Cтраница 3
Исходными веществами для синтеза треонинсодержащих пептидов служили карбобензокси-ь-треонин [84, 1535, 1903, 2638], гидразид карбобензокси-ь-треонина [583, 1814, 1972], а также метиловый [1972, 2386] и этиловый [1746] эфиры L-треонина. Бергель и Уэйд [176] из продуктов карбобензоксилирования DL-треонина в растворе едкого натра ( рН 8 - 10 5) выделили 5-метил - 2-кето-оксазолидин - 4-карбоновую кислоту. Это же соединение образуется при обработке карбобензокси - или / г-нитрокарбобензо-кси-пь - треонина 2 молями щелочи при комнатной температуре. Свободные сложные эфиры треонина представляют собой кристаллические вещества. Этерификация L-треонина бензиловым спиртом по методу Миллера и Вельша [1561] заканчивается лишь через 15 час; если реакцию прервать раньше, то в качестве примеси выделяют п-толуолсульфонат L-треонина. Интересно, что даже в таких жестких условиях рацемизация не происходит. [31]
Исходными веществами для синтеза треонинсодержащих пептидов служили карбобензокси-ь-треонин [84, 1535, 1903, 2638], гидразид карбобензокси - L-треонина [583, 1814, 1972], а также метиловый [1972, 2386] и этиловый [1746] эфиры ь-трео-нина. Бергель и Уэйд [176] из продуктов карбобензоксилирования DL-треонина в растворе едкого натра ( рН 8 - 10 5) выделили 5-метил - 2-кето-оксазолидин - 4-карбоновую кислоту. Это же соединение образуется при обработке карбобензокси - или л-нитрокарбобензо-кси-оь - треонина 2 молями щелочи при комнатной температуре. Свободные сложные эфиры треонина представляют собой кристаллические вещества. Этерификация L-треонина бензиловым спиртом по методу Миллера и Вельша [1561] заканчивается лишь через 15 час; если реакцию прервать раньше, то в качестве примеси выделяют п-толуолсульфонат L-треонина. Интересно, что даже в таких жестких условиях рацемизация не происходит. Фталил-ь-треонин синтезируют непосредственным взаимодействием фталевого ангидрида с суспензией L-треонина в диок-сане. Исходя из этого соединения, карбодиимидным методом получен ряд простых защищенных пептидов [2064], причем из реакционной смеси выделена также фталил - треонил - М, N - дициклогексилмочевина, образовавшаяся в качестве побочного продукта реакции. [32]
Исходными веществами для синтеза треонинсодержащих пептидов служили карбобензокси-ь-треонин [84, 1535, 1903, 2638], гидразид карбобензокси-ь-треонина [583, 1814, 1972], а также метиловый [1972, 2386] и этиловый [1746] эфиры L-треонина. Бергель и Уэйд [176] из продуктов карбобензоксилирования DL-треонина в растворе едкого натра ( рН 8 - 10 5) выделили 5-метил - 2-кето-оксазолидин - 4-карбоновую кислоту. Это же соединение образуется при обработке карбобензокси - или / г-нитрокарбобензо-кси-пь - треонина 2 молями щелочи при комнатной температуре. Свободные сложные эфиры треонина представляют собой кристаллические вещества. Этерификация L-треонина бензиловым спиртом по методу Миллера и Вельша [1561] заканчивается лишь через 15 час; если реакцию прервать раньше, то в качестве примеси выделяют п-толуолсульфонат L-треонина. Интересно, что даже в таких жестких условиях рацемизация не происходит. Фталил-L - TpeoHHH синтезируют непосредственным взаимодействием фталевого ангидрида с суспензией L-треонина в диок-сане. Исходя из этого соединения, карбодиимидным методом получен ряд простых защищенных пептидов [2064], причем из реакционной смеси выделена также фталил - треонил - М, N - дициклогексилмочевина, образовавшаяся в качестве побочного продукта реакции. [33]
Получить ауксотрофные мутанты, способные накапливать конечные продукты неразветвленных цепей биосинтеза, например L-аргинин, невозможно. В таких случаях приходится отбирать мутанты с частично нарушенной регуляцией биосинтеза, что позволяет получить повышенный выход конечного продукта. Такие мутанты известны под названием регуляторных; их отбирают по устойчивости к аналогам аминокислот или же средин ревертантов ауксотрофов. В основе использования аналогов-аминокислот лежит их сходство с природными аминокислотами. Они ингибируют рост бактерий, но этот эффект может быть уменьшен путем добавления соответствующей природной аминокислоты. Таким образом, аналоги выступают в роли искусственных, работающих по принципу обратной связи, ингибиторов-ферментов, обеспечивающих биосинтез природных аминокислот. Появление мутантов, устойчивых к этим ложным ингибиторам, означает, что регуляторные ферменты соответствующего пут № обмена становятся у них нечувствительными к аналогу. Так, серусодержащий аналог лизина 5 - ( 2-аминоэтил) - Ь - цистеин является у Brevibacterium flauum ложным, действующим по принципу обратной связи ингибитором аспартокиназы. Устойчивые к его действию мутанты вырабатывают фермент, который в 150 раз менее чувствителен к ингибированию по механизму обратной связи, чем