Cтраница 1
Гемагглютинин из канавалии мечевидной ( Canavalia ensiformis), образует нерастворимые комплексы с биополимерами, содержащими множественные a - D-глюкопиранозильные ( или их 2-ацетамидо - 2-дезоксипроизводные), a - D-маннопиранозильные или р - D-фруктофуранозильные остатки в качестве невосстанавливающих концов. Может также связываться с остатками маннозы внутри молекулы. [1]
Частицы гемагглютинина, имеющие диаметр 9 нм, собраны в регулярную спираль с поперечным сечением 20 нм. Внутреннее пространство спирали имеет диаметр 9 нм. Внутри спирали помещается тяж токсического белка, токсический компонент и гемагглютинин находятся в ассоциированном состоянии. [2]
Эта реакция основана на блокировании вирусных гемагглютининов специфическими антителами. [3]
Она должна содержать в высоком титре преципитины к сывороточным глобулинам крови человека и не должна содержать гетерогенных гемагглютининов к антигенам эритроцитов. Антиглобулиновую сыворотку получают путем гипериммунизации кроликов глобулинами сыворотки человека. Для освобождения от неспецифических гемагглютининов сыворотку прогревают при 56 в течение 30 мин. [4]
Если она их гемагглютинирует в невысоких титрах, то ее можно использовать в более высоких разведениях, превышающих титр неспецифических гемагглютининов. Но если антиглобулиновая сыворотка агглютинирует эритроциты в достаточно высоких титрах, то ее предварительно подвергают адсорбции тщательно отмытыми эритроцитами ( смесью эритроцитов, содержащих антигены А, В, 0) человека. Для этого к одному объему ан-тиглобулиновой сыворотки добавляют 0 1 объема тщательно отмытых эритроцитов в виде смеси групп А, В, О, инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре и центрифугируют при 2000 об. / мин. Сыворотку отсасывают и вновь проверяют на наличие гете-рогемагглютининов. Если титр неспецифических гемагглютининов будет снова высок, то адсорбцию повторяют. После удаления из антиглобулиновой сыворотки гетерогенных гемагглютининов производят определение в ней специфических антител с помощью пробирочной реакции преципитации, в которой антигеном является сыворотка человека. [5]
Следовательно, токсин В ассоциируется с двумя видами нетоксических компонентов, а токсин типа А - с тремя. Нетоксическим компонентом в препарате токсина А является гемагглютинин, соединенный с токсической частью нековалентно, и в кислых растворах по физико-химическим показателям ведет себя как гомогенный препарат. Этот комплекс стабилен при рН 1 - 9 5, активность сохраняется длительное время, без ге-магглютинина токсин инактивируется при рН 3 5 и лабилен далее на холоде. [6]
В табл. 1 и на рис. 6 приведены результаты оценки режимов эволюции для ряда белковых семейств. Исходя из характера наклона зависимости H ( KS - определяемого значением коэффициента линейной аппроксимации BI ( можно видеть, что гены глобиновых, гистоновых и др. семейств эволюционируют в рамках режима с изменяющейся локализацией коварионов, в то же время, для генов гемагглютинина и нейраминидазы свойственен режим эволюции с постоянной локализацией коварионов. [7]
РНГА удобно ставить в планшетах для титрования, используя для разведения материала микротитратор Такачи. Исследуемые сыворотки прогревают 30 мин при 56 С для инактивации комплемента. Для адсорбции неспецифических гемагглютининов к сывороткам добавляют 50 % - ю взвесь формалинизированных или свежих отмытых эритроцитов барана из расчета 0 1 мл взвеси на 1 мл разведенной сыворотки. Смесь встряхивают и инкубируют 30 мин при 37 С или 1 ч при комнатной температуре, после чего эритроциты осаждают центрифугированием. [8]
Она должна содержать в высоком титре преципитины к сывороточным глобулинам крови человека и не должна содержать гетерогенных гемагглютининов к антигенам эритроцитов. Антиглобулиновую сыворотку получают путем гипериммунизации кроликов глобулинами сыворотки человека. Для освобождения от неспецифических гемагглютининов сыворотку прогревают при 56 в течение 30 мин. [9]
Частицы гемагглютинина, имеющие диаметр 9 нм, собраны в регулярную спираль с поперечным сечением 20 нм. Внутреннее пространство спирали имеет диаметр 9 нм. Внутри спирали помещается тяж токсического белка, токсический компонент и гемагглютинин находятся в ассоциированном состоянии. [10]
Нет никаких оснований полагать, что агглютинины к группоспецифическим веществам крови, для которых я предложил название лектины, существенно отличаются от давно известных неспецифических агглютининов. Из всех известных растительных агглютининов наиболее тщательно изучен рицин, получаемый из Ricinus communis. В общем это типичный лектин, хотя он и является токсином в такой же степени, как и гемагглютинином. В последние годы химия и иммунология рицина изучались довольно подробно. Рицин можно получить в кристаллическом виде; кристаллический белок очень токсичен и обладает резко выраженными гемагглютинирующими свойствами. [11]
Серодиагностика позволяет поставить диагноз ретроспективно, на основании увеличения титра противооспенных антител в крови больных, выявленного с помощью РТГА, РСК, РН на куриных эмбрионах и в культурах клеток. Антигенами для серологических реакций служат 10 % - е цент-рифугаты суспензии ХАО, зараженной вирусом вакцины. Результаты РН с сывороткой больного в культуре ткани учитывают по ЦПД и РГадс, а на куриных эмбрионах - по образованию оспин на ХАО и накоплению гемагглютининов в РГА. [12]
Если она их гемагглютинирует в невысоких титрах, то ее можно использовать в более высоких разведениях, превышающих титр неспецифических гемагглютининов. Но если антиглобулиновая сыворотка агглютинирует эритроциты в достаточно высоких титрах, то ее предварительно подвергают адсорбции тщательно отмытыми эритроцитами ( смесью эритроцитов, содержащих антигены А, В, 0) человека. Для этого к одному объему ан-тиглобулиновой сыворотки добавляют 0 1 объема тщательно отмытых эритроцитов в виде смеси групп А, В, О, инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре и центрифугируют при 2000 об. / мин. Сыворотку отсасывают и вновь проверяют на наличие гете-рогемагглютининов. Если титр неспецифических гемагглютининов будет снова высок, то адсорбцию повторяют. После удаления из антиглобулиновой сыворотки гетерогенных гемагглютининов производят определение в ней специфических антител с помощью пробирочной реакции преципитации, в которой антигеном является сыворотка человека. [13]
Эта реакция позволяет выявить вирусы до развития ЦПД благодаря адсорбции эритроцитов на поверхности клеток, инфицированных гемадсорбиру-ющими вирусами. Затем пробирки встряхивают для удаления неадсорбированных эритроцитов и учитывают под малым увеличением микроскопа скопление их на отдельных клетках или на всем монослое. На незараженных клетках эритроцитов не должно быть. Следует отметить, что не все вирусы, агглютинирующие эритроциты in vitro, способны вызывать гемадсорбцию в культуре клеток. Гемадсорбция наблюдается лишь в том случае, если в процессе взаимодействия вируса с клеткой вирусный гемагглютинин встраивается в структуру наружной клеточной мембраны и тем самым изменяет ее свойства. [14]
Он осуществим с вирусами, вызывающими видимые изменения на ХАО. Он осуществим с вирусами, которые вызывают гибель КЭ. Основан на учете снижения уровня гемагглютининов в результате нейтрализации вируса в опыте с сывороткой по сравнению с контролем. Он осуществим с вирусами, вырабатывающими гемагглютинины. [15]