Cтраница 2
Фосфолипиды представляют собой сложные эфиры многоатомных спиртов глицерина или сфингозина с высшими жирными кислотами и фосфорной кислотой. В состав фосфолипидов входят также азотсодержащие соединения: холин, этаноламин или серии. В зависимости от того, какой многоатомный спирт участвует в образовании фосфолипида ( глицерин или сфингозин), последние делят на 2 группы: глицерофосфолипиды и сфинго-фосфолипиды. Необходимо отметить, что в глицерофосфолипидах либо холин, либо этаноламин или серии соединены эфирной связью с остатком фосфорной кислоты; в составе сфинголипидов обнаружен только холин. Наиболее распространенными в тканях животных являются глицерофосфолипиды. [16]
Наряду с глицеридами большой класс липидов в организме животных и человека представлен фосфолипидами. Наиболее важной группой фосфолипидов являются глицерофосфолипиды, содержащиеся главным образом в тканях и в крови и в значительно меньшей степени в жире. Они входят в структуру клеточных мембран и участвуют в транспорте жира в организме. Образуются глицерофосфолипиды из фосфоглицерина ( а-глицерофосфата) путем этерификации двумя молекулами жирных кислот и присоединения к фосфорному радикалу азотсодержащего спирта, обычно холина, зтаноламина или серина. [17]
Из всех липидов Глицерофосфолипиды обладают наиболее выраженными полярными свойствами. При помещении глицерофосфолипидов в воду в истинный раствор переходит лишь небольшая их часть, основная же масса липидов находится в виде мицелл. Существует несколько групп ( подклассов) глицерофосфолипидов. В зависимости от характера азотистого основания, присоединенного к фосфорной кислоте, Глицерофосфолипиды подразделяют на фосфатидилхолины ( лецитины), фосфатидилэта-ноламины ( кефалины) и фосфатидилсерины. В состав некоторых глицерофосфолипидов вместо азотсодержащих соединений входит не содержащий азота шестиуглеродный циклический спирт инозит, называемый также инозитолом. Эти липиды называются фосфатидилинозитолами. [18]
Селезенки овец ( 4 кг) гомогенизируют с 4 л физиологического солевого раствора и смесь центрифугируют. К осадку прибавляют 10 л ацетона и перемешивают примерно 12 ч, после чего центрифугируют. Все эти операции проводят при 4 С. Тяжелый осадок удаляют центрифугированием. Глицерофосфолипиды омыляют, встряхивая супернатант - 12 ч с 1 л 1 М раствора едкого натра. Полученную эмульсию центрифугируют и верхний слой отделяют сифонированием. Нижний слой упаривают досуха и снова растворяют в 1 л хлороформа. Элюирование проводят следующими смесями растворителей по 5 л каждой смеси): хлороформ, хлороформ - метанол с соотношением компонентов ( по объему) 9: 1, 3: 1 и 1: 1 и метанол. Фракции, содержащие Омз, упаривают досуха, снова обрабатывают в 100 мл смеси хлороформ - метанол ( 2: 1 по объему) и тяжелый осадок, дающий положительную реакцию с нингидрином, отделяют центрифугированием. Супернатант упаривают, остаток растворяют в 50 мл смеси хлороформ - метанол ( 2: 1 по объему) и нерастворимую примесь отделяют центрифугированием. Большую часть продуктов, дающих положительную реакцию с нингидрином, необходимо удалить до хроматографирования смеси на силикагеле, так как они мешают хрома-тографическому разделению ганглиозидов. [19]
Фосфолипиды представляют собой сложные эфиры многоатомных спиртов глицерина или сфингозина с высшими жирными кислотами и фосфорной кислотой. В состав фосфолипидов входят также азотсодержащие соединения: холин, этаноламин или серии. В зависимости от того, какой многоатомный спирт участвует в образовании фосфолипида ( глицерин или сфингозин), последние делят на 2 группы: глицерофосфолипиды и сфинго-фосфолипиды. Необходимо отметить, что в глицерофосфолипидах либо холин, либо этаноламин или серии соединены эфирной связью с остатком фосфорной кислоты; в составе сфинголипидов обнаружен только холин. Наиболее распространенными в тканях животных являются глицерофосфолипиды. [20]