Свободная фосфатная группа

Cтраница 2

В любой момент одна определенная часть ДНК в ядре слабо связана с белками. Она имеет много свободных фосфатных групп и функционально активна. Это лабильная ДНК, она является компонентом диспергированного хроматина или эухроматина. [16]

Ход работы сводится к следующему. Сначала определяют количество свободных фосфатных групп РНК. Для этого берут две параллельные партии срезов, одну из них окрашивают пиронлном Ж после обработки РНК-азой, другую - без обработки РНК-азой. Разность в интенсивности пиронинофилии в этих препаратах показывает количество свободных фосфатных групп РНК. [17]

В этом отношении наиболее интересен метиловый зеленый. Этот краситель связывается с ДНК преимущественно за счет свободных фосфатных групп, а также групп, блокированных слабо основными белками. Деблокирование фосфатных групп ДНК тем или иным способом, как правило, резко усиливает адсорбцию метилового зеленого. Это дает возможность использовать его для оценки характера связи ДНК с белками хроматина. [18]

Влияние деблокирования нуклеиновых кислот на спектр люминесценции клеточных ядер из основания стебля 10-дневного проростка гороха ( фиксация по Беккеру. [19]

РНК-азой, резко падает пик 600 ммк ( рис. 23, в) за счет удаления РНК. Небольшой пик в этой области свидетельствует о наличии свободных фосфатных групп У ДНК - В этих препаратах резко выражен пик 530 ммк, что свидетельствует о преобладании нативной ДНК. Возможно, что обработка уксусным ангидридом и РНК-азой сопровождается потерей части лабильной ДНК. Аналогичная картина наблюдается при обработке липидорастворителями. [20]

Как видно из данных, приведенных в табл. 3, максимальный прирост пиронинофилии наблюдается в клетках кончика корня при 10-минутном, а в алейроновом слое - при 40-минутном гидролизе. Следовательно, РНК в клетках кончика корня слабее связана и имеет больше свободных фосфатных групп, чем в клетках алейронового слоя. [21]

При действии кинетика, гиббереллина и стимулирующих доз 2 4 - Д в это время происходит уменьшение количества РНК до исходного. Высокие дозы кинетика и гиббереллина вызывают уменьшение количества РНК и особенно ее свободных фосфатных групп в цитоплазме. При этом ядрышки остаются крупными, с хорошо выраженной пиронинофилией, что свидетельствует о наличии в них большого количества рибосо-мальной РНК. Особенно хорошо сохраняются ядрышки в тканях надземных органов при воздействии высоких доз гиббереллина. Высокие дозы гербицида на втором этапе действия вызывают резкое уменьшение содержания РНК и ее свободных фосфатных групп не только в цитоплазме, но и в ядрышке. [22]

Некоторое увеличение количества РНК в первый период после обработки гиббереллином, как и под влиянием кинетика, сопровождается приростом свободных фосфатных групп и уменьшением количества связанных с белком фосфатных групп РНК-В дальнейшем при применении стимулирующих доз соотношение свободных и связанных фосфатных групп РНК восставав ливается. При высоких дозах наблюдается уменьшение количества РНК за счет ее лабильной фракции, богатой свободными фосфатными группами. [23]

Определение состояния РНК в клетке по люминесценции с АО основано на способности этого флуорохрома связываться только со свободными фосфатными группами НК. После обработки липидорастворителями характерное для комплекса РНК-АО красное свечение усиливается. [24]

Дальнейшие исследования показали, что кинетин влияет не только на синтез, о и на физико-химическое состояние РНК в клетке. Под влиянием кинетика заметно увеличивается количество свободных и уменьшается количество связанных белками фосфатных групп РНК. Увеличение количества свободных фосфатных групп наблюдается обычно в первые часы действия кине-тина. [25]

Свойства высокомолекулярных РНК из дрожжей [ 336), Escherichia coli [337, 338] и микросом печени теленка 1339 ] в растворе весьма близки к свойствам РНК из ВТМ. То, что ультрафиолетовое поглощение и оптическое вращение дрожжевой РНК изменяются при изменении ионной силы или при добавлении мочевины 1336 ], показывает, что в ее структуру входят спирализованные фрагменты, связанные водородными связями. Это указывает на то, что РНК обладает гибкой структурой, которая может сильно растягиваться в растворах с низкой ионной силой вследствие электростатического отталкивания между свободными фосфатными группами. Как и в случае денатурированной ДНК, ионы магния понижают вязкость растворов РНК гораздо более эффективно, чем ионы натрия. [26]

Молекула ИУК, являющаяся донором электрона, образует лабильный комплекс с гипотетическим рибонуклеопротеидом-переносчиком поверхностной мембраны. Образование такого комплекса приводит к увеличению количества фосфатных групп, освобождающихся от связи с белком. Активированный таким образом переносчик связывает кальций пектатов клеточных стенок свободными фосфатными группами и транспортирует его на внутреннюю сторону мембран. Эта реакция идет с использованием энергии АТФ, в результате чего усиливается окислительное фосфорилирование и дыхание. В реакции переноса кальция принимают участие сократительные белки, содержащие сульфгидрильные группы. Изменяется также поглощение и выделение ряда катионов и анионов, в частности, увеличивается поглощение калия. В результате удаления части кальция клеточная стенка становится более пластичной, вследствие чего возрастают сосущая сила и поступление воды в вакуоль. Начинается растяжение клеточной оболочки. Переносчик под действием РНК-азы распадается на внутренней стороне мембраны и затем ресинтезируется для переноса новых ионов кальция. Растяжение клеточной стенки индуцирует системы синтеза пектинов, целлюлозы и других компонентов оболочки. Эти процессы также сопровождаются затратой энергии и усилением интенсивности дыхания. Растяжение и увеличение гидратации цитоплазмы приводит к уменьшению ее вязкости и активизации гидролитических ферментов. Вслед за поглощением воды в вакуоль поступают осмотически активные вещества, поддерживающие сосущую силу клетки. [28]

Страницы: 1 2