Cтраница 2
Через 10 мин смесь заменяют тем же объемом 66 % - ного этанола комнатной температуры и эту процедуру повторяют 3 раза в течение часа. Затем каждый квадратик бумаги помещают на 5 мин в ацетон, сушат кюд лампой в течение 10 мин, измельчают ножницами и помещают в пробирку, в которую приливают 0 9 мл 0 1 М ацетатного буфера ( рН 4 8) и 0 1 мл раствора глюкоами-лазы. Пробы перемешивают и инкубируют в течение 3 ч при 30 С. В качестве контроля используют пробу, содержащую измельченный квадратик чистой фильтровальной бумаги такого же размера. По окончании инкубации к каждой пробе приливают по 3 мл рабочего реактива для определения образовавшейся глюкозы глюкозооксидазным методом. [16]
Для этого стеклянной палочкой из колбы достают каплю жидкости с твердыми частицами, переносят пробу на фарфоровую пластинку и приливают несколько капель раствора йода в йодистом калии. Для приготовления этого раствора в 100 мл воды растворяют 4 г йодистого калия и 2 г йода. Если при действии раствора йода на пробу синего окрашивания не получается, то это показывает, что крахмала нет. По окончании гидролиза колбу доводят водой до метки, тщательно перемешивают содержимое и фильтруют через сухой фильтр в сухой стакан или колбу. В результате расщепления крахмала в раствор переходят декстрины и мальтоза. Для определения их содержания обычно пользуются кислотным гидролизом, после чего учитывают количество образовавшейся глюкозы методом Бертрана. [17]