Cтраница 3
Посевным материалом называют чистую культуру микроорганизма, которая получается путем ее последовательного пересева из пробирки в колбу, а затем в аппараты увеличивающегося объема, вплоть до большого посевного аппарата, из которого она передается в производство при вводе в работу очередного ферментатора, или в работающий ферментатор для поддержания в нем роста основной культуры продуцента. [31]
Микроорганизмы - продуценты белка - выращивают в ферментаторе / ( рис. 1), куда задают питательную среду, соли, аммиачную воду, воздух и засевную чистую культуру микроорганизма из посевного аппарата. Готовая культуральная жидкость с биомассой из ферментатора насосом перекачивается во флотатор 2, где происходит разделение ее на богатую клеточной биомассой пену и отработанную культуральную жидкость. Из внутреннего стакана флотатора дрожжевая суспензия перекачивается насосом 3 через газоотделитель 4 на сепараторы 5 первой группы. [32]
Технология получения аминокислот базируется на принципах ферментации продуцентов и выделении вторичных метаболитов, то есть размножают маточную культуру вначале на агаризованной среде в пробирках, затем - на жидкой среде в колбах, инокуля-торах и посевных аппаратах, а затем в головных ( основных) ферментаторах. Изолированные чистые кристаллы целевого продукта обычно высушивают под вакуумом и упаковывают. [33]
![]() |
Подход к выбору биореакторов для аэробных микроорганизмов. [34] |
Инокуляторы должны отвечать следующим основным требованиям: конструктивные простота, удобство и надежность эксплуатации. Посевные аппараты отечественного производства имеют следующие объемы: 10, 5, 2 и 0 63 м3, диаметром от 0 9 до 2 м и с частотой вращения мешалки от 180 до 270 оборотов в минуту. [35]
Далее приступают к посеву среды и выращиванию посевного материала. Среду в посевном аппарате засевают двумя способами: мицелием из посевных колб и мицелием из другого посевного аппарата. В первом случае перед посевом давление в аппа рате снижают до нуля и через пламя спиртового факела через посевной лючек вливают 300 мл ( 3 колбы) посевного материала. Количество посевного материала в этом случае дозируется в зависимости от времени посева. [36]
Перед засевом среды из ферментера отбирают пробы для определения рН, стерильности и для биохимических анализов. Среду ферментера засевают мицелиальной культурой из посевных аппаратов в количестве 4 - 8 % от объема среды. При разности избыточных давлений в ферментере ( 0 2 - 0 3 ат) и иноку-ляторе ( 1 - 1 5 ат содержимое посевного аппарата выдавливается сжатым воздухом по посевной линии в ферментер. После посева остаток посевного материала из линии вытесняется паром в конденсатную линию. В перерывах между посевами посевная линия находится под паром. Периодически, не реже одного раза в месяц, посевную линию проверяют и спрессовывают так же, как коммуникации лодачи среды ( стр. [37]
На коллекторе установлен датчик регулирующего манометра, который с помощью регулирующего клапана, установленного на выходе из головного фильтра, поддерживает избыточное давление воздуха в коллекторе не выше 1 5 - 1 7 ат. Из коллектора воздух поступает в индивидуальные фильтры посевных аппаратов и ферментеров. [38]
Для засева закрывают вентиль на выходной воздушной линии у посевного аппарата и поднимают давление до 0 06 - 0 08 МПа, а в ферментаторе оставляют давление 0 02 - 0 03 МПа. После этого открывают вентиль на линии передавливания у посевного аппарата и ферментатора и за счет разности давления посевную культуру передавливают в ферментатор. Закрывают вентиль на линии передавливания, включают мешалку и начинают процесс выращивания культуры в ферментаторе. По окончании засева линию передавливания пропаривают. Количество посевного материала составляет 3 % к объему питательной среды в ферментаторе. [39]
Такая схема позволяет использовать в производстве до 30 % посевного материала. По этой схеме из инокулятора поток культуры идет в посевной аппарат только во время загрузки. Один из них поочередно выполняет функции промежуточной емкости для создания непрерывности при поочередной подготовке и стерилизации аппаратуры. Когда схема работает на установившемся режиме, то 3 посевных ферментатора находятся в стадии выращивания культуры, а четвертый - в состоянии подготовки. Таких линий на производстве может быть несколько в зависимости от производительности предприятия и количества задаваемого посевного материала. Но используя непрерывный способ приготовления посевного материала, следует помнить, что при длительной работе батареи возможно возникновение ре-вертантов и утрата свойств продуцентом. Наблюдение за культурой здесь особенно важно. [40]
Способ подготовки посевного материала в виде конидий описан ранее. Инокулят подращивают сначала в инокуляторе, затем - в посевном аппарате ( примерно в 1 / 10 объема основного ферментатора) на среде с 3 - 4 % сахара. После окончания ферментации ( контроль - снижение кислотообразования) мицелий гриба отфильтровывают, а культуральную жидкость подвергают обработке, как это описано выше. [42]