Алкогольдегидрогеназа
Cтраница 2
В этой схеме используются три фермента: алкогольдегидрогеназа ЕЬ альдегиддегидрогеназа Еа и формиатдегидрогеназа ЕЗ. Сложность осуществления этого процесса заключается в малой электрохимической активности НАД. Эту трудность можно обойти, если ввести еще один переносчик, быстро реагирующий с НАДН и окисляющийся на электроде. Показано, что при окислении форми-ата в качестве такого переносчика может быть использован ме-тилвиологен ( МВ), дающий практически обратимую волну не только на платиновом, но и на угольном электроде. [16]
Ферментативное восстановление транс-ретинальдегида до транс-ретинола, катализируемое алкогольдегидрогеназой, происходит в рецепторной мембране, и для него необходим NADH. Ретинол транспортируется из рецепторной клетки в пигментный эпителий, где он может этерифицироваться жирными кислотами, главным образом пальмитиновой и стеариновой. Ретинол и ретиниловые эфиры, образовавшиеся из зрительных пигментов вместе с запасными, сохраняющимися в пигментном эпителии, образуют внутриклеточный фонд. Изомеризация ретинола, ретинальдегида и ретиниловых эфиров до ыс-11 - формы продемонстрирована в эксперименте. Расщепление ыс-ретини-ловых эфиров ( где происходит этот процесс, пока не известно) дает 11 - ыс-ретинол, который может быть снова окислен в рецепторе до альдегида. Полагают, что рекомбинация 11 - нс-ре-тинальдегида с опсином происходит спонтанно. [17]
Определение НАД основано на специфической реакции восстановления кофермента алкогольдегидрогеназой в присутствии субстрата - этанола. Реакцию смещают в сторону образования ацеталь-дегида связыванием последнего семикарбазидом. [18]
Исследование обратной реакции свидетельствует в пользу того, что алкогольдегидрогеназа удаляет водород только с той стороны кольца никотинамида, к которой он был первоначально присоединен. Так, ферментативное повторное окисление ацетальдегидом ферментативно полученного NADD схема ( 7) приводит к образованию NAD, не содержащего дейтерия. [19]
Известно, что поступивший в организм алкоголь окисляется ферментом алкогольдегидрогеназой ( АДГ) в аце-тальдегид. Плацента человека, как было показано, проницаема для алкоголя, система же АДГ созревает лишь в раннем детском возрасте. Поэтому алкоголь может накапливаться в тканях эмбриона и плода, его содержание в крови плода может превышать содержание в крови матери. Повышение содержания алкоголя в тканях плода частично может быть обусловлено и повышенным содержанием воды в организме плода, так как алкоголь содержится преимущественно в водной фазе. Установлено, что при концентрации алкоголя в крови матери 130 мг на 100 мл его концентрация в тканях плода составляла 155 мг на 100 мл. [20]
Рассмотрим спектр свободного НАД-Н2 и НАД-Н2, связанного с алкогольдегидрогеназой ( см. фиг. [21]
 |
Константы Михаэлиса нативного и иммобилизованного трипсинаа. [22] |
На матрицах с различной степенью гидрофобности ( полученных с использованием сополимера акриламид-метилметакрилат) была иммобилизована алкогольдегидрогеназа. Кт ( каж) для н-бутанола в качестве субстрата смещались в сторону более низких значений пропорционально возрастанию гидрофобного характера препаратов сополимера, с которым фермент был связан. [23]
Известно, что цинк входит в состав простетическнх групп более 80 ферментов, таких, как алкогольдегидрогеназа, карбоангидраза, ДНК - и РНК-полиме-разы и карбоксипептидаза. В больших концентрациях цинк содержится в предстательной железе, сперматозоидах и тканях глаза, где он выполняет важные, но до сих пор неизвестные функции. В некоторых сельских районах Ирана обнаружена эндемическая недостаточность цинка. Она проявляется в миниатюрном телосложении, анемии, низком уровне сывороточного альбумина и замедленном развитии репродуктивной системы. Недостаточность цинка обусловлена потреблением традиционного местного блюда-бездрожжевого хлеба из частично очищенной муки, который содержит большое количество фитата ( рис. 26 - 24); последний очень прочно связывается с цинком, затрудняя тем самым его всасывание кишечником. Необьиное и довольно редкое проявление недостаточности цинка у отдельных людей состоит в нарушении восприятия ими вкуса и запахов. Некоторые запахи искажаются до такой степени, что обыкновенная пища или кулинарные запахи кажутся отвратительными, в результате чего у человека возникает отвращение к пище и как следствие наблюдается сильное похудание. Много цинка в мясе, яйцах, морских продуктах, молоке, печени, но его мало во фруктах и зеленых овощах. [24]
В результате проведенной работы были получены 9 штаммов уксуснокислых бактерий, из которых 3 штамма проявили активность вторичной алкогольдегидрогеназы в отношении ацетона. [25]
Кроме ферментов, в которых весь связанный металл либо его часть играют в большей степени структурную, чем каталитическую роль, известны ферменты, содержащие два различных металла, которые, по-видимому, играют одинаковую каталитическую роль, например алкогольдегидрогеназа, выделенная из дрожжей, выращенных в присутствии СоСЬ [92] ( разд. В таких случаях смешанная стехиометрия может быть результатом либо наличия двух металлоферментов в соответствующем соотношении, либо образования истинного гибридного металлофермента. Нет простых методов, чтобы установить разницу между этими двумя возможностями, кроме тех случаев, когда в результате замещения металла происходит изменение свойств белка. И хотя включение нескольких металлов в фермент является обычно результатом заранее обдуманного введения этих металлов в пищу или в питательную среду, однако такие же ситуации могут иметь место и в природе, и, таким образом, могут возникать те же проблемы оценки числа активных центров. [26]
С; 11 - трипсиновый ингибитор ( из бобов сои); 12 - - карбоксипептидаза А; 13 - фосфоглицеромутаза; 14 - глицеролфосфатде-гндрогеназа; 15 - креатинкиназа; 16 - глицерол-б Р - дегидрогеназа ( из дрожжей); 17 - аспарагиназа; 18 - алкогольдегидрогеназа; 19 - альдолаза; 20 - глюкозоксидаза. [28]
В качестве примера оксидоредуктазы может быть приведена алкогольдегидрогеназа. Алкогольдегидрогеназа является переносчиком водорода на никотинамидадениндинуклеотид, который присоединив водород, превращается в восстановительную форму - НАД. [29]
Фермент, ответственный за эту реакцию, называется алкоголъдегидрогена-зой. Дрожжевая алкогольдегидрогеназа имеет молекулярный вес 151 000 и содержит четыре независимых друг от друга каталитических центра; в то же врем: я из печени млекопитающих получен аналогичный фермент с приблизительно вдвое меньшим молекулярным весом и двумя каталитическими центрами. В молекулах этих ферментов присутствует также Zn, число атомов которого равно числу каталитических центров. Ферменты стереоспецифичны в отношении переноса водорода как в молекуле спирта, так и в никотин-амидном кольце ( см. стр. [30]
Страницы: 1 2 3 4