фермент исходного штамма, и в результате продуцируют до 33 г / л лизина. Так, у Corynebacterium gtutamicum и Brevibac-teriutn flavum сверхпродукции L-треонина не наблюдается, поскольку происходит сочетанное ингибирование по механизму обратной связи аспартокиназы и L-треонином, и L-лизином. L-треонин ингибирует и гомосериндегидрогеназу. Мутант, устойчивый к аналогу треонина, а-амино-р-оксивалериановой кислоте, синтезирует в избыточном количестве треонин, так как: ферменты его, ингибированные этой аминокислотой, десенсибилизированы. Принимающие участие в синтезе треонина гомо-сериндегидрогеназа и киназа также выключаются L-метиони-ном, и поэтому ауксотрофы по метионину образуют L-треонив-с еще большим выходом. [34]
Получить ауксотрофные мутанты, способные накапливать конечные продукты неразветвленных цепей биосинтеза, например L-аргинин, невозможно. В таких случаях приходится отбирать мутанты с частично нарушенной регуляцией биосинтеза, что позволяет получить повышенный выход конечного продукта. Такие мутанты известны под названием регуляторных; их отбирают по устойчивости к аналогам аминокислот или же средин ревертантов ауксотрофов. В основе использования аналогов-аминокислот лежит их сходство с природными аминокислотами. Они ингибируют рост бактерий, но этот эффект может быть уменьшен путем добавления соответствующей природной аминокислоты. Таким образом, аналоги выступают в роли искусственных, работающих по принципу обратной связи, ингибиторов-ферментов, обеспечивающих биосинтез природных аминокислот. Появление мутантов, устойчивых к этим ложным ингибиторам, означает, что регуляторные ферменты соответствующего пут № обмена становятся у них нечувствительными к аналогу. Так, серусодержащий аналог лизина 5 - ( 2-аминоэтил) - Ь - цистеин является у Brevibacterium flauum ложным, действующим по принципу обратной связи ингибитором аспартокиназы. Устойчивые к его действию мутанты вырабатывают фермент, который в 150 раз менее чувствителен к ингибированию по механизму обратной связи, чем фермент исходного штамма, и в результате продуцируют до 33 г / л лизина. Так, у Corynebacterium gtutamicum и Brevibac-teriutn flavum сверхпродукции L-треонина не наблюдается, поскольку происходит сочетанное ингибирование по механизму обратной связи аспартокиназы и L-треонином, и L-лизином. L-треонин ингибирует и гомосериндегидрогеназу. Мутант, устойчивый к аналогу треонина, а-амино-р-оксивалериановой кислоте, синтезирует в избыточном количестве треонин, так как: ферменты его, ингибированные этой аминокислотой, десенсибилизированы. Принимающие участие в синтезе треонина гомо-сериндегидрогеназа и киназа также выключаются L-метиони-ном, и поэтому ауксотрофы по метионину образуют L-треонив-с еще большим выходом. [35]
Получить ауксотрофные мутанты, способные накапливать конечные продукты неразветвленных цепей биосинтеза, например L-аргинин, невозможно. В таких случаях приходится отбирать мутанты с частично нарушенной регуляцией биосинтеза, что позволяет получить повышенный выход конечного продукта. Такие мутанты известны под названием регуляторных; их отбирают по устойчивости к аналогам аминокислот или же средин ревертантов ауксотрофов. В основе использования аналогов-аминокислот лежит их сходство с природными аминокислотами. Они ингибируют рост бактерий, но этот эффект может быть уменьшен путем добавления соответствующей природной аминокислоты. Таким образом, аналоги выступают в роли искусственных, работающих по принципу обратной связи, ингибиторов-ферментов, обеспечивающих биосинтез природных аминокислот. Появление мутантов, устойчивых к этим ложным ингибиторам, означает, что регуляторные ферменты соответствующего пут № обмена становятся у них нечувствительными к аналогу. Так, серусодержащий аналог лизина 5 - ( 2-аминоэтил) - Ь - цистеин является у Brevibacterium flauum ложным, действующим по принципу обратной связи ингибитором аспартокиназы. Устойчивые к его действию мутанты вырабатывают фермент, который в 150 раз менее чувствителен к ингибированию по механизму обратной связи, чем фермент исходного штамма, и в результате продуцируют до 33 г / л лизина. Так, у Corynebacterium gtutamicum и Brevibac-teriutn flavum сверхпродукции L-треонина не наблюдается, поскольку происходит сочетанное ингибирование по механизму обратной связи аспартокиназы и L-треонином, и L-лизином. L-треонин ингибирует и гомосериндегидрогеназу. Мутант, устойчивый к аналогу треонина, а-амино-р-оксивалериановой кислоте, синтезирует в избыточном количестве треонин, так как: ферменты его, ингибированные этой аминокислотой, десенсибилизированы. Принимающие участие в синтезе треонина гомо-сериндегидрогеназа и киназа также выключаются L-метиони-ном, и поэтому ауксотрофы по метионину образуют L-треонив-с еще большим выходом. [36]