соответствует скорости перемещения растворителя. [18]
Если измеряется флуоресценция твердого тела, то существует линейная зависимость между флуоресценцией и концентрацией до определенной величины при условии, что концентрация не слишком высока. В флуоресцентных измерениях на тонкослойных пластинках это не имеет места. Калибровочные кривые более или менее изогнуты. В этом проявляется влияние изменения концентрации образца по направлению к поверхности слоя, причем это изменение определяется испарением растворителя во время хроматографического процесса. [19]