Дезоксирибонуклеаза

Cтраница 2

Неспецифические реакции обнаруживают в параллельных препаратах: 1) без предварительного гидролиза в НС1; 2) после удаления ДНК дезоксирибонуклеазой, НС1О4 или ТХУ. [16]

При наркотическом сне обмен веществ в головном мозгу не приостанавливается, а идет в определенном направлении: активность некоторых ферментов ( дезоксирибонуклеаза) повышается, содержание нуклеиновых кислот существенно не меняется и наряду с этим отмечается повышение содержания аденозинтрифосфорной кислоты с одновременным уменьшением утилизации углеводов. Процессы эти в основном направлены на восстановление работоспособности мозга. Эти данные А.В. Палладина можно рассматривать как первую серьезную попытку осветить сон как охранительное торможение с биохимической точки зрения. В противоположность этому при длительном возбуждении, доходящем до судорог, наблюдается уменьшение содержания аденозинтрифосфорной кислоты в ткани головного мозга. [17]

Трансформирующая активность приписывается именно ДНК, поскольку по мере очистки ДНК эффект не исчезает и на него не влияет обработка препарата протеолитическими ферментами, тогда как обработка дезоксирибонуклеазой - ферментом, гид-ролизующим ДНК-приводит к исчезновению эффекта. [19]

Реактивы и оборудование: 1) экстрагент - 0 05 - 0 08 М ацетатный буфер, рН 6 2 - 0 001 М MgCl2 - 0 5 % - ный ДДС - бентонит 5 мг в 1 мл, 2) 5 % - ный раствор ДДС, 3) дезоксирибонуклеаза, 4) 96 % - ный и 75 % - ньш этанол, 5) 90 % - ный фенол, 6) яоливинилсульфат натрия или калия, 7) ступки фарфоровые, 8) кварцевый песок, 9) центрифуга с охлаждением. [20]

Оптимальное действие фермента при рН 6 0 - 7 0, изоэлектри-чсская точка при рН 4 7 - 5 0; активаторы - Мо2, Мп2, Со3, ингибиторы - Си2, бораты, ареенаты. Дезоксирибонуклеаза термолабильна и денатурируется при нагреваний выше 55 С. [21]

ДНК расщепляется до нуклеотидов под действием д е з о к-сирибонуклеазы, которая является высокоспецифичным ферментом, на РНК и рибополинуклеотиды она не действует. Растительная дезоксирибонуклеаза обладает особенно высокой активностью в период прорастания семян. ДНК может расщепляться до дезоксирибонуклеозидтрифосфатов также под действием ДНК-нуклеотидилтрансферазы. [22]

Очищенный трансформирующий агент содержал лишь небольшое количество белков. Протеолитические ферменты его не инактивировали, а дезоксирибонуклеаза - инактивировала. [23]

Как видно из таблицы, активность ферментов в печени при содержании их на различной диете зависела от состава в корме аминокислот и срока исследования. Четче всего реагировала на состав аминокислот в корме карбоксилэстераза, кислая дезоксирибонуклеаза, а также катепсин, стимуляция активности которых наблюдалась во всех группах подопытных крыс. [24]

Точно такой же эффект был обнаружен при предварительной обработке затравки дезоксирибонуклеазой. [25]

Полидезоксирибогуаниловая и полирибоцитидиловая кислоты образуют гибридную двухцепочечную спираль, температура плавления которой на 18 выше температуры плавления аналогичной спирали, содержащей лишь дезоксирибозу. Такая гибридная двойная спираль не расщепляется ни рибонуклеазой, ни дезоксирибонуклеазой. Поскольку гибридная двойная - спираль обладает большей устойчивостью, чем структура, состоящая только из дезоксикомпонент, эффективность связывания цепочки РНК с цепочкой ДНК должна быть выше эффективности связывания комплементарных цепей ДНК друг с другом. Это предположение подтверждается образованием стабильных гибридных комплексов при нагревании и последующем медленном охлаждении смесей ДНК и РНК, полученных из одних и тех же видов бактерий. Если ДНК и РНК взяты из бактерий разных видов, эффект выражен менее ясно. [26]

Гормоны и ферменты экстрагируют слабоподкисленными растворами, что предотвращает или заметно затормаживает авто-литические процессы. Следует отметить, что при рН 1 5 - 2 0 устойчивы дезоксирибонуклеаза, рибонуклеаза, химотрипсин и трипсин. [27]

R - и S-формыможно различить даже невооруженным глазом. колонии S-бак терий блестящие, с гладким краем ( слева, колонии Р, клеток матовые, с шероховатым краем ( справа. [28]

Несколько позднее было выяснено, что трансформация может происходить и вне организма-хозяина, в пробирке ( 1931 г.), более того - в бесклеточном экстракте ( 1933 г.), но только в 1944 г. было впервые достоверно установлено, что трансформирующим фактором служит именно ДНК. Было показано, что единственным ферментом, останавливающим процесс трансформации, является дезоксирибонуклеаза ( ДНК-аза) - фермент, расщепляющий ДНК. [29]

Например, в экспериментах по футпринтингу комплексов ДНК с белками часто используют панкреатическую дезоксирибонуклеазу ( ДНКаза I), которая выделяется в пищеварительный тракт млекопитающих поджелудочной железой. Этот фермент катализирует гидролиз внутренних фосфодиэфирных связей в двунитевых и однонитевых ДНК. При кратковременной обработке ДНК этим ферментом, проведенной так, чтобы в среднем на каждую молекулу ДИК пришелся один разрыв, расщепление приводит к образованию фрагментов самой разнообразной длины, легко регистрируемых с помощью гель-электрофореза. При такой же обработке комплекса ДНК с белком расщепления в участках, экранированных белковой молекулой, не происходит и фрагменты соответствующей длины на электрофореграмме не обнаруживаются. Отчетливо виден участок длиной около 40 нуклеотидов, закрываемый РНК-полимеразой от ДПКазы I. [30]

Страницы: 1 2 3 4