Cтраница 2
Метод основан на том, что гомогенаты тканей в присутствии 1 4-фенилендиамина восстанавливают цитохром с, который в свою очередь восстанавливает хлорид тетразолия до интенсивно окрашенного формазана, В аналитической химии в качестве реактива на иридий и нитрит. [16]
Исследованию могут быть подвергнуты кровь, гомогенаты тканей или иные биосубстраты. Кровь для предотвращения свертывания смешивают с каким-либо антикоагулянтом. [17]
Для изучения некоторых свойств ферментов можно использовать гомогенаты и экстракты тканей. Однако различные соединения и многочисленные, другие ферменты, присутствующие в тканевых препаратах, могут существенно искажать наблюдаемую картину. Поэтому точное исследование каталитических и других свойств ферментов возможно лишь после их получения в очищенном виде. [18]
Описанная методика не годится для анализа экстрактов тканевых гомогенатов из-за мешающего влияния растительных пигментов и других веществ. Ее рекомендуется использовать для анализа дирена в почвах и при определении остатков дирена на поверхности фруктов и листвы. В последнем случае следует принять соответствующие меры предосторожности, чтобы не повредить поверхность растения, поскольку при этом в раствор переходят мешающие вещества, а также соединения, способные вступать с диреном в химическое взаимодействие. [19]
Физалемин быстрее инактивируется в крови или при действии гомогенатов почки и печени. У цыплят этот гормон вызывает повышение кровяного давления. [20]
Янг и Штумпф [41] показали, что надоса-дочная фракция гомогенатов мезокарпия плодов авокадо, остающаяся после удаления митохондрий и микросом, даже в присутствии АТФ, С02 и Мп2 не способна включать ацетил - КоА в жирные кислоты с длинной цепью. Соединениями, в синтезе которых используется малонил - КоА, являются пальмитиновая и стеариновая кислоты. Термолабильный компонент, по-видимому, содержит фермент, осуществляющий начальную конденсацию малонил - КоА, две восстанавливающие системы и фермент, катализирующий реакцию гидратации, необходимую для образования насыщенной углеводородной цепи. Этот белок имеет молекулярный вес 9500, содержит одну SH-группу и выполняет функцию переносчика ацильной группы на всех стадиях синтеза жирных кислот. Вагелос [25] называет его сокращенно АПБ - ацилперено-сящий белок. Работы последних лет, проведенные в лабораторий Штумпфа, показали, что в препаратах синтетаз жирных кислот, полученных из мезокарпия плодов авокадо, из семян подсолнечника и клещевины, а также из хлоропластов шпината и латука, АПБ служит незаменимым компонентом полной системы. [21]
Обычно некоторое количество вещества v не удается извлечь из гомогенатов. Нужно сначала решить, какова величина допустимых потерь и уже после этого выбирать метод экстрагирования. [22]
Как видно из рис. 1, в надосадочной жидкости гомогенатов листьев чая содержится полный набор катехинов: ( -) - эпигалло-катехин, () - галлокатехин, ( -) - эпика техин, ( -) - эпигаллокате-хиягаллат и () - катехин ( смешанное пятно) и ( - эпикатехингаллат. В первых промывных водах ( /), наряду со значительным уменьшением общего количества катехинов, отсутствует () - гал-локатехин, во вторых промывных водах ( / /) почти исчезают ( -) - эпикатехин и ( -) - эпикатехингаллат, а в третьих промывных водах ( / / /) были обнаружены лищь следы ( -) - эпигаллокатехин-галлата. [23]
На рис. 10.10 приведены результаты выделения химотрипсина и трипсина из гомогенатов поджелудочной железы мыши на различных препаратах сефарозы с присоединенным соевым ингибитором трипсина. Если допустить, что различия в условиях элюирования отражают различия в биологической активности, картина элюирования может использоваться для характеристики молекулы. Применимость сорбента, таким образом, зависит от функциональной гомогенности иммобилизованного аффинного лиганда. [24]
Уже в течение длительного времени известна способность различных биологических растворов и тканевых гомогенатов вызывать инактивацию окситоцина ( ср. Верле и Семи [2467] показали, что этилендиаминтетраук-сусная кислота и 8-оксихинолин являются сильными ингибиторами сырых образцов окситоциназы в плазме; подавление прекращается при добавлении двухвалентных ионов марганца, кобальта и цинка. [25]
Современные методы измельчения тканей обычно сочетают с одновременной экстракцией белков из гомогенатов тканей. Большинство белков тканей хорошо растворимо в 8 - 10 % растворах солей. При экстракции белков широко применяют различные буферные смеси с определенными значениями рН среды, органические растворители, а также неионные детергенты - вещества, разрушающие гидрофобные взаимодействия между белками и липидами и между белковыми молекулами. [26]
Водные экстракты животных и растительных организмов, соки, извлеченные прессованием, гомогенаты и жидкости организма содержат в большинстве случаев наряду со свободными аминокислотами растворенные в воде или эмульгированные пептиды, белки, углеводы, мочевину, соли и липоиды. [27]
По сравнению со срезами печени мыши, которые разрушали ацетион чрезвычайно быстро, гомогенаты мух показали лишь небольшую активность в этом отношении. Хроматогра-фическое разделение ацетиона и продуктов его метаболизма показало, что основным метаболитом является аце-тион-кислота. [28]
Работа с биологическим материалом ( кровь, моча, слюна, желудочный сок, гомогенаты тканей) должна выполняться в медицинских перчатках. [29]
Были также исследованы превращения ( дезйодирование, окислительное дозамиыирование, декарбоксилирование) под действием гомогенатов ткани и ферментных препаратов. [30]