Cтраница 3
Однако оказалось, что агглютинация препаратов клеточных стенок антисывороткой специфически ингибируется а-фенил - Г - ацетил-п-глюкоз-аминидом, а не ( З - фенил - М - ацетил-п-глюкозаминидом. Иммунохимические данные, следовательно, указывали на присутствие остатков N-ацетил - D-глюкозамина с - конфигурацией гликозидных связей. Самым мощным ингибитором агглютинации служит а - К-ацетил-в - глю-козаминилполирибитфосфат - конечный продукт действия р-ацетилглю-козаминидазы на свободную от аланина тейхоевую кислоту S. Антисыворотки, приготовленные против S. Дункан, оказались специфичными для остатков p - N-ацетил-в - глюкозамина. [31]
После того как внесенная в пробирки смесь агара и антисыворотки затвердеет, сверху наносят 0 3 % - ный расплавленный агар на высоту 8 - 10 мм. Как только затвердеет и этот слой, на него наслаивают смесь расплавленного агара с раствором антигена на высоту 20 мм. [32]
Видно, что в каждом случае после полной адсорбции антисыворотки белком с присоединенным гетерологичным гаптеном она сохраняет значительную способность преципитировать антигены с гомологичным гаптеном. Обычно сохраняется некоторая способность реагировать и с другими гетерологич-ными гаптенами. Каждый гаптен, очевидно, соединяется с той фракцией молекул антител, к которой имеет наибольшее сродство. Большинство молекул антител реагирует лучше всего с гомологичным гаптеном, причем подавляющая часть их после адсорбции гетерологичным гаптеном сохраняется. Сходные результаты получили Хукер и Бойд [17] и Ландштей-нер и Ван-дер - Шеер [25] с яичными альбуминами различных видов, хотя здесь истинная природа химического сходства, обусловливающего перекрестную реакцию, неизвестна. [33]
При проведении аналогичных опытов с использованием растительных агглютининов вместо антисывороток животных получаются, как правило, иные результаты. Если к лектину, агглютинирующему эритроциты двух различных групп, добавить эритроциты какой-либо одной группы, то при этом почти всегда удаляются оба вида антител. [34]
Непрямая РИФ проводится в 2 этапа с использованием двух различных антисывороток. [35]
Применяя гормон, связанный с полилизином, можно получить антисыворотку, специфичную к декапептиду ангиотензину. Такое поведение явно свидетельствует о присутствии в применяемой сыворотке специфического антитела. [36]
Если исследователь располагает известными белками ( референс-белки) и соответствующими антисыворотками, то с помощью данного метода можно идентифицировать отдельные компоненты белковой смеси неизвестного состава. [37]
Весьма характерно, что молекулы антител, содержащихся в антисыворотках, не отличаются абсолютным подобием. Они различны по силе реакции с данным гаптеном и по специфичности. Это легко показать в нашем случае, если вначале добавлять к ан-тиметаниловой сыворотке белок, к которому присоединен один из перекрестно реагирующих гаптенов, до тех пор, пока не прекратится реакция, а затем прибавить к обработанной сыворотке гомологичный или другой родственный гаптен. Для того чтобы в смеси не осталось растворимых комплексов антиген - антитело, сыворотку можно обработать гапте-нами, присоединенными к нерастворимым структурам ( строме), остающимся после лизиса эритроцитов и удаления гемоглобина. [38]
Исключительное значение имеет производство медицинских белковых препаратов: гормонов, антисывороток, анатоксинов, белков крови, кровезаменителей и иных средств, применяемых как для лечебных, так и профилактических целей. Белки играют важную роль в нормальных и патологических процессах организма: исследования их свойств ( в частности гемоглобина) позволили расшифровать молекулярные основы некоторых заболеваний, в связи с чем возник термин молекулярные болезни. Говоря о них, имеют в виду определенные изменения в структуре молекул функционально важных белков, которые являются причиной тех или иных нарушений в организме. Все расширяющееся изучение белковых веществ открывает пути глубокого познания процессов жизнедеятельности и их сознательного регулирования. По-видимому, наиболее важным и характерным свойством белков является их способность быть катализаторами, осуществлять ферментативные функции. [39]
Это означает, что величины AF для реакции антител в антисыворотке будут различными для различных антител; соединение антигена или гаптена с одними антителами будет прочнее, чем с другими. [40]
Антикомплементарная РИФ - метод, при котором препарат вначале обрабатывают немеченой специфической антисывороткой и комплементом морской свинки ( 1: 10) во влажной камере в течение 30 мин при 25 С, после чего промывают и обрабатывают антикомплементарной ( против глобулинов морской свинки) меченой сывороткой в тех же условиях и промывают солевым буферным раствором. [41]
Иммобилизованные ферменты могут быть использованы в качестве иммуносорбентов для выделения из антисыворотки специфических антител на эти ферменты. [42]
Химическое определение состава некоторых узнающих участков поверхности зндоплазматической мембраны основано на использовании антисывороток. Они позволяют обнаружить антигенные свойства молекулярных комплексов, отделенных от поверхности клетки. [43]
Специфическую иммунную сыворотку при титровании антигена или раствор известного антигена при титровании антисыворотки смешивают с расплавленным агаром и выливают на дно чашки Петри. [44]
После обычного электрофоре-тического разделения в желобок, вырезанный вдоль геля, вносят иммунную антисыворотку и предоставляют ей возможность диффундировать в поперечном направлении к фракционированным зонам белка. Применение агара в этом методе предпочтительно ввиду: 1) малой адсорбции белков, несмотря на относительно грубую структуру геля; 2) сравнительно большого свободного объема, приближающегося к объему при свободном электрофорезе, а также 3) простоты манипуляций с этим гелем. Агар, как сильно кислое вещество, при использовании в щелочных буферах вызывает значительный эн-досмотическин поток, который, пожалуй, является наибольшей помехой. Как п при использовании крахмального геля, еще мало известно о тех веществах, которые могут выщелачиваться и соединяться с белками или тем или иным путем загрязнять их. Тем не менее этот метод имеет значительную ценность в области иммунологии и клинической биохимии; в работах по изучению белков он дает дополнительные сведения о чистоте и гомогенности исследуемых препаратов. [45]