Cтраница 3
В качестве наполнителя колонок в гель-хроматографии часто используют сшитые полимеры с порами различного диаметра. Для анализа водных растворов применяют гидрофильные вещества, хорошо набухающие в воде: гели декстрана ( сефадексы, молселекты), представляющие собой трехмерную структуру, агарозные гели, полиакриламид-иые гели. Эти наполнители относятся к категории мягких, они сильно сжимаются в колонке при относительно небольших давлениях. Для органических растворов используют полужесткие наполнители: макропористые полистирольные гели, а также полиметилметакрилат, поли-винилацетатные гели ( меркогель) и др. К жестким наполнителям, которые применяются для высокоэффективной жидкостной хроматографии при высоких давлениях, относятся силикагели и макропористые стекла. [31]
В качестве наполнителя колонок в гель-хроматографии часто используют сшитые полимеры с порами различного диаметра. Для анализа водных растворов применяют гидрофильные вещества, хорошо набухающие в воде: гели декстрана ( сефадексы, молселекты), представляющие собой трехмерную структуру, агарозные гели, полиакриламид-ные гели. Эти наполнители относятся к категории мягких, они сильно сжимаются в колонке при относительно небольших давлениях. Для органических растворов используют полужесткие наполнители: макропористые полистирольные гели, а также полиметилметакрилат, поли-винилацетатные гели ( меркогель) и др. К жестким наполнителям, которые применяются для высокоэффективной жидкостной хроматографии при высоких давлениях, относятся силикагели и макропористые стекла. [32]
Для тех лабораторий, в которых ВЭЖХ используется как рутинный метод, это совершенно нежелательно. Что касается других материалов, получивших распространение в качестве неподвижных фаз, таких, как силикагель, силикагель, модифицированный аминопропильными группами, и пористый полистирольный гель, то проведенные исследования подтвердили, что эффективность и коэффициент емкости полумикроко-лонки внутренним диаметром 1 5 мм и обычной колонки для ВЭЖХ практически одинаковы. [33]
В 1953 г. Витон и Бауман [184] опубликовали подробную статью по гель-проникающей хроматографии, в которой они описали методику и часть теории этого метода. В своей работе по вытеснению ионов из адсорбента Витон и Бауман отметили, что незаряженные соединения также можно было бы разделять на ионообменниках и даже на нейтральных гелях и что для их разделения не требуется адсорбция. Такое разделение авторы тщательно изучили на полистирольных гелях и рекомендовали его для аналитического фракционирования. Однако полистирольные гели проницаемы только для довольно небольших по размеру молекул. [34]
Поэтому в проведенных ранее работах по гелевой хроматографии, когда изучалась именно эта система, влияние смены растворителя на калибровку прибора не было замечено. Необходимо учитывать, что растворитель может взаимодействовать с матрицей геля, уменьшая или полностью устраняя взаимодействие разделяемых макромолекул с гелем. С другой стороны, растворитель может образовывать ассоциаты с разделяемыми макромолекулами, что приводит к завышению его молекулярного веса. Наиболее часто в гелевой хроматографии применяют в качестве растворителя тетрагидрофуран, обладающий хорошей растворяющей способностью для многих полимеров. Этот растворитель обладает низким показателем преломления, малой вязкостью, в нем хорошо набухает полистирольный гель. Широко используется в гелевой хроматографии в качестве растворителя и 1 2 4-три-хлорбензол. [35]
Полноту осаждения контролировали, добавляя в маточник дистиллированную воду. Выпавший полимер отфильтровывали, промывали повторно метанолом и сушили в вакуумном шкафу при 25 С и 260 - 500 Па до постоянной массы. Хроматографирование проводили на колонках, - наполненных полистирольным гелем; проницаемость колонок составляла 3 - Ю3, ЫО4, 3 - Ю4 и 1 - Ю5, растворитель - тетрагидрофуран. [36]