Cтраница 2
Мы повторили опыты Вэнтинга и Штехе с очищенным препаратом каталазы, полученным из печени свиньи, и могли подтвердить их результат относительно уменьшения действия каталазы под влиянием трипсина. Если поэтому различные экстракты, содержащие каталазу, обнаруживают неодинаковую чувствительность к повышению температуры, то это происходит, вероятно, отчасти оттого, что они содержат неодинаковые количества протеазы. Так как действие протеазы постепенно возрастает с увеличением температуры до 47, то легко попять, что чем больше препарат каталазы содержит протеазы, тем чувствительнее он будет к повышению температуры. [16]
При контакте с О2 у пропионовых бактерий образуются супероксидные радикалы, превращающиеся благодаря СОД в пероксид водорода, а этот последний разлагается под действием каталазы и пероксидазы. [17]
Так как оксигеназа поглощает кислород сравнительно медленно и только в тех случаях, когда может передать его окисляемому веществу, то мы не имели в этом случае благоприятных условий для непосредственного наблюдения возможного выделения кислорода под действием каталазы. Поэтому мы поставили сравнительные опыты со смесями оксигеназы и перо-ксидазы в присутствии и в отсутствии каталазы и определяли в каждом случае поглощенный кислород. [18]
Так как действие каталазы, пероксидазы, оксигеиазы и амилазы может наблюдаться количественно, то это дает возможность производить непосредственное сравнение одновременной деятельности этих ферментов. [19]
Небольшие количества каталазы могут разложить сравнительно большие количества перекиси водорода. Тем по менее действие каталазы не безгранично, так как, смотря по условиям концентрации, оно более или менее быстро исчерпывается. При большом избытке перекиси водорода каталаза разрушается раньше, чем вся имеющаяся перекись подверглась разложению. [20]
Таким образом, уменьшение действия каталазы зависит только от повышения температуры и не зависит от того, подвергается ли раствор нагреванию сам по себе или в присутствии перекиси водорода. Относительно влияния высоких температур на ката-лазу в литературе встречаются противоречивые данные. [21]
Для предполагаемых опытов по распределению перекиси водорода между пероксидазой и каталазой было совершенно необходимо иметь точное представление о поведении данного препарата каталазы по отношению к перекиси. В первую очередь нужно было рассмотреть зависимость действия каталазы от концентрации фермента и субстрата. [22]
Восстановленные флавиннуклеотиды оксидаз L - и D-аминокислот могут непосредственно окисляться молекулярным кислородом. При этом образуется перекись водорода, которая подвергается расщеплению под действием каталазы на воду и кислород. [23]
Что при разбавлении крови дестиллированной водой в раствор переходят все ферменты форменных элементов, в том числе, и протеаза - не подлежит никакому сомнению. Чем выше температура, при которой производится опыт, тем быстрее протекает действие протеазы, тем меньше обнаруживается действие каталазы. Так как, с другой стороны, скорость, с которой протекает реакция каталазы, как и других ферментов, возрастает с увеличением температуры, то при определении каталазы в растворе крови определяется, собственно говоря, только та часть каталазы, которая не разрушена протеазой; определяется равнодействующая двух реакций: разложения перекиси водорода каталазой и разложения каталазы протеазой. Величина этой равнодействующей зависит от относительных количеств того и другого фермента и от температурного коэффициента обеих реакций. [24]
Чем ниже величина А, тем совершеннее проходит процесс; если сравнить величины энергии активации для реакций, текущей спонтанно, ускоряемой неорганическим катализатором, и ферментной, то наглядно видна высокая эффективность биокатализа. Так, энергия активации расщепления Н2О2 в воде составляет 18 000 кал / моль, в присутствии губчатой платины - 11 700, а при действии каталазы печени - 5 500кал / моль. [25]
Они установили, что в коже кроликов и крыс активность фермента сравнительно невысокая, в ткани легких этих же животных она в 5 - 7 раз выше. Авторы обоснованно полагают, что вещества, подверженные действию каталазы, сохраняют большую активность при контакте с кожей, а не с тканью легких. [26]
Наблюдается заметное выделение кислорода. При повторении опыта после нагревания ткани с водой до кипения действие каталазы обнаружить не удается. [27]
Указанные взаимоотношения каталазы и протеазы естественно приводят к мысли измерять действие последней уменьшением активности первой. Эта мысль была уже высказана Вэнтингом и Штехе, которые впервые исследовали влияние протеазы на каталазу. Однако до сих пор эту мысль не удалось подтвердить, вероятно, из-за трудностей иметь постоянные растворы каталазы для определения протеазы. Но это неудобство совершенно отпадает при определении протеазы в растворе крови. Остается только определить уменьшение действия каталазы, вызванное влиянием протеазы при повышенной температуре, чтобы получить числовое выражение действия протеазы. [28]
Фермент каталаза также оказывает пероксидатическое действие, хотя исключительная его способность к действию в качестве катализатора разложения в течение длительного времени маскировала указанное свойство и отвлекала от него внимание, Это пероксидатическое действие легко понять в свете реакций ( 46) и ( 47), однако имеются значительные различия в отношении пероксидатического действия между каталазой и пероксидазой. При исследовании этого действия каталазы [373] сделано наблюдение, что оно требует непрерывного поступления перекиси водорода, например получаемой под действием дегидразы. Имеются также различия в отношении специфичности субстратов. Каталаза действует пероксидатически на первичные и вторичные спирты и на нитрит. Скорость такой реакции зависит [391] от длины цепи спирта. С другой стороны, пероксидаза, как указано выше, реагирует с самыми различными веществами. Таким образом, по-видимому, нет никакой группы, реакция с которой была бы специфичной для пероксидазы, тогда как каталаза во всех реакциях вступает во взаимодействие только с гидроксильной группой, например в RCHOH или Н2О2; замещение водорода в этой группе исключает возможность реакции с каталазой. Имеются также различия в кинетическом порядке пероксидатического действия каталазы и пероксидазы. Чане [375] считает, что небольшие концентрации перекиси водорода, как правило, способствуют проявлению пероксидатического действия каталазы, тогда как при более значительных концентрациях возможно проявление каталатического действия. [29]
Фермент каталаза также оказывает пероксидатическое действие, хотя исключительная его способность к действию в качестве катализатора разложения в течение длительного времени маскировала указанное свойство и отвлекала от него внимание, Это пероксидатическое действие легко понять в свете реакций ( 46) и ( 47), однако имеются значительные различия в отношении пероксидатического действия между каталазой и пероксидазой. При исследовании этого действия каталазы [373] сделано наблюдение, что оно требует непрерывного поступления перекиси водорода, например получаемой под действием дегидразы. Имеются также различия в отношении специфичности субстратов. Каталаза действует пероксидатически на первичные и вторичные спирты и на нитрит. Скорость такой реакции зависит [391] от длины цепи спирта. С другой стороны, пероксидаза, как указано выше, реагирует с самыми различными веществами. Таким образом, по-видимому, нет никакой группы, реакция с которой была бы специфичной для пероксидазы, тогда как каталаза во всех реакциях вступает во взаимодействие только с гидроксильной группой, например в RCHOH или Н2О2; замещение водорода в этой группе исключает возможность реакции с каталазой. Имеются также различия в кинетическом порядке пероксидатического действия каталазы и пероксидазы. Чане [375] считает, что небольшие концентрации перекиси водорода, как правило, способствуют проявлению пероксидатического действия каталазы, тогда как при более значительных концентрациях возможно проявление каталатического действия. [30]