Cтраница 2
Если она их гемагглютинирует в невысоких титрах, то ее можно использовать в более высоких разведениях, превышающих титр неспецифических гемагглютининов. Но если антиглобулиновая сыворотка агглютинирует эритроциты в достаточно высоких титрах, то ее предварительно подвергают адсорбции тщательно отмытыми эритроцитами ( смесью эритроцитов, содержащих антигены А, В, 0) человека. Для этого к одному объему ан-тиглобулиновой сыворотки добавляют 0 1 объема тщательно отмытых эритроцитов в виде смеси групп А, В, О, инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре и центрифугируют при 2000 об. / мин. Сыворотку отсасывают и вновь проверяют на наличие гете-рогемагглютининов. Если титр неспецифических гемагглютининов будет снова высок, то адсорбцию повторяют. После удаления из антиглобулиновой сыворотки гетерогенных гемагглютининов производят определение в ней специфических антител с помощью пробирочной реакции преципитации, в которой антигеном является сыворотка человека. [16]
На чистое, тщательно обезжиренное предметное стекло ( белую пластинку) наносят в опыт ( слева) и в контроль 1 ( средняя капля) по одной капле 5 % взвеси отмытых эритроцитов больного, а в контроль 2 ( правая капля) - одну каплю 5 % взвеси эритроцитов донора той же группы. Затем в опыт и в контроль 2 добавляют по одной капле антиглобулиновой сыворотки, а в контроль 1 - одну каплю физраствора. Содержимое каждой капли перемешивают отдельной стеклянной палочкой. Стекло периодически покачивают осторожными круговыми движениями и наблюдают за результатами реакции в течение 10 мин. При положительной реакции отмечается агглютинация и образование комочков эритроцитов в капле с одновременным ее просветлением. При отрицательной реакции капля остается гомогенной, мутной, непрозрачной. При положительной прямой пробе Кумбса, свидетельствующей о сенсибилизации эритроцитов больного, отмечается агглютинация испытуемых эритроцитов ( опыт) и отсутствие ее в контроле 1 ( на стабильность эритроцитов больного) и контроле 2 ( на отсутствие гетерогенных гемагглютининов в антиглобулиновой сыворотке) со стандартными эритроцитами; б) пробирочная реакция. В подсобном ряду пробирок приготовляют соответствующие разведения антиглобулиновой сыворотки. Затем в ряд чистых опытных пробирок переносят по 0 1 мл ( 2 капли) каждого разведения антиглобулиновой сыворотки и туда же добавляют по 0 05 ( 1 капля) 5 % взвеси эритроцитов больного. Пробирки встряхивают, инкубируют при 37 в течение 30 - 60 мин. После этого их центрифугируют при 1500 об. / мин и учитывают результаты по феномену гемагглютинации. [17]